基础研究
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世界华人消化杂志. 2018-10-28; 26(30): 1742-1747
在线出版日期: 2018-10-28. doi: 10.11569/wcjd.v26.i30.1742
胃腺癌中SIX1和CD147的表达及意义
邱雷, 胡奕, 邓中民
邱雷, 胡奕, 邓中民, 湖州市第一人民医院消化科 浙江省湖州市 313000
邱雷, 住院医师, 研究或发展方向为消化内科肝胆胰方向.
ORCID number: 邱雷 (0000-0002-6031-3477).
作者贡献分布: 此课题由邱雷与胡奕设计; 研究过程由邱雷、胡奕及邓中民操作完成; 研究所用实验试剂的检测及分析由邱雷与胡奕完成; 数据分析由邓中民完成; 本论文写作由邱雷完成.
通讯作者: 邱雷, 住院医师, 313000, 浙江省湖州市吴兴区广场后路158号, 湖州市第一人民医院消化科. qiuleikaoyan@163.com
收稿日期: 2018-08-16
修回日期: 2018-09-08
接受日期: 2018-09-18
在线出版日期: 2018-10-28

目的

检测胃腺癌中SIX1和CD147两个因子的表达, 关注二者的相关性及其临床意义.

方法

本实验选择79例胃腺癌作为观察组, 留取临床资料及术后留取的石蜡标本, 选择45例正常胃黏膜的石蜡标本作为对照组, 应用免疫组化二步法检测二组中SIX1和CD147的表达.

结果

二组中SIX1和CD147的表达差别有统计学意义, 观察组中SIX1和CD147的表达与肿瘤的最大径和浸润深度密切相关, SIX1的表达与淋巴结转移密切相关, CD147的表达与分化程度密切相关, 线性相关分析显示观察组中SIX1和CD147的表达具有正相关性, 观察组中SIX1和CD147的表达与生存时间相关.

结论

SIX1和CD147在胃腺癌组织中表达明显升高, 对肿瘤的形成和发展有一定的调节作用. SIX1和CD147可能具有正向协同作用, SIX1和CD147的表达与预后相关.

关键词: 胃腺癌; 同源异型蛋白SIX1; 白细胞分化抗原147; 预后

核心提要: SIX1和CD147在胃腺癌中高表达, 在细胞水平主要表达到细胞浆中, 其高表达在胃腺癌病变形成过程中具有促进作用, 在肿瘤进展中的作用更明显, 二者具有协同正向作用, 认为二种蛋白异常表达具有重要意义, 且SIX1和CD147的表达与预后相关.


引文著录: 邱雷, 胡奕, 邓中民. 胃腺癌中SIX1和CD147的表达及意义. 世界华人消化杂志 2018; 26(30): 1742-1747
Significance of expression of SIX1 and CD147 in gastric adenocarcinoma
Lei Qiu, Yi Hu, Zhong-Min Deng
Lei Qiu, Yi Hu, Zhong-Min Deng, Department of Digestive Medicine, Huzhou First People's Hospital, Huzhou 313000, Zhejiang Province, China
Correspondence to: Lei Qiu, Resident Doctor, Department of Digestive Medicine, Huzhou First People's Hospital, 158 Guangchang Hou Road, Wuxing District, Huzhou 313000, Zhejiang Province, China. qiuleikaoyan@163.com
Received: August 16, 2018
Revised: September 8, 2018
Accepted: September 18, 2018
Published online: October 28, 2018

AIM

To detect the expression of SIX1 and CD147 and analyze their clinical significance in gastric adenocarcinoma.

METHODS

Seventy-nine cases of gastric adenocarcinoma were collected as an observation group, and 45 normal gastric mucosal samples were collected as a control group. Expression of SIX1 and CD147 in these samples was detected by immunohistochemistry.

