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世界华人消化杂志. 2006-04-08; 14(10): 1015-1018
在线出版日期: 2006-04-08. doi: 10.11569/wcjd.v14.i10.1015
直肠癌C-erbB-2、nm23蛋白表达的相关性与预后的关系
高凤兰
高凤兰, 漯河医学高等专科学校病理教研室, 病理研究中心 河南省漯河市 462000
通讯作者: 高凤兰, 462000, 河南省漯河市大学路148号, 漯河医学高等专科学校. lhyzgao@126.com
电话: 0395-2924144 传真: 0395-2931578
收稿日期: 2006-02-13
修回日期: 2006-02-22
接受日期: 2006-03-07
在线出版日期: 2006-04-08

目的: 探讨直肠癌C-erbB-2和nm23蛋白的表达及其与肿瘤浸润和转移的关系.

方法: 采用免疫组化方法检测85例直肠癌标本中C-erbB-2和nm23蛋白的表达, 并对其相关性及其与预后的关系进行分析.

结果: 在直肠癌85例中, nm23表达阳性率78.8%. 按Dukes分期, A期高表达率80.9%明显高于C期42.3%和D期27.7%(P<0.05), 与B期75%相比差异无显著性(P>0.05). C-erbB-2阳性率80% , 与nm23表达相反, D期高表达率77.7%明显高于A期28.5%和B期30%(P<0.05), 与C期76.9%相比差异无显著性(P>0.05). nm23高表达率为80%, 明显高于低分化腺癌25%和粘液癌10.5%(P<0.05), 与中分化腺癌71.5%相比差异无显著性(P>0.05). 在低分化腺癌 C-erbB-2高表达率为81.2%,粘液癌78.9%,明显高于中分化腺癌40%、高分化腺癌26.6%(P<0.05), 低分化癌、粘液癌二者相比差异无显著性(P>0.05). 在术后生存5年以上的41例患者中, nm23高表达率73.1%, C-erbB-2高表达率31.7%, 44例术后生存5年以下者, nm23高表达率34.1%, C-erbB-2高表达率84.1%.

结论: (1) nm23与C-erbB-2蛋白表达呈明显的负相关；(2) C-erbB-2高表达主要见于直肠癌Dukes的C、D期, 提示与直肠癌浸润、转移有明显关系, nm23的低表达与C-erbB-2高表达者预后不佳.

关键词: 直肠癌; nm23; C-erbB-2; 相关性; 预后
引文著录: 高凤兰. 直肠癌C-erbB-2、nm23蛋白表达的相关性与预后的关系. 世界华人消化杂志 2006; 14(10): 1015-1018
The relationship between the expression of C-erbB-2, nm23 protein in tissue of rectal cancer and its prognostication
Feng-Lan Gao
Feng-Lan Gao, Department of Pathematology, Medical school of Luohe, Luohe 462000, Henan Province, China
Correspondence to: Feng-Lan Gao, Department of Pathology, Luohe Medical School, 148 Daxue Road, Luohe 462000, Henan Province, China. lhyzgao@126.com
Received: February 13, 2006
Revised: February 22, 2006
Accepted: March 7, 2006
Published online: April 8, 2006

AIM: To study the relationship between the expression of C-erbB-2, nm23 protein in tissue of rectal cancer and its infilitration or metastasi.

METHODS: The expression of C-erbB-2, nm23 protein in sample of rectal cancer was detected by immunohistochemistry and its relationship to other factors and its prognostication were analyzed respectively.

RESULTS: The total positive rate of nm23 in tissue of rectal cancer was 78.8%(67/85). According to data of Dukes, the high level was higher in A state (80.9%) than that in C state (42.3%) and D state (27.7%) (P < 0.05), and similar to B state (75.0%) (P > 0.05). The total positive rate of C-erbB-2 was 80%(68/85) and high expression rate in these samples was 54.1%(46/85). It was inverse correlation to expression of nm23. The level of C-erbB-2 in D state was high (77.7%) than that in A state (28.5%) and B state (30.0%) (P < 0.05), and had little difference in C state (76.9%) (P > 0.05). High level of nm23 was more common expressed in tissue of well-differentiated adencarcinoma (80%) than that in poorly differentiated adencarcinoma (25.0%), areolar cancer (10.5%) (P < 0.05), and was similar to moderately differentiated adencarcinoma (71.49%) (P > 0.05). High level of C-erbB-2 was more common expressed in tissue of poorly differentiated adencarcinoma (81.2%) and areolar cancer (78.9%) than that in moderately differentiated adencarcinoma (40%) and well-differentiated adencarcinoma (26.6%) (P < 0.05). There was no significantly difference between in poorly differentiated adencarcinoma and in areolar cancer (P > 0.05). In 41 of 85 patients after treatment for more than five years, high expressive rates of nm23 and C-erbB-2 were 73.1% and 31.7%. In 44 of 85 patients after treatment for less than five years, high expressive rates of nm23 and C-erbB-2 were 34.1% and 84.1%.

