修回日期: 2011-01-09
接受日期: 2011-01-11
在线出版日期: 2011-02-28
目的: 研究肝细胞癌相关基因表达, 建立肝癌分子诊断指数, 以期能更准确的诊断肝癌.
方法: 采用实时荧光定量PCR检测40例肝细胞癌患者癌组织和配对的癌旁2 cm及手术切缘组织、10例肝硬化组织、10例正常肝脏组织中11个基因的表达, 以管家基因G3PDH为对照, 2-ΔΔCT法计算目的基因相对表达量, 挑选出特异性好且与正常肝、肝硬化组织表达差异大的肝癌相关基因, 依据这些基因在组织中表达异常的个数建立分子诊断指数.
结果: 在40例癌组织中, 抑癌基因PRDM2、IGFBP3、DLC-1分别有65.0%、75.0%、67.5%的标本表达<3倍正常肝组织, 癌基因GPC3、STMN、CCNA2、BIRC5、AFP分别有87.5%、77.5%、82.5%、85.0%、67.5%的标本表达>3倍正常肝组织, 并且与肝硬化组织表达差异显著(0.45±0.69 vs 0.50±0.20; 0.17±0.20 vs 0.67±0.47; 0.29±0.48 vs 0.58±0.60; 677.57±999.30 vs 4.41±3.99; 17.56±28.28 vs 1.17±1.08; 53.17±103.64 vs 2.09±1.50; 16.53±16.39 vs 1.82±1.39; 4 445.70±1 1642.87 vs 0.86±0.43, 均P<0.05). 以此8个基因建立分子诊断指数, 其在肝硬化、手术切缘、癌旁2 cm、癌组织中分别为2.2±1.5、3.0±1.6、2.9±1.5、6.3±1.2, 癌组与肝硬化组、切缘组、癌旁2 cm组差异显著. 以肝硬化组作为对照组, 当分子诊断指数≥4诊断为肝癌时, ROC曲线的敏感性为100%, 特异性为90%, AUC = 0.995.
结论: 利用荧光定量PCR检测肝癌相关基因表达, 成功建立分子诊断指数, 提高了肝癌诊断的敏感性及特异性.