儿童过敏性紫癜与不同类型幽门螺杆菌感染的相关性

摘要

目的: 探讨儿童过敏性紫癜(Henoch-Schonlein purpura, HSP)与不同类型幽门螺杆菌(H. pylori)感染的关系.

方法: 用免疫印迹法对80例HSP患儿及40例正常儿童的血清进行幽门螺杆菌分型检测. 将80例HSP患儿分为有消化系症状HSP组(51例)和无消化系症状HSP组(29例).

结果: 有消化系症状HSP组患儿Ⅰ型H. pylori感染占25.5%, Ⅱ型H. pylori感染占52.9%; 而无消化系症状HSP组和正常对照组均无Ⅰ型H. pylori感染, Ⅱ型H. pylori感染分别为34.5%、12.5%; 三组的H. pylori抗体分型检出率有统计学意义(P<0.001). 有消化系症状HSP组患儿的H. pylori抗体阳性检出率明显高于无消化系症状HSP组和正常对照组(78.4% vs 34.5%, 12.5%, P<0.001).

结论: HSP的发病可能与H. pylori感染有关, 其消化系症状与Ⅰ型H. pylori感染密切相关. 免疫印迹技术可应用于对H. pylori感染分型诊断.

关键词: 儿童; 过敏性紫癜; 幽门螺杆菌; 免疫印迹法

Henoch-Schonlein purpura and different patterns of Helicobacter pylori infection in children

Xiao-Lin Gao, Yong-Kun Huang, Mei Liu, Qi Li, Jie Zeng, Hai-Lin Li

Xiao-Lin Gao, Yong-Kun Huang, Mei Liu, Qi Li, Jie Zeng, Hai-Lin Li, Department of Pediatrics, the First Hospital Affiliated to Kunming Medical College, Kunming 650032, Yunnan Province, China

Supported by: the Reserver's Training Projects of Yunnan Mid-Youth Scientific Technical Leader, No. 2006PY1-18.

Correspondence to: Dr. Yong-Kun Huang, Department of Pediatrics, the First Hospital Affiliated to Kunming Medical College, 295 Xichang Road, Kunming 650032, Yunnan Province, China. hykkmyncnwd@163.com

Received: November 19, 2008
Revised: December 2, 2008
Accepted: December 8, 2008
Published online: January 18, 2009

Abstract

AIM: To investigate the relationship between Henoch-Schonlein purpura (HSP) and different types of H. pylori in children.

METHODS: Western immunoblotting method was used to detect the serial antibodies of H. pylori in 80 children with HSP and 40 normal healthy children. According to clinical manifestation, 80 children were divided into HSP group with gastrointestinal symptoms (51 cases) and HSP group without gastrointestinal symptoms (29 cases).

RESULTS: In HSP group with gastrointestinal symptoms, Ⅰ-H. pylori infection accounted for 25.5%, and Ⅱ-H. pylori infection accounted for 52.9%; however, there were no Ⅰ type H. pylori infection in HSP group without gastrointestinal symptoms and normal control group. But 34.5% in HSP group without gastrointestinal symptoms and 12.5% in normal control group were infected with Ⅱ type H. pylori; the distribution differences of H. pylori antibody typing had statistical significance (P < 0.001). H. pylori antibody positive rate of HSP group with gastrointestinal symptoms was significantly higher than those of HSP group without gastrointestinal symptoms and of normal control group (78.4% vs 34.5%, 12.5%, P < 0.001).

CONCLUSION: The HSP incidence may be associated with H. pylori infection, and the digestive tract symptoms is closely correlated with Ⅰ type infection. Western Immunoblotting technique can be applied to the diagnosis of of H. pylori typing.

Key Words: Children; Henoch-Schonlein purpura; Helicobacter pylori; Western immunoblotting

0 引言

过敏性紫癜(Henoch-Schonlein purpura, HSP)是儿童时期最常见的血管炎之一. 病因及发病机制至今未完全明确. 近年来, 发现幽门螺杆菌(H. pylori)感染与儿童HSP发病有关[1-2], 但对H. pylori感染的HSP患儿血清学分型诊断尚少有报道. 本研究应用免疫印迹法检测HSP患儿血清中H. pylori的细胞毒素(CagA)、空泡毒素(VacA)、尿素酶A(Urea)、尿素酶B(Ureb)等

H. pylori抗体类型, 观察过敏性紫癜患儿中Ⅰ型(毒力型)H. pylori和Ⅱ型(非毒力型)H. pylori感染的分布情况, 并与正常儿童进行对比, 探讨不同类型H. pylori感染与过敏性紫癜发病的关系.

1 材料和方法

1.1 材料

2007-09/2008-08收治的HSP患儿80例, 均符合过敏性紫癜的诊断标准[3]. 其中有消化系症状者51例, 男35例, 女l6例; 年龄3-14(平均9.09±2.49)岁; 住院3-62(平均14.01±10.56)d. 无消化系症状者29例, 男11例, 女l8例; 年龄5-14(平均8.81±2.45)岁; 住院4-24(平均8.76±3.56) d. 同时取同期在我院体检的同龄正常儿童40例作为正常对照组.

