阿德福韦酯联合苦参素胶囊对慢性乙型肝炎患者HBV复制及T淋巴细胞亚群的影响

摘要

目的: 探讨阿德福韦酯联合苦参素抗病毒治疗对HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者病毒复制指标及T淋巴细胞亚群的影响.

方法: 将106例慢性乙型肝炎患者随机分为治疗组和对照组. 治疗组60例, 给予阿德福韦酯联合苦参素胶囊治疗; 对照组46例, 单用阿德福韦酯治疗; 2组疗程均为48 wk.

结果: 疗程结束后, 组HBV DNA、HBeAg阴转率以及HBeAg/抗HBe转换率显著高于对照组, 差异有统计学意义(71.67% vs 32.61%; 53.33% vs 15.22%; 45.00% vs 13.04%, 均P<0.05); 治疗组CD4⁺以及CD4⁺/CD8⁺也较对照组明显升高, 差异有统计学意义(38.61%±5.28% vs 30.16%±5.11%; 1.52%±0.32% vs 0.73%±0.30%, 均P<0.05).

结论: 阿德福韦酯与苦参素联合应用可显著提高疗效, 并能显著改善慢性乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群状态.

关键词: 阿德福韦酯; 苦参素; 慢性乙型肝炎; T淋巴细胞亚群

Effects of adefovir dipivoxil in combination with Marine Capsules on HBV replication and T lymphocyte subsets in patients with chronic hepatitis B

Yuan-Hang Tu, Yong Ma, Shan-Shan Li

Yuan-Hang Tu, Department of Laboratory Medicine, Bengbu Medical College, Bengbu 233030, Anhui Province, China

Yong Ma, Shan-Shan Li, Center for Liver Diseases, the 123^rd Hospital of Chinese PLA, Bengbu 233015, Anhui Province, China

Correspondence to: Professor Yong Ma, Center for Liver Diseases, the 123^rd Hospital of Chinese PLA, Bengbu 233015, Anhui Province, China. my4973766@163.com

Received: August 26, 2009
Revised: November 2, 2009
Accepted: November 9, 2009
Published online: December 8, 2009

Abstract

AIM: To observe the effects of adefovir dipivoxil in combination with Marine Capsules on hepatitis B virus (HNV) replication and T lymphocyte subsets in patients with hepatitis B surface antigen (HbeAg)-positive chronic hepatitis B (CHB).

METHODS: One hundred and six patients with CHB were randomly divided into control group (n = 46) and treatment group (n = 60). Patients in the control group received adefovir dipivoxil alone, while those in the treatment group received both adefovir dipivoxil and Marine Capsules. The period of treatment was 48 weeks.

RESULTS: At the end of treatment, the negative conversion rates of HBV DNA and HBeAg and HBeAg/anti-HBe seroconversion rate were significantly higher in the treatment group than in the control group (71.67% vs 32.61%, 53.33% vs 15.22%, and 45.00% vs 13.04%, respectively; all P < 0. 05). The percentages of CD4⁺ and CD4⁺/CD8⁺ T lymphocytes were significantly higher in the treatment group than in the control group (38.61% ± 5.28% vs 30.16% ± 5.11%, and 1.52% ± 0.32% vs 0.73% ± 0.30%, respectively; both P < 0.05).

CONCLUSION: Adefovir dipivoxil in combination with Marine Capsules can significantly improve efficacy and increase the percentages of CD4⁺ and CD4⁺/CD8⁺ T lymphocytes in patients with CHB.

Key Words: Adefovir dipivoxil; Marine; Chronic hepatitis B; T lymphocyte subset

0 引言

乙型肝炎的发病机制主要是机体免疫系统清除HBV而引发的免疫病理改变. 对慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B, CHB)的自然史研究表明, 慢性HBV感染者病情进展和预后与HBV复制密切相关. T淋巴细胞亚群的平衡在机体清除HBV过程中起决定作用[1-2]. 阿德福韦酯可明显抑制HBV DNA复制, 耐药率低, 已成为一线抗HBV药物之一, 但其抑制作用在不同个体中差异较大, 尤其在高病毒载量(HBV DNA≥1×10⁷ copies/mL)患者中, HBV DNA阴转率及HBeAg/抗HBe转换率均较低. 本研究中采用阿德福韦酯联合苦参素治疗HBV DNA阳性CHB患者60例, 观察治疗前后HBV DNA及外周血T细胞亚群的变化, 并与对照组比较, 探讨通过联合用药提高阿德福韦酯抗病毒疗效的可行性及其机制.

