研究快报 Open Access
Copyright ©The Author(s) 2014. Published by Baishideng Publishing Group Inc. All rights reserved.
世界华人消化杂志. 2014-04-28; 22(12): 1682-1687
在线出版日期: 2014-04-28. doi: 10.11569/wcjd.v22.i12.1682
隔药饼灸对功能性胃肠病肝郁脾虚模型大鼠SP与肠道敏感性的影响
刘未艾, 常小荣, 吴清明, 刘密, 张国山, 石佳, 章海凤
刘未艾, 吴清明, 湖南中医药大学第二附属医院针灸-脑病科 湖南省长沙市 410005
常小荣, 刘密, 张国山, 石佳, 章海凤, 湖南中医药大学针灸推拿学院 湖南省长沙市 410007
刘未艾, 副主任医师, 博士研究生, 主要从事针灸治病机制的研究.
基金项目: 国家973计划理论专项课题基金资助项目, No. 2009CB522904; 国家自然科学基金课题基金资助项目, Nos. 81173326, 81303049; 长沙市科技计划重点基金资助项目, No. K1005020-31; 湖南省高校创新平台开放基金资助项目, No. 12K087; 高等学校博士学科点专项科研基金资助项目, No. 20124323110001; 湖南省科技计划基金资助项目, No. 2011SK3095; 湖南省中医药管理局基金资助项目, No. 2013117.
作者贡献分布: 此课题由常小荣、刘未艾及刘密设计; 动物模型制作与指标检测分析由章海凤、石佳及张国山完成; 论文写作由刘未艾、常小荣及吴清明完成.
通讯作者: 常小荣, 教授, 410007, 湖南省长沙市韶山中路113号, 湖南中医药大学针灸推拿学院. xrchang1956@163.com
电话: 0731-88458187
收稿日期: 2014-02-19
修回日期: 2014-03-19
接受日期: 2014-03-28
在线出版日期: 2014-04-28

目的: 观察隔药饼灸对功能性胃肠病(functional gastrointestinal disorders, FGIDs)肝郁脾虚型模型大鼠组织中SP及肠道敏感性的影响, 探讨隔药饼灸治疗FGIDs的可能的作用机制.

方法: 60只SD大鼠按照随机数字表法随机分为空白组、模型组、隔药饼灸组、逍遥散组和多潘立酮组5组, 每组12只, 除空白组外其余4组采用复合病因造模法(慢性束缚应激+过度疲劳+饮食失节+夹尾+摇晃)造模, 连续21 d; 再按被试因素施加方法每天进行隔药饼灸和逍遥散、多潘立酮灌胃14 d. 分组治疗2 wk后, 采用腹壁撤离反射检测肠道敏感性, 用Western blot法检测下丘脑、脊髓、胃窦和结肠组织中SP的含量.

结果: 隔药饼灸组、逍遥散组与多潘立酮组大鼠的肠道注水量明显高于模型组, SP含量明显低于模型组, 差异均有高度统计学意义(P<0.01)(肠道注水量: 0.8308 mL±0.2364 mL, 0.9217 mL±0.1752 mL, 0.8000 mL±0.1924 mL vs 0.5775 mL±0.1103 mL,下丘脑中的SP含量: 0.6780±0.0220, 0.6840±0.0288, 0.6933±0.0278 vs 0.8998±0.0239; 脊髓中的SP含量: 0.4430±0.0393, 0.4763±0.0308, 0.4628±0.0185 vs 0.5563±0.0261; 胃窦中的SP含量: 0.5690±0.0292, 0.5546±0.0261, 0.5583±0.0163 vs 0.6821±0.0224; 结肠中的SP含量: 0.5556±0.0209, 0.5705±0.0282, 0.5823±0.0361 vs 0.7477±0.0210, 均P<0.01), 但三组间比较差异无统计学意义(P>0.05).

结论: 隔药饼灸能和逍遥散、多潘立酮一样通过下调各组织中SP的含量, 从而达到改善肠道敏感性的作用, 这可能是其治疗FGIDs的另一作用机制.

关键词: 隔药饼灸; 功能性胃肠病; 肝郁脾虚模型; SP; 肠道敏感性

核心提示: 纠正异常的脑肠肽表达, 调节脑-肠互动的异常可能是隔药饼灸治疗功能性胃肠病(functional gastrointestinal disorders)的重要途径.


