临床研究
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世界华人消化杂志. 2013-11-28; 21(33): 3661-3669
Published online 2013-11-28. doi: 10.11569/wcjd.v21.i33.3661
锯齿状病变患者组织中CDX2基因启动子中上游区域的甲基化
许春伟, 王鲁平, 葛畅, 张玉萍, 方园
许春伟, 王鲁平, 葛畅, 张玉萍, 方园, 中国人民解放军北京军区总医院病理科 北京市 100700
许春伟, 主要从事胃肠消化系肿瘤的基础与临床研究.
基金项目: 首都卫生发展科研专项基金资助项目, No. 2011-5021-02.
作者贡献分布: 主要实验、资料分析、统计及文章撰写由许春伟完成; 研究设计、文章修改及审阅由王鲁平完成; 资料分析、样本处理及生物信息学分析由葛畅、张玉萍及方园完成.
通讯作者: 王鲁平, 教授, 100700, 北京市东城区南门仓5号, 中国人民解放军北京军区总医院病理科. bzwlp@yahoo.com
收稿日期: 2013-08-05
修回日期: 2013-09-12
接受日期: 2013-10-20
在线出版日期: 2013-11-28
Abstract

目的: 观察锯齿状病变组织中CDX2基因甲基化状态和CDX2蛋白表达, 探讨临床病理意义和在癌变通路中的作用, 同时探讨CDX2基因在不同年龄层段甲基化状况.

方法: 应用Taqman探针qPCR(MethyLight)方法检测实验组225例锯齿状病变(包括96例增生性息肉(hyperplastic polyp, HP)、61例广基(无蒂)锯齿状腺瘤/息肉(sessile serrated adenoma/polyp, SSA/P)和68例传统型锯齿状腺瘤(traditional serrated adenoma, TSA)、对照组54例管状腺瘤(tubular adenoma, TA)、69例结直肠癌(colorectal cancer, CRC)和42例正常组织中CDX2基因CpG岛甲基化状态, 并通过测序法验证扩增序列, 同时应用免疫组织化学方法检测实验组116例锯齿状病变(包括52例HP、41例SSA/P、23例TSA)、对照组20例TA、24例CRC和24例正常组织中CDX2蛋白的表达情况.

结果: CDX2基因启动子甲基化率在对照组正常组织与实验组HP(P = 0.019)、SSA/P(P = 0.015)和TSA(P = 0.002), 对照组CRC与实验组HP(P = 0.000)、SSA/P(P = 0.000)和TSA(P = 0.000), 对照组TA与实验组TSA(P = 0.027)均有显著性差异; CDX2蛋白阳性率在对照组CRC与实验组HP(P = 0.001), 对照组TA与实验组HP(P = 0.005), 实验组HP和TSA(P = 0.038)均有显著性差异; CDX2基因启动子甲基化率和CDX2蛋白阳性率的相关性比较中, 实验组HP、SSA/P和TSA中P = 0.652, r = -0.064(极弱相关); P = 0.238, r = -0.182(极弱相关); P = 0.519, r = -0.142(极弱相关), 但两者有负相关趋势; CDX2基因启动子甲基化频率和不同年龄层段相关性比较实验组HP、SSA/P和TSA中P = 0.002, r = 0.312(弱相关); P = 0.000, r = 0.473(中等程度相关); P = 0.001, r = 0.392(弱相关), 对照组TA中P = 0.001, r = 0.440(中等程度相关).

结论: 组织中CDX2基因启动子中上游区域甲基化状态比较复杂, 极少部分甲基化状态可能有诱导CDX2蛋白表达下调, 在锯齿状通路的发生发展中影响作用也甚微; 大部分甲基化可能随着年龄增加而逐渐增加.

Keywords: DNA甲基化; CDX2基因; qPCR; DNA探针; 锯齿状病变

核心提示: Caudal type homeobox transcription factor 2(CDX2)基因启动子中上游区域甲基化状态比较复杂, 大部分甲基化可能随着年龄增加而逐渐增加.