修回日期: 2009-03-04
接受日期: 2009-03-09
在线出版日期: 2009-04-08
目的: 探讨生长抑素联合丹参对实验性急性坏死性胰腺炎(ANP)的治疗作用.
方法: 经胰胆管逆行注射15 g/L去氧胆酸钠0.05 mL/100 g体质量建立大鼠ANP模型. 实验动物大鼠40只、小鼠150只随机各分为5组: 对照组、ANP组、善宁组、丹参组、联合组(善宁+丹参), 每组大鼠8只, 小鼠30只. 观察各组小鼠3 d死亡率; 检测大鼠24 h血清淀粉酶、NO、内毒素、TNF-α、IL-6含量的变化, 并对大鼠胰腺组织进行病理学检查.
结果: 与对照组比较, ANP组小鼠3 d死亡率、大鼠24 h血清淀粉酶、NO、内毒素、TNF-α、IL-6均明显升高(83.3% vs 0.0%, 1521.3±57.9 U/dL vs 659.5±58.7 U/dL, 115.2±9.7 mmol/L vs 34.3±2.1 mmol/L, 0.438±0.137 EU/mL vs 0.029±0.012 EU/mL, 191.7±14.1 ng/L vs 47.5±5.8 ng/L, 152.4±14.7 ng/L vs 41.7±5.8 ng/L, 均P<0.01), 光镜下胰腺组织病理损害明显; 丹参组、善宁组及联合组上述各检测指标均较ANP组明显改善(P<0.05), 但以联合组降低最明显(P<0.05).
结论: 联合应用善宁和丹参治疗ANP有协同作用, 疗效优于单一西药或中药治疗.
引文著录: 张国顺, 王玉兰, 张超, 马利转, 徐晓平. 生长抑素联合丹参对实验性重症急性胰腺炎的治疗作用. 世界华人消化杂志 2009; 17(10): 1021-1024
Revised: March 4, 2009
Accepted: March 9, 2009
Published online: April 8, 2009
AIM: To study therapeutic effects of sandostatin (SS) with salviae miltiorrhizae (SM) on experimental acute necrotizing pancreatitis (ANP).
METHODS: ANP models were induced by retrograde injection of 15 g/L sodium deoxycholate. Forty rats and one hundred fifty mice were randomly divided into five groups: ANP group, sham group, SS group, SM group and combination group with fifty mice and eight rats in each group respectively. Three-day mortality rate of mice was estimated. Serum amylase, NO, endotoxin, TNF-α and IL-6 24 h after the injection were measured and pancreatic histological changes were examined using light microscopy.
RESULTS: Compared with sham group, 3-d mortality rate in mice, amylase, NO, endotoxin, TNF-α and IL-6 of rats in 24 h ANP group were significantly higher (83.3% vs 0.0%, 1521.3 ± 57.9 U/dL vs 659.5 ± 58.7 U/dL, 115.2 ± 9.7 mmol/L vs 34.3 ± 2.1 mmol/L, 0.438 ± 0.137 EU/mL vs 0.029 ± 0.012 EU/mL, 191.7 ± 14.1 ng/L vs 47.5 ± 5.8 ng/L, 152.4 ± 14.7 ng/L vs 41.7 ± 5.8 ng/L, all P < 0.01), and the damage to pancreatic tissue observed by light microscopy was more severe. Compared with ANP group, the above-mentioned indexes of SM group, SS group and combination group were obviously improved (P < 0.05), especially in combination group (P < 0.05).
CONCLUSION: The therapeutic effect of sandostatin with salviae miltiorrhizae inoidesellis on ANP is superior to western medicine or traditional Chinese medicine used alone.
- Citation: Zhang GS, Wang YL, Zhang C, Ma LZ, Xu XP. Therapeutic effect of sandostatin with salviae miltiorrhizae on experimental severe acute pancreatitis. Shijie Huaren Xiaohua Zazhi 2009; 17(10): 1021-1024
- URL: https://www.wjgnet.com/1009-3079/full/v17/i10/1021.htm
- DOI: https://dx.doi.org/10.11569/wcjd.v17.i10.1021
重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis, SAP)是胰腺水肿、出血、坏死引起的全身严重感染性疾病, 临床表现凶险, 病死率高达20%-25%[1]. 研究证实, 其病理过程突出地表现为以组织缺血为特征的胰腺血液循环障碍, 持续的局部组织的血液循环障碍可使胰腺水肿转化为坏死[2-5]. 国内学者对SAP中药治疗方面已有一些研究, 如利用柴胡、丹参、大黄、大承气汤以及清胰汤等治疗SAP均取得一定疗效[6-7]. 中西医结合在SAP治疗中已显示出更加广阔的应用前景. 本研究对比单纯西药、单纯中药、中西医结合对实验性急性坏死性胰腺炎(acute necrotizing pancreatitis, ANP)大鼠的防治作用, 以寻求SAP的最佳治疗手段.