引文著录: 刘未艾, 常小荣, 吴清明, 刘密, 张国山, 石佳, 章海凤. 隔药饼灸对功能性胃肠病肝郁脾虚模型大鼠SP与肠道敏感性的影响. 世界华人消化杂志 2014; 22(12): 1682-1687
Influence of herbal cake-separatedmoxibustion on substance P expression and intestinal sensitivity in rats with functional gastrointestinal disorders due to syndrome of liver stagnation and spleen deficiency
Wei-Ai Liu, Xiao-Rong Chang, Qing-Ming Wu, Mi Liu, Guo-Shan Zhang, Jia Shi, Hai-Feng Zhang
Wei-Ai Liu, Qing-Ming Wu, Department of Acupuncture-Encephalopathy, the Second Affiliated Hospital of Hunan University of Traditional Chinese Medicine (TCM), Changsha 410005, Hunan Province, China
Xiao-Rong Chang, Mi Liu, Guo-Shan Zhang, Jia Shi, Hai-Feng Zhang, College of Acu-moxibustion and Massage, Hunan University of Traditional Chinese Medicine, Changsha 410007, Hunan Province, China
Supported by: the National Key Basic Research Program ("973" Program), No. 2009CB52290; the National Natural Science Foundation of China, Nos. 81173326 and 81303049; the Key Science and Technology Program of Changsha, No. K1005020-31; the Hunan Provincial Colleges and Universities Innovation Platform Open Fund Project, No. 12K087; the Higher School Specialized Research Fund for the Doctoral Program, No. 20124323110001; the Hunan Science and Technology Program, No. 2011SK3095; the State Administration of Traditional Chinese Medicine of Hunan Province, No. 2013117.
Correspondence to: Xiao-Rong Chang, Professor, the College of Acu-moxibustion and Massage, Hunan University of Traditional Chinese Medicine, 113 Shaoshan Middle Road, Changsha 410007, Hunan Province, China. xrchang1956@163.com
Received: February 19, 2014
Revised: March 19, 2014
Accepted: March 28, 2014
Published online: April 28, 2014

AIM: To observe the influence of herbal cake-separated moxibustion on the expression of substance P (SP) and intestinal sensitivity in rats with functional gastrointestinal disorders due to syndrome of liver stagnation and spleen deficiency and to explore the possible mechanism underlying the therapeutic effects of herbal cake-separated-moxibustion against functional gastrointestinal disorders.

METHODS: Sixty SD rats were randomly and equally divided into five groups: blank group, model group, herbal cake-separatedmoxibustion group, Xiaoyaosan group and domperidone group. Except for the blank group, the other four groups underwent modeling by applying chronic restraint stress + excessive fatigue + irregular food + tail clipping + shaking for 21 consecutive days. The herbal cake-separatedmoxibustion group underwent herbal cake-separated moxibustion for 14 d, while the Xiaoyaosan group and domperidone group were given Xiaoyaosan and domperidone by gavage for the same duration, respectively. At the end of the experiment, intestinal sensitivity was determined by intestinal water injection rate when the abdominal withdrawal reflex score was 3 points, and the expression of SP in the tissues of the hypothalamus, spinal cord, gastric antrum and colon were measured by Western blot.

RESULTS: The intestinal water injection rate was significantly higher in the herbal cake-separated moxibustion group, Xiaoyaosan group and domperidone group than in the model group (0.8308 mL ± 0.2364 mL, 0.9217 mL ± 0.1752 mL, 0.8000 mL ± 0.1924 mL vs 0.5775 mL ± 0.1103 mL, P < 0.01 for all), while the expression of SP (relative grey value ) in the tissues of the hypothalamus, spinal cord, gastric antrum and colon was significantly lower in herbal cake-separated moxibustion group, Xiaoyaosan group and domperidone group than in the model group (hypothalamus: 0.6780 ± 0.0220, 0.6840 ± 0.0288, 0.6933 ± 0.0278 vs 0.8998 ± 0.0239; spinal cord: 0.4430 ± 0.0393, 0.4763 ± 0.0308, 0.4628 ± 0.0185 vs 0.5563 ± 0.0261; gastric antrum: 0.5690 ± 0.0292, 0.5546 ± 0.0261, 0.5583 ± 0.0163 vs 0.6821 ± 0.0224; colon: 0.5556 ± 0.0209, 0.5705 ± 0.0282, 0.5823 ± 0.0361 vs 0.7477 ± 0.0210, P < 0.01 for all). There were no significant differences in the above parameters among the three treatment groups (P > 0.05 for all).