1 材料和方法

1.1 材料

中国人民解放军第123医院肝病中心门诊及住院的CHB患者106例, 其中男78例, 女28例, 年龄18-52(平均33.5)岁. 所有病例均符合2000年西安修订《病毒性肝炎防治方案》的诊断分型标准[3], 同时HBV DNA≥105 copies/mL (荧光定量PCR), 且排除甲、丙、丁、戊和庚型肝炎病毒的感染, 入选前未使用过干扰素、胸腺肽等免疫调节剂. 入选病例随机分为2组. 2组患者在年龄、性别、病程及实验室检查方面具有可比性.

1.2 方法

1.2.1 治疗: 对照组给予阿德福韦酯胶囊(江苏正大天晴药业股份有限公司)10 mg, 口服, 每天1次, 疗程48 wk. 治疗组给予阿德福韦酯胶囊和苦参素胶囊(江苏正大天晴药业股份有限公司), 其中阿德福韦酯胶囊10 mg, 口服, 每天1次, 疗程48 wk, 苦参素胶囊0.2 g, 口服, 每天3次, 疗程48 wk.

1.2.2 HBV DNA的检测: 采用荧光定量PCR法, 由专人按照仪器操作规程和试剂盒说明书操作.

1.2.3 HBeAg及抗HBe的检测: 采用荧光放射免疫法, 由专人按照仪器操作规程和试剂盒说明书操作.

1.2.4 T细胞亚群的检测: 采用FACScalibur流式细胞仪(美国BD公司生产)检测外周血T细胞亚群. 采取患者外周血2 mL, 肝素钠抗凝; 分别加入三色标记的单克隆抗体(CD3/FITC, CD4/APC, CD8/PE)10 μL及60 μL全血; 充分混匀, 4 ℃下避光30 min后加含2.5% FBS的PBS 2.5 mL离心洗去多余抗体; 破红, 再次离心洗涤, 弃上清, 细胞以10 g/L多聚甲醛重悬, 流式细胞仪检测.

统计学处理 所有试验数据采用应用mean±SD表示, SPSS统计软件进行统计学处理, 率的比较采用χ²检验, 均数比较采用t检验.

2 结果

2.1 治疗后HBV DNA及HBeAg/抗HBe的变化

治疗组的HBV DNA、HBeAg转阴率以及HBeAg/抗HBe血清转换率明显高于对照组(表1).

表1 2组HBV DNA、HBeAg转阴及HBeAg/抗HBe转换的比较 n(%).

分组	n	HBV DNA转阴	HBeAg转阴	HBeAg/抗HBe转换
治疗组	60	43(71.67)	32(53.33)	27(45.00)
对照组	46	15(32.61)	7(15.22)	6(13.04)
P值	<0.05	<0.05	<0.05

2.2 治疗前后外周血T淋巴细胞亚群的变化

治疗组在疗程结束后CD4⁺ T淋巴细胞百分率以及CD4⁺/CD8⁺比例明显回升, CD8⁺T淋巴细胞百分率水平下降, 同治疗前比较, 差异有显著性; 而对照组CD4⁺ T淋巴细胞百分率以及CD4⁺/CD8⁺比例也有所升高, 但同治疗前比较, 差异无显著性(表2).

表2 治疗前后外周血T淋巴细胞亚群的变化 (mean±SD).

分组	CD4+(%)		CD8+(%)		CD4+/CD8+
	治疗前	治疗后	治疗前	治疗后	治疗前	治疗后
治疗组	27.62±4.36	38.61±5.28a	35.27±5.02	27.35±5.11a	0.86±0.31	1.52±0.32a
对照组	27.86±4.48	30.16±5.11	32.16±5.56	30.26±4.78	0.71±0.27	0.73±0.30

^aP<0.05 vs 治疗前.