RESULTS

Expression of SIX1 and CD147 differed significantly between the two groups. Expression of SIX1 and CD147 was correlated with maximum tumor diameter and tumor infiltration. Expression of SIX1 was correlated with lymph node metastasis, and expression of CD147 was correlated with differentiation. There was a positive correlation between SIX1 and CD147 expression in the observation group. The expression of SIX1 and CD147 was correlated with survival time.

CONCLUSION

Higher expression of SIX1 and CD147 can promote tumor formation and progression in gastric adenocarcinoma. SIX1 and CD147 may have synergistic effects, and they correlate with prognosis in gastric adenocarcinoma.

Key Words: Gastric adenocarcinoma; SIX1; CD147; Prognosis


0 引言

胃腺癌临床上多见, 好发人群为中老年人, 分化常较差, 病变进展常较快. 腺癌细胞具有高增殖性, 但是病变进展中其影响因素较多, 其中不同基因和蛋白异常表达失调是重要的促进因素. SIX1是一种转录调节蛋白, 可以调控下游多种基因的表达, 尤其是增殖相关基因[1]. CD147是超免疫家族成员, 其存在于机体各系统中, 参与不同的生理过程, 如炎症过程、损伤修复过程等[2]. 近年研究认为CD147与肿瘤的增殖和转移相关[3]. 本文关注胃腺癌组织中SIX1和CD147的表达, 分析其相关性.

1 材料和方法
1.1 材料

收集2017-01/2017-12在湖州市第一人民医院确诊为胃腺癌, 并行根治手术的患者作为观察组. 纳入标准: (1)临床及随访资料完整; (2)符合WHO中的诊断标准. 排除标准: (1)伴有其它器官恶性肿瘤; (2)伴有其它组织学分化的肿瘤; (3)术前有放、化疗史. 本组共观察79例, 年龄43-88岁, 平均年龄58.6岁. 其中男42例, 女37例. 选择上述病例中的45例(距肿瘤边缘>5 cm)正常胃黏膜的石蜡标本作为对照组, 年龄44-85岁, 平均年龄58.9岁. 其中男23例, 女22例. 二组在常规因素的比较中无明显差别, 具有可比性.

1.2 方法

1.2.1 SIX1和CD147表达的检测: 二组均常规取材后, 均应用中性缓冲福尔马林固定, 常规脱水, 石蜡包埋, 切片后置于胶片上. SIX1和CD147均为浓缩液(购自武汉博士德生物技术公司), 先行预实验, 选择最佳显色的浓度用于正式实验(SIX1为1:300, CD147为1:150). 正式实验均应用免疫组化二步法, DAB显色, 做好质控工作, 减少人为误差.

1.2.2 SIX1和CD147的结果判定: SIX1和CD147的阳性部位是细胞质, 着色强度: 无着色为0分; 弱为1分, 中为2分, 强为3分. 阳性判定: 上皮细胞集中分布区(×400)计数, 共5个视野, 取平均值, 以<5%为0分, 5%-10%(不包括10%)为1分, 以10%-30%(不包括30%)为2分, 以20%-50%(不包括50%)为3分, 以>50%为4分. 二者相加为最终评分, 均以≤3分为阴性, 以>3分为阳性. 分别计算肿瘤组织中蛋白表达的阳性率.

统计学处理 采用SAS 6.12进行分析, 行χ2检验、生存分析和线性相关性分析, 均以P<0.05为差别有统计学意义.

2 结果
2.1 二组中SIX1和CD147阳性率的比较

观察组中SIX1和CD147的阳性率均明显高于对照组(表1和图1).

表1 二组中SIX1和CD147阳性率的比较 n (%).
分组nSIX1
χ2PCD147
χ2P
+-+-
观察组7932 (40.5)47 (59.5)13.9100.00040 (50.6)39 (49.4)24.4650.000
对照组454 (8.9)41 (91.1)3 (6.7)42 (93.3)
图1
图1 胃腺癌中阳性表达(HE×200). A: SIX1; B: CD147.
2.2 观察组不同特征分组中SIX1和CD147阳性率比较

观察组中SIX1和CD147的表达与肿瘤的最大径和浸润深度密切相关, SIX1的表达与淋巴结转移密切相关, CD147的表达与分化程度密切相关(表2).