CONCLUSION: Herbal cake-separated moxibustion can improve intestinal sensitivity possibly by reducing the expression of SP in rats with functional gastrointestinal disorders due to syndrome of liver stagnation and spleen deficiency.

Key Words: Herbal cake-separatedmoxibustion; Functional gastrointestinal disorders; Liver-qi stagnation and spleen-qi deficiency; SP; Intestinal sensitivity


0 引言

大量研究证实, 功能性胃肠病(functional gastrointestinal disorders, FGIDs)是一种生物-心理-社会病症, 其病因复杂繁多, 发病机制多与胃肠运动障碍、内脏敏感性增高、黏膜免疫和炎症反应、脑肠轴异常及精神-心理、社会因素等有关. 内脏高敏感是指引起内脏疼痛或不适的刺激阈值降低、内脏对生理性刺激产生不适感或对伤害性刺激反应强烈的现象. 内脏高敏感性一直被认为是功能性胃肠道疾病发生的主要机制之一[1]. SP作为重要的脑肠肽之一, 与内脏感觉过敏的产生和传递有密切联系. 历代资料表明, FGIDs是针灸临床的优势病种, 隔药饼灸有助于针灸临床更好地发挥中医辨证论治的特色和优势, 具有能提高艾灸与中药外敷治疗的疗效、适应症广、节约药材、操作方便、安全性好、无不良反应作用、实用性强的优势, 被广泛而有效地运用于FGIDs的防治之中. 目前认为胃肠道动力障碍和感觉异常是FGIDs的主要病理生理学基础[2]. 本课题组前期探讨了隔药饼灸改善FGIDs胃肠动力障碍的可能作用机制, 证实隔药饼灸通过升高血清中胃动素(motilin, MTL)和胃泌素(gastrin, GAS), 降低VIP的水平, 增加组织中Ghrelin蛋白的表达, 从而达到促进胃排空和小肠推进作用[3-5]. 本实验旨在前期研究的基础上, 进一步观察隔药饼灸对FGIDs肝郁脾虚模型大鼠SP的含量与肠道敏感性的影响, 从而探讨隔药饼灸治疗FGIDs肝郁脾虚证另一可能的作用机制.

1 材料和方法
1.1 材料

健康Sprague-Dawley大鼠, 雌雄各半, 体质量220-250 g, 月龄3-4 mo. 由湖南中医药大学实验动物中心提供(动物合格证号: SCXK<湘>2009-0004; 动物级别: SPF; 饲料来源: 合格证号: SCXK<湘>2009-0009; 动物饲养环境实验室合格证号: SCXK<湘>2009-0001). 大鼠自由摄食及饮水, 饲养温度20%-25%, 湿度50%-70%. TGL-18R台式冷冻离心机(深圳黑马); TS-92摇床(其林贝尔); 164-5050电泳仪(Bio-rad); DYCZ-24EN电泳槽(北京六一); DYCZ-40A转膜仪(北京六一); Santa Cruz公司生产的goat SP抗体(批号: SC-23558); SP试剂盒(维尔生物科技有限公司); 多潘立酮(片剂, 10 mg/片)(西安杨森制药有限公司, 批号: 120117119); 中药饮片(购自湖南中医药大学第二附属医院中药房); 逍遥散水煎剂[6]. 自制的简易艾灸底座.

1.2 方法

1.2.1 分组: SD健康大鼠70只(SPF级), 编号. 按随机数字表将大鼠随机分为空白组和模型储备组, 其中空白组12只(雌雄各半), 造模结束后, 取造模成功的48只大鼠再按随机数字表法随机分为4组, 每组12只(雌雄各半), 实验最终共分为A空白组、B模型组、C隔药饼灸组、D逍遥散组和E多潘立酮组5组, 每组12只.