CONCLUSION: It has been shown that the expression of nm23 is inverse correlation to that of C-erbB-2. High level of C-erbB-2 is more common in tissue of rectal cancer in C and D state of Dukes, and is associated with infilitration and metastasi of rectal cancer. The prognostication in patients with low expression of nm23 and high expression of C-erbB-2 is common poor.

Key Words: Rectal cancer C-erbB-2 nm23 Relationship Prognostication
0 引言

肿瘤的浸润与转移是一个多基因调控、多步骤、多阶段演进的过程, 其中肿瘤细胞的异常增生是肿瘤浸润与转移的基础, 肿瘤黏附性改变和运动能力增强及细胞外基质的降解是侵袭转移的条件[1]. C-erbB-2也称为Her-2或Neu基因. 与上皮生长因子受体(EGFR)非常相似, 具有酪氨酸磷酸激酶活性, C-erbB-2过度表达可刺激肿瘤细胞恶性生长[2], 在乳腺癌中的过度表达的意义研究较多, 但在直肠癌组织中的表达研究较少. nm23(non-metastasis23)基因为一重要的转移抑制基因, 在不同肿瘤中表达不一致, 我们探讨这2种蛋白在直肠癌中的表达、与肿瘤组织浸润、转移的关系及其相关性.

1 材料和方法
1.1 材料

选择1999/2003漯河医学高等专科学校病理检验研究中心手术切除归档标本蜡块85例, 随访资料完整, 经HE染色病理复诊证实. Dukes A期21例, B期20例, C期26例, D期18例(均有肝转移)[3]; 组织学类型及分化程度: 高分化腺癌15例, 中分化腺癌35例, 低分化腺癌16例, 黏液腺癌19例; 术后生存时间≥5年组41例, <5年组44例; 男56例, 女29例; 平均年龄53.7(37-78)岁. C-erbB-2兔抗人mAb(CB11), 为Zymed公司产品、nm23鼠抗人mAb; 免疫组化EnVision试剂盒购自Dako公司.

1.2 方法

采用EnVision法. (1)人直肠癌肿瘤标本石蜡连续切片4 mm厚脱蜡至水; (2)抗原热修复处理, 入Citrate缓冲液(0.01 mol/L, pH 6.0), 微波(MW)中火煮沸10 mim; (3)蒸溜水洗后, 入30 mL/L过氧化氢5 min; (4)蒸溜水洗后, 再经TBS缓冲液洗, 加入一抗体C-erbB-2, nm23孵育30 min; (5)经TBS缓冲液冲洗3次, 每次2 min; 加入EnVision孵育30 min; (6)经TBS液冲洗3次, 每次2 min; 加DAB显色; (7)蒸溜水洗后, 苏木素复染, TBS代替一抗作阴性对照, 以已知阳性组织作阳性对照. C-erbB-2阳性表达为胞质和/或胞膜着色, nm23基因蛋白阳性表达主要是胞质着色, 呈棕黄色颗粒状, 偶尔可见胞核着色. 其表达强度根据高倍镜下5个视野着色细胞所占比例均值进行分级: 每例通常观察200个细胞, 凡病变细胞未着色和着色细胞数<25%为阴性(-), 25%-40%弱阳性(+), 41%-60%为阳性(++), >60%为强阳性(+++); (++)、(+++)均归为高表达[3].

统计学处理 结果行χ2检验.

2 结果
2.1 nm23及C-erbB-2表达与直肠癌Dukes分期

在85例直肠癌中nm23表达阳性率78.8%, 高表达率56.5%. A期高表达率80.9%明显高于C期42.3%和D期27.7%(P<0.05), 与B期75.0%相比差异无显著性(P>0.05). C-erbB-2阳性率80.0%, 高表达率54.1%, 与nm23表达相反, D期高表达率77.7%明显高于A期28.5%和B期30%(P<0.05), 与C期76.9%相比差异无显著性(P>0.05, 表1).