表2 观察组不同特征分组中SIX1和CD147阳性率比较 n (%).
临床特征nSIX1
χ2PCD147
χ2P
+-+-
肿瘤最大径
<5 cm3910 (25.6)29 (74.4)7.0630.00814 (35.9)25 (64.1)6.6910.010
≥5 cm4022 (55.0)18 (45.0)26 (65.0)14 (35.0)
浸润深度
未及浆膜377 (18.9)30 (81.1)13.4580.00010 (27.0)27 (73.0)15.5150.000
浆膜及以外4225 (59.5)17 (40.5)30 (71.4)12 (28.6)
淋巴结转移
499 (18.4)40 (81.6)26.2440.00024 (49.0)25 (51.0)0.1410.707
3023 (76.7)7 (23.3)16 (53.3)14 (46.7)
分化程度
高-中298 (27.6)21 (72.4)3.1740.0758 (27.6)21 (72.4)9.7360.002
5024 (48.0)26 (52.0)32 (64.0)18 (36.0)
2.3 观察组中SIX1和CD147相关性

观察组中SIX1和CD147(r = 0.45, P = 0.0365)的表达具有正相关性(图2).

图2
图2 胃腺癌中SIX1和CD147表达的相关性.
2.4 观察组SIX1和CD147表达的生存分析

本组随访时间6-60 mo, 平均25.3 mo, 中位生存时间29 mo. 应用生存分析结果显示观察组中SIX1和CD147表达的阳性率与生存时间密切相关(P<0.05), 即SIX1和CD147高表达患者的生存时间短, 二者低表达患者的生存时间长(图3).

图3
图3 胃腺癌中蛋白表达与预后的关系. A: SIX1; B: CD147.
3 讨论

胃上皮性肿瘤认为来源于胃黏膜上皮, 其发生与上皮的异型增生有关, 病变进一步发展为癌, 肿瘤的恶性程度高, 尤其是低分化的肿瘤[4], 肿瘤伴有高增殖状态是重要的特征[5,6]. SIX1作为一种转录因子, 与多种组织器官的发育有关[7,8]. SIX1在正常的成熟组织中表达较少, 而在细胞恶变后表达明显升高, SIX1转录时可以调控多种促癌基因的表达, 如对cyclinAl、cyclinDl和Mum-1进行上调, 进而促进肿瘤细胞的增殖和生长加速[9,10]. 近年也有研究认为SIX1对提高TGF信号通路的活化和转录有明显作用, 能有效激活血管内皮生成因子(vascular endothelial growth factor, VEGF), 调控肿瘤间质的脉管生成, 为肿瘤的生长提供必要营养. 还有研究认为SIX1可以对肿瘤的迁移进行有效调控[11], 主要表现为对基质的降解和对迁移的活化作用. CD147蛋白编码269个氨基酸残基, 其N端有高度的糖基化特征, 由于糖基化的程度有组织的特异性, 不同的糖基化方式可以引起不同蛋白发挥不同的功能[12]. 糖基化方式与激活MMPs的能力有关[13,14]. 由于肿瘤细胞在浸润和迁移时需跨越基底膜, 并从原发部位脱离, 并向周围邻近组织直接蔓延, 并伴发远处播散, 在此过程中CD147的高表达可以诱导MMPs活性增加, 对有效降解基底膜的Ⅳ型胶原, 促进肿瘤细胞的转移有重要意义. 多种因子可以激活CD147的表达, 如EGFR等, 引起细胞的异型增殖程度增加, 肿瘤细胞的恶性程度增加[15]. 鉴于SIX1和CD147均具有促进肿瘤生长的侵袭的作用, 同时二者均可以促进VEGF的表达, 因此二者可能具有共同的表达特征.