清洁级SD大鼠40只, 体质量180-220 g, 雌雄不限; 清洁级昆明种小白鼠150只(用于3 d死亡率的测定), 体质量25-35 g, 性别不限. 丹参产于贵州赤水, 经贵州省中医研究所鉴定. 淀粉酶试剂盒: 晶美生物工程有限公司. NO试剂盒: 晶美生物工程有限公司. 内毒素试剂盒: 上海伊华临床医学科技公司. 血浆TNF-α、IL-6试剂盒: 晶美生物工程有限公司.
1.2.1 造模及分组: 动物实验前12 h禁食不禁水. 乙醚麻醉, 无菌条件下剖腹, 经十二指肠乳头向胰胆管内逆行注入15 g/L去氧胆酸钠0.05 mL/100 g体质量, 在4 kPa压力下缓慢推注, 注射时阻断胆总管, 以免药液进入肝脏和胆囊. 对照组向胰胆管内注射等量生理盐水. 实验动物大鼠40只、小鼠150只随机分为对照组、ANP组、丹参组、善宁组和丹参、善宁组(联合组); 大鼠每组8只, 小鼠每组30只.
1.2.2 丹参煎剂的制备: 丹参煎前打碎, 用蒸馏水浸泡1 h, 文火煮沸30 min, 煮成50%煎剂.
1.2.3 给药: 对照组手术后不予治疗, 其余4组分别于制模后即刻、6 h及23 h给药治疗. ANP组给予1 mL/100 g体质量盐水灌胃, 丹参组给予1 mL/100 g体质量丹参煎剂灌胃, 善宁组背部皮下注射善宁1.35 μg/100 g体质量(诺华制药有限公司, 批号为505400), 联合组每个时间点同时给予丹参和善宁, 剂量同上. 全部大鼠于制模后24 h 经内眦采血测各项指标, 然后处死动物取胰腺.
1.2.4 测定3 d死亡率: 150只昆明种小白鼠, 随机分为上述5组, 各组均给予上述相应的治疗, 每天2次. 观察动物在手术后3 d的死亡率.
1.2.5 淀粉酶、NO、内毒素、TNF-α、IL-6的测定: 血清淀粉酶活性的测定采用碘比色法; NO 的测定采用硝酸还原酶法; 内毒素的测定采用鲎试剂偶氮显色法作定量测定; 血浆TNF-α、IL-6的测定, 采用ELISA法.
1.2.6 胰腺组织病理学检查: 取十二指肠区胰腺组织经100 g/L甲醛溶液常规固定, 石蜡包埋, HE染色制片后进行组织学观察.
统计学处理 结果以mean±SD表示, 用SPSS12.0软件包进行统计学处理. 以P<0.05为显著性检验界限.
对照组小鼠长期存活; ANP组3 d死亡率为83.3%(25/30), 丹参组、善宁组、联合组的死亡率分别为60.0%(18/30)、46.7%(14/30)、30.0%(9/30), 与ANP组比较均有显著差异(P<0.01), 丹参组和善宁组间无明显差异, 但两组与联合组比较均存在明显差异(P<0.05), 提示丹参、善宁均能降低ANP小鼠的早期死亡率, 但两种联合用药更优.
ANP组血清淀粉酶、NO、内毒素、TNF-α、IL-6升高, 与对照组比较有统计学意义(P<0.01), 各治疗组上述指标均较ANP组明显降低(P<0.01), 以联合组降低最为明显, 与丹参组和善宁组比较也有统计学差异(P<0.05, 表1). 表明丹参、善宁均能降低ANP时血中上述各因子, 但联合用药优于单独用药.
| 分组 | 淀粉酶(U/dl) | NO(mmol/L) | 内毒素(EU/mL) | TNF-α(ng/L) | IL-6 (ng/L) |
| 对照组 | 659.5±58.7 | 34.3±2.1 | 0.029±0.012 | 47.5±5.8 | 41.7±5.8 |
| ANP组 | 1521.3±57.9b | 115.2±9.7b | 0.438±0.137b | 191.7±14.1b | 152.4±14.7b |
| 丹参组 | 989.7±47.2c | 63.37±6.76c | 0.195±0.049c | 117.8±10.4c | 97.1±7.4c |
| 善宁组 | 935.7±72.4c | 5127±6.01c | 0.137±0.027c | 86.9±9.7c | 85.6±7.3c |
| 联合组 | 712.8±49.6ce | 30.26±5.17ce | 0.051±0.014ce | 50.6±5.2ce | 45.6±4.3ce |
ANP组胰腺小叶轮廓破坏, 呈大面积坏死, 间质水肿, 炎细胞浸润, 血管充血伴有红细胞渗出; 善宁组、丹参组和联合组胰腺组织损伤程度明显轻于ANP组, 仅有部分胰腺小叶轮廓破坏, 未见明显炎细胞浸润, 其中联合组损伤最轻(图1).