1.2.2 造模及给药: 参照岳利峰等[7]采用复合病因法造模, 用慢性束缚应激+过度疲劳+饮食失节的方法, 束缚时加夹尾30 min、摇晃5 min. 实验前全部动物进行预游泳, 剔除游泳时间少于10 min、大于20 min的大鼠, 预游泳合格造模大鼠每天上午8:00置于束缚盒中束缚限制3 h, 同时夹尾30 min、摇晃5 min,下午2:00置于盛有(22 ℃±1 ℃)的温水大塑料桶中游泳10 min. 隔日足量给食, 隔日禁食, 连续3 wk. 空白组正常饲养, 不做任何处理; 模型组造模后行捆绑束缚30 min, 并灌服生理盐水, 灌胃容积均为1 mL/100 g体质量(下同); 隔药饼灸组造模后行隔药饼灸30 min, 并灌服生理盐水; 逍遥散组造模后行捆绑束缚30 min, 灌服逍遥散5.85 g/(kg·d); 多潘立酮组造模后行捆绑束缚30 min, 灌服多潘立酮2.7 mg/(kg·d), 共14 d.

1.2.3 施灸: (1)选穴: Ⅰ组: 双侧肝俞、脾俞、足三里; Ⅱ组: 双侧章门、期门及中脘. 取穴定位: 参照新世纪全国高等中医院校规划教材《实验针灸学》[8]及华兴邦的大鼠穴位图谱[9]对所选穴位进行定位. 艾炷: 选用苏州东方艾绒厂生产的"神灸300灸"艾炷(型号: 东方一型, 批号20100812). 隔药饼的药物组成及药饼制作: 取柴胡、茯苓、白术、白芍、陈皮、防风等药按等比例剂量粉碎为末, 过200目筛备用, 使用时加冰片、氮酮促透剂用醋调成糊状, 通过自制的艾灸底座模具捏压成厚约2 mm、直径为1 cm的药饼; (2)隔药饼灸法: 每日8:00AM将大鼠捆绑束缚于鼠板上, 取穴定位剪毛后用细绳将放置好药饼的艾灸底座固定在穴位上, 然后将直径为0.5 cm±0.2 cm的艾炷穿过自制模具的铁纤放在药饼上, 点燃施灸, 待艾炷燃完且余热散尽后, 再换另一壮, 每穴连续灸5壮(约30 min), 1次/d, Ⅰ组、Ⅱ组穴位隔日交替施灸, 连续治疗2 wk.

1.2.4 取材及检测: (1)标本的采集与处理: 实验结束后, 禁食24 h, 以20%乌拉坦4 mL/kg腹腔内注射麻醉, 予腹主动脉采血后, 每组随机取6只大鼠的下丘脑、脊髓、胃窦和结肠的组织各100 mg, -80 ℃条件下保存, 用蛋白印迹分析法检测各组织中SP蛋白的含量水平; (2)用Westernblot蛋白印迹分析法检测下丘脑、脊髓、胃窦和结肠组织中SP蛋白含量(检测单位: 长沙维尔生物有限公司). 取保存于-80 ℃的组织块(约100 mg), 洗净放入玻璃匀浆器内, 加入500 μL的预冷RIPA裂解液使其充分在冰上匀浆, 将其转移至1.5 mL的离心管. 于4 ℃以12000r/min离心5min, 吸取上清即为组织蛋白. 将蛋白加入5×Loadingbuffer沸水浴5min后进行SDS-PAGE稳压电泳. 浓缩胶电压约为60 V, 分离胶120 V, 待溴酚蓝电泳至胶底部时终止电泳. 利用稳流300 mA, 湿转1 h将胶上的蛋白转移至PVDF膜. 用PBS溶液配制5%的脱脂奶粉为封闭液, 将膜浸入后, 室温放置1 h; 用封闭液将一抗按照一定比例稀释, 将膜与一抗孵育, 4 ℃过夜; 孵育结束, TBST洗3次, 每次15 min; 用封闭液以1:3000稀释HRP标记的二抗, 常温下孵育50min; 孵育结束, TBST洗3次, 每次15 min. 使用ECL化学发光液与膜孵育3 min, 在暗盒内与X胶片曝光数秒至数分钟; 显影冲洗保存. 采用Image-ProPlus6.0图像分析软件, 记录每条蛋白电泳带的灰度值, 进行相对定量分析; (3)肠道敏感性的测定[10]: 实验结束后, 各组大鼠禁食24 h, 采用腹壁撤离反射测定肠道敏感性, 先用络合碘局部消毒肛门, 然后将用石蜡油润滑后的8 F导尿管(导管直径2 mm, 球囊最大容量3 mL, 注水后最大直径2 cm)经肛门插入, 球囊末端放在距离肛门3-5 cm左右, 用棉线把导尿管和大鼠尾巴根部固定. 将其放在平台上, 待大鼠适应后, 逐渐注水使球囊扩张, 观察大鼠腹部抬起且背部拱起时(AWR评分3分)所需的注水量, 每次直肠扩张持续30 s, 重复进行3次, 每次间隔5 min, 取平均值(评分标准: 0分: 大鼠对结肠扩张无行为学反应; 1分: 结肠扩张时身体静止不动, 头部运动减少; 2分: 结肠扩张时腹肌收缩, 但腹部未抬离桌面; 3分: 结肠扩张时腹肌收缩并抬离桌面; 4分: 结肠扩张时骨盆抬起, 身体呈弓形).

