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永生化骨髓间充质干细胞的生物学特性
方驰华, 程斌, 范应方, 南方医科大学珠江医院肝胆一科 广东省广州市 510282
方驰华, 教授, 主要从事肝脏肿瘤外科、腹腔镜外、数字化虚拟肝脏及肝脏干细胞研究.
作者贡献分布: 本实验设计由方驰华完成; 实验实施及文章撰写由程斌完成; 论文修改由范应方完成.
通讯作者: 方驰华, 510282, 广东省广州市, 南方医科大学珠江医院肝胆一科. fangch_dr@126.com
电话: 020-84360607
收稿日期: 2009-01-06
修回日期: 2009-01-20
接受日期: 2009-02-09
在线出版日期: 2009-03-28
修回日期: 2009-01-20
接受日期: 2009-02-09
在线出版日期: 2009-03-28
Abstract
目的: 探讨永生化骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs)的生物学特性.
方法: 通过质粒pCMVSV40T/PUR导入大鼠BMSCs, 建立永生化BMSCs. 在倒置显微镜下观察细胞形态; 采用检测碱性磷酸酶的活性, 了解永生化BMSCs是否可分化为成骨细胞; 采用裸鼠皮下接种实验检测细胞的致瘤性; 应用不同血清浓度进行细胞培养及冻存, 描绘其生长曲线及复苏后的活性.
结果: 未导入质粒的BMSCs培养至15代后细胞不能继续传代, 呈明显衰老迹象, 而永生化BMSCs培养至5代后仍可保持较好的活性, 但具有明显接触抑制; 永生化BMSCs具有分化为成骨细胞的能力; 裸鼠接种后无致瘤性; 与其他血清浓度相比, 20%血清培养组的细胞生长速度较快; 50%及90%血清组其复苏后较20%血清组活性高(P<0.05).
结论: 在体外, pCMVSV40T/PUR构建的永生化BMSCs具有活性较好等特性, 且无成瘤性, 可为BMSCs的研究及应用提供大量的细胞来源.
Keywords: 猴肾病毒40; 骨髓间充质干细胞; 永生化