胰酶活化、炎症介质、细胞因子和氧自由基诱生引发机体超强的炎症反应, 是造成SAP早期病理损害的主要原因[8]. 随后肠源性细菌易位导致严重感染、内毒素血症、细胞因子诱生造成后期病理生理的恶性循环[9]. 各国学者虽对SAP的病理生理特点有了较深刻的了解, 但尚未寻找到特异性的治疗方法. SAP是始于局部胰腺坏死继而波及全身各器官系统的炎症病理过程. 近年来, 中西医结合治疗在SAP的治疗中具有重要作用.
善宁为人工合成的八肽生长抑素, 他不仅抑制胰酶的活性, 还能改善胰腺微循环, 抑制细胞因子的释放, 降低细菌易位率和内毒素血症, 抑制NO的产生以及抗氧自由基等作用, 我们的实验同样证实了善宁对ANP的疗效. 但这类药物药效广泛, 不仅可以抑制胰腺的外分泌, 还可抑制生长抑素、甲状腺素、胰岛素、胰高血糖素等多种激素的释放, 因此在治疗SAP的过程中可能会发生一些非期待的"副效应". 丹参是我国具有代表性的活血化瘀中药, 具有扩张血管、改善血液循环的作用, 价格低廉、应用广泛. 据文献报道, 丹参有效成分丹参酮ⅡA、丹参素和丹酚酸, 经体内外试验证明均是有效的抗氧化剂, 尤其以丹酚酸的抗氧化作用最强[10-11]. 丹参水溶性成分能显著抑制动物的心、脑、肝、肾、睾丸的脂质过氧化[4-5]. 本研究结果显示, 丹参能在SAP时扩张内脏血管, 增加内脏血流量[6-7], 减轻胰腺的病理损害, 阻止病变的继续发展. 本实验应用丹参来治疗SAP, 是第1次系统的在微循环系统变化上了解丹参对SAP的影响. 研究证实丹参可明显改善胰、肝、胃、小肠血流状况, 降低胰腺组织毛细血管壁通透性, 稳定胰腺细胞膜泵功能, 保护亚细胞器的结构和功能, 降低内毒素血症, 防止氧自由基的过氧化损伤和NO的毒性作用. 本结果表明, 善宁和丹参联合用药能明显降低ANP小鼠的死亡率, 而且血中淀粉酶、NO、内毒素、TNF-α、IL-6的含量降低, 胰腺组织病理损害减轻, 与单独应用善宁和丹参组比较差异显著. 表明中西医联合用药能明显提高治疗SAP的疗效. 丹参药效虽稍逊于善宁, 但药源广泛, 价格便宜, 且无明显不良反应, 适于长期治疗. 因此将二者联合应用, 可取长补短, 发挥各自的优势, 提高疗效, 减少并发症的发生, 降低病死率, 减少费用, 减轻西药的不良反应.
急性胰腺炎(AP)尤其是急性重症胰腺炎(SAP)是临床上常见并非罕见的十分凶险的急腹症, 并发症多, 死亡率高达50%以上. 迄今为止, 对于AP的发病确切机制仍不十分清楚. 目前比较公认的四大机制是: 胰酶自身消化学说、白细胞过度激活学说、胰腺微循环障碍学说和肠道细菌移居胰腺组织学说. 四者相互影响、相互作用, 胰腺缺血和白细胞过度激活释放炎症介质是急性胰腺炎的发生、加重因素, 胰酶细胞内激活致胰腺自身消化是急性胰腺炎进展的关键因素.
樊晓明, 主任医师, 复旦大学附属金山医院消化科; 潘秀珍, 教授, 福建省立医院消化研究室
改善胰腺炎微循环成为了治疗研究的热点, 已有研究证实内皮素/一氧化氮(ET/NO)比值维持或趋于正常可以影响胰腺炎的发病进展, 因此改善胰腺微血管收缩-舒张因子的平衡状态也成为研究的热点.
Plusczyk在应用牛胆磺酸钠诱导的大鼠急性胰腺炎模型研究中认为: 生长抑素可通过减少血流多项性, 增加功能血管密度及血细胞速度的提高来改善胰腺微循环. 殷保兵的动物实验研究表明: 生长抑素通过降低大鼠急性重症胰腺炎血炎症介质、NO、ET的浓度, 调节ET/NO使之达到新的平衡从而改善血管通透性, 改善脑水肿, 减轻急性重症胰腺炎并发的脑损害. 此外, 传统的中医中药对急性重症胰腺炎的治疗也取得令人满意的效果.
本研究立题依据充分, 实验设计严谨, 实验动物和材料规范, 技术流程合理, 结果可信, 讨论简洁, 观点明确, 有利于重症急性胰腺炎的理论研究和临床参考.
编辑:李军亮 电编:何基才
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