统计学处理 用SPSS16.0软件进行处理. 全部计量资料用mean±SD表示, 所有数据都进行正态性和方差齐性检验. 满足正态性时, 采用单因素方差分析, 组间比较若方差齐时采用方差分析-LSD检验, 方差不齐时用方差分析Tamhane's T2检验; 不满足正态性时选择秩和检验. P<0.05为差异有统计学意义.

2 结果
2.1 各组大鼠下丘脑、脊髓、胃窦和结肠组织中SP含量的影响

如表1和图1所示: 与A组相比, B组大鼠下丘脑、脊髓、胃窦和结肠部位的SP含量是显著升高的, 差异有高度统计学意义(P<0.01), 说明造模成功大鼠各组织中的SP含量是上升的; 与B组相比, C、D、E组大鼠各组织中的SP含量是显著下降的, 差异均有高度统计学意义(P<0.01), 但三组间比较差异无统计学意义(P>0.05), 说明隔药饼灸、逍遥散和多潘立酮灌服一样能使大鼠各组织中的SP含量显著下降, 其作用基本相当.

表1 各组大鼠不同组织中的SP含量比较 (mean±SD, n = 6).
分组下丘脑脊髓胃窦结肠
空白组 0.6113±0.0795 0.4208±0.0206 0.5090±0.0115 0.5162±0.0142
模型组 0.8998±0.0239b0.5563±0.0261b0.6821±0.0224b0.7477±0.0210b
隔药饼灸组 0.6780±0.0220d0.4430±0.0393d0.5690±0.0292d0.5556±0.0209d
逍遥散组 0.6840±0.0288d0.4763±0.0308d0.5546±0.0261d0.5705±0.0282d
多潘立酮组 0.6933±0.0278d0.4628±0.0185d0.5583±0.0163d0.5823±0.0361d
图1
图1 SP在各组大鼠不同组织中的表达. 1: 空白组; 2: 模型组; 3: 隔药饼灸组; 4: 逍遥散组; 5: 多潘立酮组.
2.2 隔药饼灸对各组大鼠肠道敏感性的影响

如表2所示: 与A组相比, B组大鼠肠道注水量明显下降, 差异均有高度统计学意义(P<0.01), 说明造模处理后会增加大鼠肠道的敏感性; 与B组相比, C、D、E组大鼠肠道注水量明显升高, 差异均有高度统计学意义(P<0.01), 但三组间比较差异无统计学意义(P>0.05), 说明隔药饼灸、逍遥散和多潘立酮灌服均能改善大鼠的肠道高敏感性, 使敏感性降低, 其效应相当.

表2 各组大鼠治疗后肠道注水量情况比较 (mean±SD, n = 12, mL).
分组肠道注水量
空白组 0.9533±0.1232
模型组 0.5775±0.1103b
隔药饼灸组 0.8308±0.2364d
逍遥散组 0.9217±0.1752d
多潘立酮组 0.8000±0.1924d
3 讨论