3 讨论

慢性HBV感染者病情进展和预后与HBV复制密切相关. 高病毒血症、HBeAg持续阳性、ALT水平高或反复波动是发生肝硬化、肝癌的主要高危因素. 抗病毒治疗是CHB治疗的关键所在. 但CHB患者存在明显的细胞免疫功能缺陷, 国内外多数研究均已证实, CHB患者外周血CD4⁺ T淋巴细胞减少, CD8⁺ T淋巴细胞增加, CD4⁺/CD8⁺比值降低, 且不同临床类型的肝炎患者T淋巴细胞亚群绝对数明显不同[4-8]. 如何最大程度改善患者免疫状态, 恢复T淋巴细胞亚群的平衡, 彻底清除HBV, 是目前大家研究的热点.

阿德福韦酯是一种单磷酸腺苷的无环核苷类似物, 在体内被磷酸化为具有活性的二磷酸阿德福韦, 并通过竞争脱氧腺苷三磷酸底物, 终止病毒DNA链延长而发挥抑制HBV DNA作用, 经大规模临床验证, 可使患者获得病毒学、肝脏生化功能和组织学的改善. 但其抗病毒作用在不同个体中差异较大, 尤其在病毒载量较高时, HBV DNA阴转率及HBeAg/抗HBe转换率均较低, 董莉 et al[9]比较了不同病毒载量患者的外周血T淋巴细胞亚群, 结果显示高病毒载量患者CD8⁺ T淋巴细胞增加, CD4⁺/CD8⁺比值降低, 和低病毒载量组比较, 差异有显著性, 提示高病毒载量患者存在着更严重的免疫失衡. 苦参素是由中药苦豆子中提取的有效成分, 内含氧化苦参碱及少量氧化槐果碱, 具有改善慢乙型肝炎患者肝功能和抗乙型肝炎病毒作用. 国内学者[10]研究发现苦参素可以使CHB患者外周血CD4⁺ T淋巴细胞增加, CD8⁺ T淋巴细胞减少, 提高CD4⁺/CD8⁺比值, 并能调节Th1和Th2细胞因子比例平衡, 从而提高细胞免疫反应.

本研究采用阿德福韦酯联合苦参素胶囊治疗CHB患者60例, 结果提示: 阿德福韦酯与苦参素有一定的协同作用, 显著提高了HBV DNA、HBeAg转阴率及HBeAg/抗HBe的血清转换率, 并能调节外周血T淋巴细胞亚群的平衡, 提高了CHB抗病毒疗效. 但本研究病例及治疗时间有限, 能否达到最大限度的长期抑制或清除病毒, 尚待进一步研究.

评论

背景资料

乙型肝炎的治疗, 抗病毒是关键. 目前公认有效的抗病毒药物有干扰素类和核苷类似物类, 但干扰素副作用大, 价格昂贵, 拉米夫定变异率较高, 恩替卡韦、替比夫定价格较贵, 均限制了这些药物的广泛应用. 阿德福韦酯因其安全、有效、廉价的特点, 目前在临床已经逐渐替代拉米夫定成为一线抗病毒药物. 但临床发现, 阿德福韦酯亦有其不足之处, 其抗病毒作用在不同个体中差异较大, 尤其在病毒载量较高时, 其HBV DNA阴转率及HBeAg/抗HBe转换率均较低, 探讨通过联合用药提高阿德福韦酯抗病毒疗效对广大乙型肝炎患者具有重要意义.

同行评议者

潘秀珍, 教授, 福建省立医院消化内科

研发前沿

慢性乙型肝炎患者普遍存在着细胞免疫功能的紊乱, 通过T淋巴细胞亚群的检测, 评价患者细胞免疫状况, 提高现有药物抗病毒的效果, 是目前研究的热点, 也是目前临床上亟待研究的问题.

同行评价

本研究证实, 阿德福韦酯联合苦参素胶囊能够提高疗效, 并能显著改善外周血T淋巴细胞亚群状态, 对CHB的临床治疗及其机制研究均有一定的意义.

备注

编辑: 李军亮 电编: 何基才

参考文献

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