表1 直肠癌nm23及C-erbB-2表达与Dukes分期的关系 n (%).
Dukes分期nm23
C-erbB-2
-++++++高表达-++++++高表达
A21139817 (80.9)a87516 (28.5)a
B20238715 (75.0)86426 (30.0)
C26877411 (42.3)2412820 (76.9)
D1876235 (27.7)135914 (77.7)
aP<0.05 vs C, D组.
2.2 nm23及C-erbB-2表达与直肠癌组织学类型

在高分化腺癌nm23高表达率为80.0%, 明显高于低分化腺癌25.0%和黏液癌10.5%(P<0.05), 与中分化腺癌71.5%相比差异无显著性(P>0.05). C-erbB-2高表达率在低分化腺癌为81.2%, 黏液癌78.9%, 明显高于中分化腺癌40.0%、高分化腺癌26.6%(P<0.05), 低分化癌和黏液癌二者相比差异无显著性(P>0.05, 表2). 在术后生存5年以上的41例患者中, nm23高表达率73.1%, C-erbB-2高表达率31.7%, 44例术后生存5年以下者, nm23高表达率34.1%, C-erbB-2高表达率84.1%(表2).

表2 nm23及C-erbB-2蛋白阳性表达与直肠癌病理组织类型与术后生存的关系 n (%).
组织学类型与术后生存nnm23
C-erbB-2
-++++++高表达-++++++高表达
高分化腺癌15125712 (80.0)653 14 (26.6)
中分化腺癌3523171330 (85.7)a81312214 (40.0)a
低分化腺癌1675314 (25.0)a125813 (81.2)0a
黏液癌1989112 (10.5)a226915 (78.9)a
≥5年4129111930 (73.2)c141610111 (26.8)c
<5年44161015318 (40.9)36161935 (79.5)
aP<0.05 vs 高分化腺癌;
cP<0.05 vs <5年.
2.3 nm23及C-erbB-2蛋白阳性表达的相互关系

85例直肠癌中, nm23表达阳性67例(78.8%), 其中轻度表达19例, 中度表达26例, 高度表达22例, 18例表达阴性. C-erbB-2表达阳性68例(80%), 其中轻度表达22例, 中度表达26例, 高度表达20例, 17例阴性表达, nm23及C-erbB-2表达的相互关系见表3.

表3 nm23及C-erbB-2表达的相互关系 n (%).
nm23nC-erbB-2
-++++++
阴性1801 (11.1)5 (27.8)11 (61.1)
阳性6717 (25.4)21 (31.3)21 (31.3)9 (13.4)
合计8517 (20.0)22 (25.9)a26 (30.6)a20 (23.5)a
aP<0.05 vs nm23阳性.
3 讨论

直肠癌是一种常见的恶性肿瘤, 近年来发病率有升高趋势, 其浸润转移是非常复杂的过程. 近来的研究资料表明, 肿瘤相关基因的激活、转移抑制基因的功能丧失是肿瘤转移的主要原因, 人类肿瘤中, 受诸多癌基因与抑癌基因的控制, C-erbB-2位于17号染色体长臂, 编码一种具有酪氨酸蛋白激酶活性的物质, 即p185糖蛋白. 该基因扩增或过表达出现于某些肿瘤组织中, 参与肿瘤的发生和发展过程, 并与患者预后有关[2], C-erbB-2与EGFR具有高度同源性, 两者在肿瘤的发生和生物学行为等方面可能存在协同作用[5-7], 已有报道C-erbB-2或EGFR的表达与肿瘤的浸润和转移有关[8-9]. Kapitanovic et al[10]用免疫组化法检测151例大肠癌患者C-erbB-2基因, 发现细胞核内C-erbB-2表达与生存期短密切相关, 所有患者均呈阳性表达. 但强阳性者只占43%. Kay et al[11]观察164例Dukes B期大肠癌患者, 发现33.5%的患者肿瘤细胞染色质阳性, 并认为是预后差的标志物, 5年生存率以47%对C-erbB-2阴性者的77%. 对293例未分化大肠癌的研究认为, C-erbB-2染色是一种独立的预后标志物. 本结果显示: 85例直肠癌中C-erbB-2阳性率80.0%(68/85), 高表达率54.1%(46/85), 按Dukes分期, 以C、D期表达率较高, 在术后生存5年以上的41例患者中, C-erbB-2高表达率31.7%, 44例术后生存5年以下者, C-erbB-2高表达率84.1%, 与文献[12]报道相似, 说明C-erbB-2的高表达可以促进肿瘤细胞的浸润与转移, 预后不佳.

