逆转录病毒载体介导反义K-ras基因治疗胰腺癌的实验研究

表1 合成的引物序列

名称	引物序列	产物长度
反义序列1(exon1及侧翼序列)	上游: 5'-CTC GAA TTC ACT GGT GGA GTA GAT AG-3'	294 bp
	下游: 5'-CTC GGA TCC GGT CAG AGA AAC CTT TAT CTG-3'
反义序列2(exon4B及侧翼序列)	上游: 5'-CTC GAA TTC CAG TTG CCT GAA GAG CAT A-3'	558 bp
	下游: 5'-CTC GGA TCC CAA CAT TCA CAC TTG GTA AGA-3'
RT-PCR	上游: 5'-CTC GGA TCC GTC CTA ATA TAT GTA ATA TAT-3'	579 bp
	下游: 5'-CTC GAA TTC CAT TAA GTT TCA CAC CAA CAT-3'
β-actin	上游: 5'-TGA CGG GGT CAC CCA CAC TGT GCC CAT CTA-3'	661 bp
	下游: 5'-CTA GAA GCA GCG GTG GAC GAT GGA-3'

下划线部分为引入的限制性酶切位点.

表2 转染重组逆转录病毒前后胰腺癌细胞凋亡情况

	未转染	转染pLXSN	pLXSN-AS-exon1	pLXSN-AS-exon4B
凋亡率(PC-3)	3.24%	2. 86%	10.28%bb	6.7%dd
凋亡率(BxPC-3)	2.68%	4.51%	3.00%	2.54%

χ² = 393.157,

^bP<0.01 vs 未转染; χ² = 448.462, ^bP<0.01 vs pLXSN; χ² = 126.737,

^dP<0.01 vs 未转染; χ² = 161.986, dP<0.01 vs pLXSN.

表3 PC-3和BxPC-3胰腺癌裸鼠移植瘤模型

指标	pLXSN	pLXSN-AS-exon1	pLXSN-AS-exon4B
肿瘤体积(mm3)	631.8±81.5	361.5±97.7	403.5±71.6
肿瘤重量(g)	0.60±0.09	0.32±0.09b	0.352±0.05b
肿瘤体积(mm3)	400.8±73.3	385.5±61.7	465±79.9
肿瘤重量(g)	0.356±0.07	0.338±0.09	0.412±0.07

F =15.387,

^bP<0.01 vs pLXSN.