临床经验
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世界华人消化杂志. 2013-12-18; 21(35): 4019-4023
Published online 2013-12-18. doi: 10.11569/wcjd.v21.i35.4019
落新妇甙对缺血再灌注损伤肝脏HO-1表达的影响
慕宁, 江艺, 吕立志
慕宁, 江艺, 吕立志, 中国人民解放军南京军区福州总院肝胆外科 福建省福州市 350025
慕宁, 主治医师, 主要从事肝胆外科、肝移植临床及相关的基础研究.
基金项目: 福建省自然科学基金重点资助项目, No. 2011Y0046.
作者贡献分布: 慕宁与江艺完成研究总体设计与主要实验内容; 吕立志完成部分实验及数据的整理、分析.
通讯作者: 江艺, 主任医师, 博士生导师, 350025, 福建省福州鼓楼区西二环北路156号, 中国人民解放军南京军区福州总院肝胆外科. jiangyi183@yahoo.com.cn
收稿日期: 2013-07-19
修回日期: 2013-08-06
接受日期: 2013-11-19
在线出版日期: 2013-12-18
Abstract

目的: 通过观察落新妇甙对肝脏热缺血再灌注损伤中血红素加氧酶1(heme oxygenase-1, HO-1)表达的影响, 探讨其缺血再灌注保护作用的分子机制.

方法: C57BL/6小鼠随机分为4组(n = 8): 假手术组(Sham)、模型组(I/R)、落新妇甙小剂量(10 mg/kg)干预组和落新妇甙大剂量(40 mg/kg)干预组. 缺血前24和1 h干预组小鼠腹腔注射分别给予10或40 mg/kg的落新妇甙, 建立肝左、中叶70%部分肝缺血再灌注模型, 模型组和假手术组给予同样体积的生理盐水. 小鼠肝脏左叶缺血90 min、再灌注6 h后各实验组采集血液和肝脏组织样本. 检测血清中丙氨酸转氨酶(alanine transaminase, ALT)活性, Western blot检测肝组织中核因子kB(nuclear factor kB, NF-kB)和HO-1蛋白含量, 半定量RT-PCR检测上述分子mRNA表达情况.

结果: 落新妇甙小、大剂量干预后血清ALT含量较I/R对照组均明显下降(假手术组: 142 U/L±25 U/L; 模型组: 3521 U/L±270 U/L; 落新妇甙小剂量干预组: 1766 U/L±179 U/L; 落新妇甙大剂量干预组: 1067 U/L±101 U/L, P<0.01); 落新妇甙小、大剂量干预组肝组织中NF-kB蛋白表达与I/R模型对照组比较均渐次降低; 落新妇甙小、大剂量干预组肝组织中HO-1蛋白表达与I/R模型对照组比较均渐次升高, 亦与半定量RT-PCR结果相符(假手术组: 0.53 U/L±0.07 U/L; 模型组: 1.00 U/L±0.11 U/L; 落新妇甙小剂量干预组: 1.17 U/L±0.16 U/L; 落新妇甙大剂量干预组: 1.57 U/L±0.07 U/L小剂量干预组P<0.05; 大剂量干预组P<0.01).

结论: 落新妇甙干预能降低缺血再灌注损伤(ischemia/reperfusion injury, IRI)引起的血清ALT水平升高; 落新妇甙干预能降低IRI肝组织中NF-kB蛋白的高表达, 促进IRI肝组织HO-1蛋白和mRNA的表达, 显示其保护作用与促进HO-1的表达密切相关.

Keywords: 丙氨酸转氨酶; 核因子-κB; 血红素加氧酶1; Western blot; 半定量RT-PCR

核心提示: 落新妇甙对小鼠肝脏热缺血再灌注损伤具有保护作用, 落新妇甙干预能降低缺血再灌注损伤肝脏核因子κB(nuclear factor κB)蛋白的高表达, 显示其对Toll样受体4(Toll like receptor-4, TLR-4)炎症信号通路具有抑制作用. 同时落新妇甙干预能促进缺血再灌注损伤(ischemia/reperfusion injury, IRI)肝组织血红素加氧酶1(heme oxygenase-1, HO-1)蛋白和mRNA的表达, 显示其对TLR-4通路的抑制与促进HO-1的表达密切相关.