本研究结果显示观察组中SIX1和CD147的表达明显高于对照组, 即二者高表达可以促进肿瘤的形成, 其具有类似癌基因的作用. 结果显示观察组中SIX1和CD147的表达与肿瘤的最大径和浸润深度密切相关, 提示二种蛋白与肿瘤的病变进程有关, 即形成浸润性肿瘤后呈树枝状向周围组织生长, 对局部组织和周围邻近器官形成明显的破坏作用, 也可以对胃组织周围组织侵犯起一定的促进作用. 结果显示SIX1的表达与淋巴结转移密切相关, 提示SIX1的高表达预示着肿瘤具有较强的转移特征. SIX1对肿瘤的迁移的作用可能与其对黏附素的调节有关, 如降低E-cadherin的表达, 使肿瘤细胞的同质性黏附作用下降, 细胞易于离开原发灶, 提高N-cadherin的表达, 使肿瘤的异质性黏附作用升高, 肿瘤细胞易于在异质性的介质中定植, 形成转移瘤[15,16]. 结果显示CD147的表达与分化程度密切相关, 提示CD147表达于细胞幼稚--成熟的分化过程, 而CD147更高表达在处于幼稚的阶段的肿瘤细胞, 此种肿瘤细胞的异型性明显, 细胞的增殖旺盛, 细胞生长活跃, 恶性程度高, 肿瘤患者的预后差. 线性相关分析显示观察组中SIX1和CD147具有正相关性, 提示其具有正向协同作用. SIX1和CD147在一定程度上可以促进肿瘤细胞的增殖, 这也可能是SIX1和CD147的作用机制之一. SIX1的作用可能具有多向性, 其主要作为上游基因, 调控细胞分化、增殖和迁移, 促进肿瘤细胞的进展. 虽然CD147与转移的作用在既往研究中有报告, 但是本研究未发现CD147与淋巴结转移的作用, 也可能CD147的表达特征有组织特异性, 但是其具体机制尚需要更多实验证实. 同时应用其它实验手段检测CD147的表达也是验证其与转移关系的重要手段, 后续研究中可以关注此项实验. 本研究发现观察组中SIX1和CD147的表达与生存时间相关, 提示联合检测SIX1和CD147的表达可能对判断预后有一定价值.

总之, SIX1和CD147在胃腺癌组织中表达明显升高, 对肿瘤的形成和发展有一定的调节作用. SIX1和CD147可能具有正向协同作用. 联合检测SIX1和CD147的表达可能对判断预后有一定价值.

文章亮点
实验背景

胃腺癌中蛋白表达是临床研究的热点, 目前关于SIX1和CD147在胃腺癌中的研究较少, SIX1和CD147表达的关系尚未见报道.

实验动机

针对SIX1和CD147在肿瘤中表达的差别, 本实验探讨二者与胃腺癌的关系.

实验目标

胃腺癌中SIX1和CD147的表达特征、不同临床病理特征中的关系、相关性及判断预后的意义.

实验方法

前瞻性研究和对照研究. 主要实验方法为免疫组化检测方法.

实验结果

研究达到预期目标, 主要发现了胃腺癌中SIX1和CD147高表达, 胃腺癌中SIX1和CD147的表达与肿瘤的最大径和浸润深度密切相关, SIX1的表达与淋巴结转移密切相关, CD147的表达与分化程度密切相关, SIX1和CD147的表达具有正相关性, SIX1和CD147的表达与生存时间相关.

实验结论

SIX1和CD147对肿瘤的形成和发展有一定的调节作用. SIX1和CD147可能具有正向协同作用, SIX1和CD147可能是独立的胃腺癌预后指标, 对临床有重要意义.

前景展望

未来可以应用PCR方法检测胃腺癌中SIX1和CD147mRNA的表达, 在更深层次探讨二者的关系及临床意义.

学科分类: 胃肠病学和肝病学

手稿来源地: 浙江省

同行评议报告分类

A级 (优秀): 0

B级 (非常好): 0

C级 (良好): C, C

D级 (一般): 0

E级 (差): 0

编辑:崔丽君 电编:张砚梁

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