FGIDs是生理、精神心理和社会因素相互作用而产生的复杂的消化系统功能性综合病症. 早在九十年代的研究就显示, 心理社会因素与FGIDs的发生、发展及预后相关[11], 有国外学者统计了常见的FGIDs和精神症状的关系, 发现54%-100%患者有不同程度的心理障碍, 其中焦虑、抑郁多见[12,13], 精神心理因素参与被认为在此类疾病发生和发展中起重要作用[14]. 祖国医学中没有FGIDs的病名, 而将其归属于"胃脘痛"、"嘈杂"、"痞满"、"反酸"、"呕吐"、"泄泻"、"便秘"、"梅核气"等范畴, 其发病机制与肝脾密切相关, 肝郁脾虚为胃肠功能紊乱的病理本质. 正如清代名医叶天士在《临证指南医案》中所言: "肝为起病之源, 胃为传病之所", "肝病必犯土, 是侮其所胜也, 克脾则腹胀, 便溏或不爽". 《医方考》言: "泻责之脾, 痛责之肝, 肝责之实, 脾责之虚, 脾虚肝实, 故令痛泻." 不论是忧思过度气结于中, 还是郁怒伤肝使肝失疏泄; 不论是肝失疏泄在先, 脾气虚弱在后, 或是脾虚在先, 木乘在后, 肝失疏泄和脾气虚弱都是其主要病机, 不可分割. 肝郁脾虚, 肝脾失和是FGIDs的症结所在, 本质所在. 肝郁脾虚就其实质而言为不良情绪刺激影响了肝的疏泄条畅及脾升胃降的动态平衡, 导致功能性胃肠病的产生. 这也就是现代医学的生理-心理-社会疾病模式, 内外环境的应激反应, 情志变化可以通过肝郁(神经递质、激素及功能变化)导致脾虚(胃肠动力、吸收、激素分泌异常及免疫失调等), 实质上就是脑肠轴之间的联系[15]. 脑肠轴之间的联系是反映"肝郁脾虚"的"功能网络"多条线中的一条主线. 虽然FGIDs脑肠轴异常与肝郁脾虚病理机制分属于两个不同医学体系, 但由于彼此间认识高度一致, 学术界一致认为中医学调肝运脾治疗FGIDs的作用机制与调节其脑肠轴功能有关[16]. 脑肠轴异常-肝郁脾虚是FGIDs的根源, 脑肠轴概念的提出为进一步认识精神心理因素对胃肠道病理生理的影响提供了理论基础, 为探索胃肠病发病机制提供了新的研究层面.

随着近年神经胃肠病学的研究进展, 使我们摒弃了以往认为FGIDs的症状主要是由胃肠道动力异常所致的观点, 意识到FGIDs的症状与许多因素如动力、内脏敏感性的改变、黏膜免疫、炎症功能的改变以及中枢神经系统和肠神经系统调节功能的变化相关. 目前研究证实动力和感觉的异常是FGIDs病理生理学的主要特征, 这种异常由胃肠神经、自主神经、中枢神经多个层面经多种神经介子介导产生, 并可有神经-内分泌-免疫网络参与, 故提出脑肠轴概念, 初步揭示了脑肠之间的相互关系. 脑-肠轴通过借助神经内分泌免疫网络的双向环路来参与胃肠功能的调节, 一方面患者对内脏刺激的感知可通过脑对应激、心理因素等的加工来影响; 另一方面表现在内脏刺激的信息、可通过上行传入神经传递至中枢进行加工整理, 再通过传出神经系统来影响胃肠功能. 功能性胃肠疾病是动力和感觉异常的脑肠轴调节障碍所致, 这一观点的提出具有划时代的意义, 为人们研究FGIDs的发病机制提供了重要的理论基础.

随着对FGIDs和脑肠轴的深入研究, 我们发现中枢神经系统、肠神经系统及相关脑肠肽所组成的脑肠轴机制在FGIDs的演变过程中起着非常重要的作用, 尤其是各种脑肠肽. 不同的脑肠肽的作用机制不尽相同, 脑肠肽对肠道运动的兴奋或抑制作用, 由于种属的差别以及作用于肠道的不同部位而有不同的反应. 但多种脑肠肽在分子水平上发生的改变所引起的宏观结果作用在一起, 就在FGIDs的发生上起了很大作用. SP是由11个氨基酸组成的多肽类物质, 是第一个被确认的、双重分布的脑肠肽, 他可以以激素和神经递质的形式参与胃肠道运动的调控, 主要分布于CNS、脊髓背根和ENS, 小部分分布于肠嗜铬细胞, 其中以胃肠道和CNS浓度最高; SP主要来源于含SP的节后神经元, 这种神经纤维通过特异的神经通路对胃平滑肌产生很强的刺激作用, 广泛分布于胃肠道及神经系统, 能加强肠道平滑肌收缩、肠蠕动和胃排空, 并且能刺激胆囊收缩, 参与机体多种生理功能的调控, 对胃肠功能的调节起着重要的作用[17]. 作为兴奋性运动神经元递质, SP能抑制胃肠道黏膜分泌, 刺激肠道运动, 同时又存在于感觉神经元内, 可作为内脏感觉神经递质向中枢神经系统传递免疫细胞发出的信息(如炎症引起的疼痛), 成为神经-免疫系统相互关系的重要环节[18]. 有学者研究发现[19,20]FD大鼠存在明显的胃肠感觉过敏, 模型大鼠血浆中SP的含量增高[21], 通过降低模型大鼠血浆SP含量, 可减弱背角神经元兴奋性, 提高内脏痛阈, 消除肠道过敏而发生作用[22], 与本实验所得结果一致.

