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世界华人消化杂志. 2006-05-18; 14(14): 1367-1371
Published online 2006-05-18. doi: 10.11569/wcjd.v14.i14.1367
Published online 2006-05-18. doi: 10.11569/wcjd.v14.i14.1367
实时荧光定量PCR方法检测幼兔粪便双歧杆菌的实验研究
陈津津, 蔡威, 上海交通大学医学院附属新华医院临床营养中心 上海市 200092
陈津津, 2004年上海交通大学医学院博士生, 主治医师, 主要从事胃肠道微生态的研究.
基金项目: 国家自然科学基金资助项目 , No. 30271350 .
通讯作者: 蔡威, 200092, 上海市控江路1665号, 上海交通大学医学院附属新华医院临床营养中心. caiw204@yahoo.com.cn
电话: 021-65790000
收稿日期: 2006-03-10
修回日期: 2006-03-19
接受日期: 2006-03-24
在线出版日期: 2006-05-18
修回日期: 2006-03-19
接受日期: 2006-03-24
在线出版日期: 2006-05-18
Abstract
目的: 应用实时荧光定量PCR技术对实验幼兔粪便内双歧杆菌进行定量分析.
方法: 依据双歧杆菌16S rDNA序列设计属特异性引物, 以常规PCR产物经克隆后的质粒DNA为标准品, 经光谱定量、梯度稀释后制备标准曲线. 抽提正常对照组和双歧杆菌喂饲组幼兔粪便内的细菌基因组DNA, 用实时荧光定量PCR技术定量分析样品中双歧杆菌数量.
结果: 两组幼兔粪便内双歧杆菌测定结果均成阳性, 双歧杆菌喂饲组0.05 g湿粪内菌量的对数值较对照组显著升高(6.37±0.58 vs 5.18±0.98, P = 0.004).
结论: 实时荧光定量PCR方法可正确定量实验兔粪便内双歧杆菌数量.
Keywords: 实时荧光定量PCR; 双歧杆菌; 粪便