本组HSP患儿中, 初发者48例, 复发32例, 其中反复发作超过2次的7例. 51例有轻重不等的消化系症状. 均有不同程度腹痛, 常为上腹或脐周痛, 多为阵发性隐痛或绞痛. 出现恶心、呕吐12例, 腹泻2例. 消化系出血26例, 表现为黑便20例、便血6例, 伴呕血2例. 以腹痛为首发症状者13例, 腹痛至皮肤紫癜出现的时间为1-12(平均4.6) d. 先紫癜后腹痛者29例; 紫癜与腹痛同时出现者9例. 单纯皮肤型17例, 伴关节症状者29例, 伴肾脏损害者15例.

1.2 方法

获得患儿家长知情同意并签署知情同意书后, 抽取研究对象静脉血2 mL, 离心, 取血清, -20℃冰箱保存. 免疫印迹法是将H. pylori的混合抗原用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳, 按相对分子质量大小不同分开, 再将其转移至硝酸纤维膜上. 如果被检血清有相应抗体, 应用酶联免疫吸附反应, 就会在抗原的相应位置出现显色区带, 据阳性区带的相对分子质量即可判断H. pylori感染类型. 试剂采用深圳伯劳特生物制品有限公司的H. pylori分型检测试剂盒(批号: 080725), 具体步骤详细按试剂盒说明书操作. 抗体阳性判断: CagA阳性: 出现128 kDa和116 kDa两条区带或128 kDa单独出现; VacA阳性: 出现95 kDa和91 kDa两条区带或95 kDa单独出现; Ureas抗体阳性: 出现66 kDa和(或)30 kDa区带. H. pylori分型: Ⅰ型H. pylori感染: CagA或VacA抗体同时阳性或是任意一种阳性; Ⅱ型H. pylori感染: 仅出现Ureas抗体阳性. H. pylori感染阴性CagA、VacA和Ureas三种抗体均为阴性.

统计学处理 实验数据用SPSS统计软件处理, 计数资料采用行×列表χ²检验(不满足条件时采用Fisher确切概率法).

2 结果

有消化系症状HSP组患儿Ⅰ型H. pylori感染占25.5%, Ⅱ型H. pylori感染占52.9%; 而无消化系症状HSP组患儿无Ⅰ型H. pylori感染, Ⅱ型H. pylori感染为34.5%; 正常对照组患儿无Ⅰ型H. pylori感染, Ⅱ型H. pylori感染为12.5%. 三组的H. pylori抗体分型检出率的分布差异有统计学意义(Fisher确切概率P<0.001), 除无消化系症状HSP组与正常对照组比较差异无统计学意义外, 其余两两之间的分布差异均有统计学意义(χ²≥18.276, P<0.001, 表1).

表1 各组不同类型H. pylori抗体的分布 n(%).

分组	n	H. pylori分型
		Ⅰ型	Ⅱ型	阴性
有消化系症状HSP组	51	13(25.5)	27(52.9)	11(21.6)
无消化系症状HSP组	29	0(0.0)	10(34.5)	19(65.5)
正常对照组	40	0(0.0)	5(12.5)	35(87.5)

有消化系症状HSP组的H. pylori抗体阳性检出率与无消化系症状HSP组及正常对照组不同,有消化系症状HSP组患儿的H. pylori抗体阳性检出率(78.4%)明显高于无消化系症状HSP组(34.5%)和正常对照组(12.5%). 三组的H. pylori抗体阳性检出率差异有统计学意义(χ² = 41.236, P<0.001), 除无消化系症状HSP组与正常对照组外, 其余两两之间的差异均有统计学意义(χ²≥15.236, P<0.001, 表2).

表2 各组H. pylori抗体检出分布 n(%).

分组	n	H. pylori抗体
		阳性	阴性
有消化系症状HSP组	51	40(78.4)	11(21.6)
无消化系症状HSP组	29	10(34.5)	19(65.5)
正常对照组	40	5(12.5)	35(87.5)

3 讨论

H. pylori是一种螺旋状的革兰氏阴性微需氧菌, 主要存在于胃黏膜. 据世界胃肠病学组织(WGO-OMGE)统计[4]_: 全球H. pylori感染率大于50%, 其中亚洲地区感染率为50%-80%; 发达国家H. pylori感染率有下降趋势, 而发展中国家H. pylori感染率较高, 年龄、种族、性别、地理位置和社会经济状况等是影响H. pylori发病率和感染率的因素. 近来有报道[2], H. pylori感染不仅可引起消化系疾病, 还可引起慢支炎、肝硬化、冠心病、偏头痛、过敏性紫癜等胃外疾病. 1995年德国Reinauer et al[5]首先报道1名H. pylori感染的HSP患者, 经根除治疗后, 皮肤紫癜、消化系症状和蛋白尿均消失, 10 mo后复发, 再次行根除治疗症状消失. 之后, H. pylori感染与HSP之间的关系渐引起国内外学者的关注[1,2,6]. 本研究显示, 有消化系症状HSP组、无消化系症状HSP组、正常对照组三组的H. pylori抗体检出率差异有统计学意义. 有消化系症状HSP组的H. pylori抗体表达阳性率(78.4%)明显高于无消化系症状HSP组(34.5%)和正常对照组(12.5%), 支持H. pylori感染可能是HSP发病的因素之一或是加重胃肠道症状的原因.