在本实验中, 我们采用Western blot方法检测隔药饼灸对FGIDs肝郁脾虚模型大鼠下丘脑、脊髓和胃肠组织中SP含量的影响, 从脑肠轴途径探讨隔药饼灸治疗FGIDs的作用机制. 结果显示, 模型组大鼠SP含量在各组织部位中表达升高, 与文献报道一致[21]. 隔药饼灸能和逍遥散、多潘立酮一样通过降低下丘脑、脊髓、胃窦和结肠部位SP的含量从而达到改善肠道敏感性的作用, 使胃肠感觉异常功能得到改善, 消化系运动恢复正常, 从而起到防治FGIDs的效果. 纠正异常的脑肠肽表达, 调节脑-肠互动的异常可能是隔药饼灸治疗FGIDs的重要途径, 揭示了隔药饼灸治疗FGIDs的相关作用机制, 为临床上应用隔药饼灸治疗功能性胃肠病提供了一定的理论和实验依据. 深入研究脑-肠关系, 有利于更好的理解一些胃肠疾病的发病机制, 揭示出药物作用的新靶点, 为研究一些新的治疗胃肠疾病的方法以及探索老药新用提供了理论依据, 在基础和临床研究中都有很强的指导意义.

评论
背景资料

功能性胃肠病(functional gastrointestinal disorders, FGIDs)是一种生物-心理-社会病症, 其病因复杂繁多, 发病机制多与胃肠运动障碍、内脏敏感性增高、黏膜免疫和炎症反应、脑肠轴异常及精神-心理、社会因素等有关. 内脏高敏感性一直被认为是FGIDs发生的主要机制之一. 历代资料表明, FGIDs是针灸临床的优势病种, 隔药饼灸被广泛而有效地运用于FGIDs的防治之中.

同行评议者

郑培永, 副教授, 上海中医药大学脾胃病研究所, 上海中医药大学附属龙华医院消化内科

研发前沿

胃肠道动力障碍和感觉异常是FGIDs的主要病理生理学基础. 目前对灸法治疗FGIDs的临床研究较多, 通过动物实验来研究其机制的报道较少, 因此使得灸法疗效缺少客观公认的评价. 本实验旨在前期研究的基础上, 进一步观察隔药饼灸对FGIDs肝郁脾虚模型大鼠SP的含量与肠道敏感性的影响, 从而探讨隔药饼灸治疗FGIDs肝郁脾虚证另一可能的作用机制, 为临床合理应用灸法治疗本病提供重要的参考依据.

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近年来有学者研究发现FD大鼠存在明显的胃肠感觉过敏, 模型大鼠血浆及各组织中SP的含量增高, 通过降低模型大鼠SP含量, 可减弱背角神经元兴奋性, 提高内脏痛阈, 消除肠道过敏而发生作用, 与本实验所得结果一致.

创新盘点

脑肠轴异常-肝郁脾虚是FGIDs的根源, 脑肠轴概念的提出为进一步认识精神心理因素对胃肠道病理生理的影响提供了理论基础, 为探索胃肠病发病机制提供了新的研究层面. 本实验以FGIDs肝郁脾虚模型大鼠为受试对象, 从脑肠轴途径探讨隔药饼灸治疗FGIDs肝郁脾虚证可能的作用机制.

应用要点

通过实验观察分析, 隔药饼灸能和逍遥散、多潘立酮一样通过降低下丘脑、脊髓、胃窦和结肠部位的SP的含量从而达到改善肠道敏感性的作用, 使胃肠感觉异常功能得到改善, 消化系运动恢复正常, 从而起到防治FGIDs的效果, 为临床上应用隔药饼灸治疗功能性胃肠病提供了一定的理论和实验依据.

同行评价

本文设计合理, 方法详细, 结果可信, 具有一定指导意义.

编辑:田滢 电编:鲁亚静

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