nm23基因是l988年Steeg et al[13]从K1735鼠黑色素瘤细胞系分离出来的一种与恶性肿瘤转移有关的基因. 他在低转移细胞株中的表达程度是高转移细胞株的l0倍. nm23基因产物为核苷酸二磷酸激酶(NDPK), 此酶通过调节细胞内信号传递、分化等代谢过程, 影响微管、微丝等细胞骨架蛋白的生物活性而发挥生长抑制的负性调节作用. 人类的nm23基因有两个亚型, 即nm23-H1和nm23-H2. 且受两个独立系统所调节, 前者似乎与癌转移的关系更为密切. Wang et al[14]用Southern印迹法及RT-PCR技术发现20例大肠癌患者中, 8例有淋巴结及远处转移者中4例有等位基因缺失或突变. 12例无转移者无上述变化. nm23-Hl等位基因缺失与低分化积度密切相关, 且生存期短. Tomic et al[15]报道大肠癌组织中nm23阳性率为71.6%. 其低表达与淋巴结转移有关(P<0.05). 本结果显示, nm23的表达与C-erbB-2的表达正相反, 85例直肠癌中nm23表达阳性率78.8%(67/85), 高表达率56.5%(48/85). 按Dukes分期, 以A, B期表达率较高, 在术后生存5年以上的41例患者中, nm23高表达率73.1%, 44例术后生存5年以下者, nm23高表达率34.1%. nm23与C-erbB-2的表达呈明显的负相关性, 且均与组织学类型有关.

从nm23基因表达和预后及生存期来看, 两组5年生存率不同的患者nm23表达有显著性差异(P<0.025). nm23高表达比nm23低表达患者预后好. 这说明nm23基因不但可以作为判断转移的标志基因, 而且还有助于判断患者的预后, 这与nm23基因转移抑制作用是相一致的[16-17]. nm23基因蛋白低表达和C-erbB-2基因蛋白高表达者预后较差.

评论
背景资料

直肠癌是一种常见的恶性肿瘤, 其发病率和死亡率呈逐年上升趋势,提高大肠癌长期生存率的关键是早期诊断, 并准确地判断预后. 近来的研究资料表明, 肿瘤相关基因的激活、转移抑制基因的功能丧失是肿瘤转移的主要原因, 本文旨在探讨nm23及C-erbB-2这2种蛋白在直肠癌中的表达、与肿瘤组织浸润、转移的关系及其相关性, 为直肠癌患者判断预后提供参考依据.

创新盘点

本文较为全面的观察了nm23及C-erbB-2的表达与直肠癌患者的预后的关系, 提出了nm23与C-erbB-2的表达呈负相关的观点, 且nm23的低表达与C-erbB-2的高表达提示患者预后不佳, 生存时间明显缩短.

应用要点

对nm-23和CerbB-2蛋白检测可用来判断直肠癌患者的预后.

名词解释

1 C-erbB-2: 也称为Her-2或Neu基因. 与上皮生长因子受体(EGFR)非常相似, 具有酪氨酸磷酸激酶活性, C-erbB-2过度表达可刺激肿瘤细胞恶性生长.

2 nm23: 是l988年Steeg et al从K1735鼠黑素瘤细胞系分离出来的一种与恶性肿瘤转移有关的基因. 他在低转移细胞株中的表达程度是高转移细胞株的l0倍. nm23基因产物为核苷酸二磷酸激酶(NDPK), 此酶通边调节细胞内信号传递、分化等代谢过程, 影响微管、微丝等细胞骨架蛋白的生物活性而发挥生长抑制的负性调节作用. 人类的nm23基因有两个亚型, 即nm23-H1和nm23-H2. 且受两个独立系统所凋节, 前者似乎与癌转移的关系更为密切.

电编:张敏 编辑:潘伯荣

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