近年来, 随着对H. pylori生物学特性、分型和致病作用等方面探讨的深入, 发现H. pylori菌株是决定其感染临床后果的重要因素之一. H. pylori存在一些不同的型, 其致病性有较大的区别. Ⅰ型H. pylori菌株产生VacA和CagA有毒力, 可导致上消化系广泛的组织炎症, 促使溃疡疾病的发生发展; Ⅱ型H. pylori为不产生细胞毒素菌株, 即VacA(-)和CagA(-)其毒性小, 感染后一般只引起轻度慢性浅表性胃炎, 或无明显临床症状[7-8]. 本研究应用免疫印迹法检测血清H. pylori的CagA、VacA、UreA、UreB等抗体类型. 结果发现, 有消化系症状HSP组患儿Ⅰ型H. pylori感染占25.5%, Ⅱ型H. pylori感染占52.9%; 而无消化系症状HSP组患儿无I型H. pylori感染, Ⅱ型H. pylori感染为34.5%; 正常对照组患儿无Ⅰ型H. pylori感染, Ⅱ型H. pylori感染为12.5%, 这提示HSP患儿消化系症状可能与Ⅰ型H. pylori感染密切相关.

目前, H. pylori感染诱发HSP的机制尚未阐述清楚, 可能为: H. pylori在胃黏膜定植后, 其菌体、鞭毛、细胞毒素、尿素酶、脂多糖(LPS)、热休克蛋白60(HSP60)、过氧化氢酶(触酶)、过氧化物歧化酶(SOD)及iceA基因等致病因子刺激机体产生炎症和免疫反应[6,9], 释放炎症介质、细胞因子等, 一方面造成组织及血管内皮的损伤[10], 是HSP的发病的基础, 并能加重消化系症状; 另一方面, H. pylori细胞毒素和酶对黏膜的损伤及局部炎症和免疫反应, 使胃肠黏膜屏障作用削弱[11]. 机体与消化系内变应原(食物、病原包括H. pylori、药物等)接触的机会亦增多, 从而HSP发生的机率随之增加.

免疫印迹法(immunoblotting)检测幽门螺杆菌具有高特异性、高灵敏度及易操作性的特点, 被认为是H. pylori血清学检测的"金标准"[12-13]. 曹永东[14]研究发现, 应用免疫印迹技术检测H. pylori, 与细菌培养和Giemsa染色的结果进行比较无显著性差异, Immunoblotting是诊断H. pylori感染的一种可靠的非侵入性血清学方法. 第三次全国幽门螺杆菌感染若干问题共识报告[15]指出, 血清H. pylori抗体检测有88%-99%敏感性, 87%-94%特异性, 是流行病学调查的首选, 还可作为H. pylori感染从未治疗者现症感染的依据, 其推荐等级为A级. 由于H. pylori根除后, 血清中抗体水平在3-9 mo内仍可维持阳性. 因此, 不能用于药物治疗后效果的评价[16].

评论

背景资料

过敏性紫癜(HSP)是儿童时期最常见的血管炎之一. 病因及发病机制至今未完全明确. 近年来, 发现幽门螺杆菌(H. pylori)感染与儿童HSP发病有关, 但对H. pylori感染的HSP患儿血清学分型诊断尚少有报道.

同行评议者

郑鹏远, 教授, 郑州大学第二附属医院消化科; 周士胜, 教授, 大连大学医学院医学研究中心

研发前沿

自Warren和Marshll报道在人胃黏膜组织中分离出幽门螺杆菌以来, 越来越多的证据已经证实H. pylori感染是慢性胃炎、消化性溃疡、胃黏膜相关性淋巴组织恶性淋巴瘤、胃癌等疾病的重要病因之一. 有报道, H. pylori感染不仅引起消化系疾病, 还可致胃外疾病. HSP与H. pylori感染的相关性已引起国内外学者的关注.

应用要点

本研究发现, HSP的发病可能与H. pylori感染有关, 其消化系症状与Ⅰ型H. pylori感染密切相关, 有助于进一步深入探讨, 并对临床诊治有协助性作用.

同行评价

本研究探讨儿童过敏性紫癜(HSP)与不同类型幽门螺杆菌(H. pylori)感染的关系, 有一定的临床意义和理论价值.

备注

编辑:史景红 电编:吴鹏朕

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