研究快报
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世界华人消化杂志. 2012-06-18; 20(17): 1553-1558
Published online 2012-06-18. doi: 10.11569/wcjd.v20.i17.1553
肠上皮细胞来源整合素αVβ6对树突状细胞功能的影响
李晓蕾, 郑鹏远, 李付广, 刘志强
李晓蕾, 郑鹏远, 刘志强, 郑州大学第二附属医院消化内科 郑州大学医学微生态学研究所 河南省郑州市 450014
李付广, 郑州大学基础医学院微生物与免疫教研室 河南省郑州市 450052
李晓蕾, 在读硕士, 主要从事消化系统疾病研究.
基金项目: 国家自然科学基金资助项目, No. 31070799.
作者贡献分布: 李晓蕾与郑鹏远对此文贡献均等; 此课题由李晓蕾与郑鹏远设计; 研究过程由李晓蕾完成; 研究所用新试剂和分析工具由郑鹏远与李付广提供; 数据分析由李晓蕾完成; 本论文写作由李晓蕾、郑鹏远及刘志强完成.
通讯作者: 郑鹏远, 教授, 主任医师, 博士生导师, 450014, 河南省郑州市经八路2号, 郑州大学第二附属医院消化内科, 郑州大学医学微生态学研究所. medp7123@126.com
电话: 0371-63921467 传真: 0371-63934118
收稿日期: 2011-12-06
修回日期: 2012-04-26
接受日期: 2012-05-18
在线出版日期: 2012-06-18
Abstract

目的: 研究肠上皮细胞(intestinal epithelial cells, IEC)来源的整合素αVβ6对骨髓来源树突状细胞(bone marrow-derived dendritic cells, BMDCs)功能的影响.

方法: 分离、培养小鼠IEC和DC, IEC经卵清蛋白(ovalbumin, OVA)刺激后, 多步离心法制备外泌体(exosome). 应用免疫胶体金对外泌体中的整合素αVβ6进行定性, 通过免疫磁珠技术, 分离获取DC, 流式细胞仪检测分离后DC纯度. 然后将分离后的DC分5组, 分别为空白组、OVA组、外泌体组、外泌体+抗整合素αVβ6抗体组、外泌体+羊抗小鼠IgG组, 观察各组对脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)刺激的反应. ELISA法检测DC在LPS刺激前后IL-12p70的表达. LPS刺激前活性转化生长因子β1(transforming growth factor-β1, TGF-β1)以及总TGF-β1的表达.

结果: OVA组与空白组相比, 总TGF-β1表达明显增高(226.636±40.355 vs 176.947±23.072, P<0.05), 但活化TGF-β1表达无明显变化(P>0.05). 空白组与外泌体+抗整合素αVβ6抗体组相比, 活化TGF-β1表达无明显变化(P>0.05), 但总TGF-β1表达明显增高(P<0.05). 外泌体组和外泌体+羊抗小鼠IgG组与空白组相比, 活化TGF-β1和总TGF-β1表达均明显增高(P<0.05). 相比空白对照组, LPS刺激48 h后外泌体组和外泌体+羊抗小鼠IgG组IL-12p70表达明显降低(P<0.05), OVA组及外泌体+抗整合素αVβ6抗体组IL-12p70表达无明显差异(P>0.05).

结论: IEC来源整合素αVβ6能增加DC活性, 以及TGF-β1和总TGF-β1的表达量, 并拮抗LPS对BMDC的促成熟作用.

Keywords: 外泌体; 整合素αVβ6; 树突状细胞; 转化生长因子β1