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世界华人消化杂志. 2004-09-15; 12(9): 2264-2266
在线出版日期: 2004-09-15. doi: 10.11569/wcjd.v12.i9.2264
幽门螺杆菌相关胃炎患者IL-8的表达研究
徐新前, 段永强
徐新前, 段永强, 湖北省黄石市第一医院内科 湖北省黄石市 435001
通讯作者: 徐新前, 435001, 湖北省黄石市第一医院内科.
收稿日期: 2004-06-30
修回日期: 2004-07-09
接受日期: 2004-07-22
在线出版日期: 2004-09-15

目的: 探讨(Helicobacter pylori, H. pylori)相关胃炎患者IL-8的表达及其作用.

方法: 用RIA法测定慢性胃炎患者H. pylori阳性(n = 11)与H. pylori阴性(n = 10)外周血和胃窦黏膜培养上清液中IL-8含量.

结果: H. pylori阳性者外周血和原位胃窦黏膜的IL-8含量明显高于阴性者(P <0.01); 血IL-8对H. pylori阳性的诊断效率为66.7%, 原位胃窦黏膜IL-8对H. pylori阳性的诊断效率为81.0%.

结论: 血清和原位胃窦黏膜中的IL-8含量增高与H. pylori感染者胃黏膜损伤有关.

关键词: N/A
引文著录: 徐新前, 段永强. 幽门螺杆菌相关胃炎患者IL-8的表达研究. 世界华人消化杂志 2004; 12(9): 2264-2266
N/A
N/A
Correspondence to: N/A
Received: June 30, 2004
Revised: July 9, 2004
Accepted: July 22, 2004
Published online: September 15, 2004

N/A

Key Words: N/A
0 引言

幽门螺杆菌(Helicobacter pylori, H. pylori)定植于胃黏膜表面, 而不侵入胃黏膜内, 诱导胃黏膜局部产生多种炎症细胞因子[1], 影响胃黏膜组织结构. 由于IL-8具有介导炎症反应, 参与免疫调节等广泛的生物学功能, 而文献报道乏见. 我们用放射免疫法(RIA)测定了H. pylori相关胃炎患者的血和黏膜培养上清液中IL-8表达水平, 探讨H. pylori对细胞因子IL-8的影响, 以及IL-8在H. pylori相关性胃炎中的作用.

1 材料和方法
1.1 材料

因反复腹痛、恶心、吐呕、暧气、纳差等症状来院接受胃镜检查及胃黏膜组织病理检查21例. 其中H. pylori阳性11例, H. pylori阴性10例. 慢性浅表性胃炎(CSG)7例, 慢性萎缩性胃炎(CAG)13例, 慢性萎缩性胃炎伴非典型增生1例. 男9例, 女12例, 年龄17-45岁. 1 mo内未接受过抗生素、铋剂和H2受体阻滞剂等药物治疗. 分别取胃窦处黏膜4块, 1块行快速尿素酶试验、1块行病理组织学检查、2块行组织培养. 作出病理诊断和胃窦部H. pylori感染诊断. H. pylori感染的诊断标准为: 快速尿素酶试验和切片Giemsa染色均为阳性确定为H. pylori感染阳性; 两种检查均为阴性视为H. pylori感染阴性. 病理组织学检查诊断标准参照病理学教科书. H. pylori感染阳性和阴性者, 抽晨血2 mL, 分离血清置-70 ℃贮存备检细胞因子含量.

1.2 方法[2]

将2块黏膜组织称重(每一黏膜组织质量要一致)并迅速放入盛有1 mL RPMI 1640培养瓶中, 在37 ℃、50 mL/L CO2培养孵育24 h. 用匀浆器将胃黏膜组织制成组织匀浆, 将匀浆液吸入另一个洁净EP试管中, 低温高速离心15 min, 取上清液置另一种EP试管中置-70 ℃贮存备检细胞因子含量. IL-18 RIA Kit由天津九鼎医学生物工程有限公司提供, 血和黏膜上清液IL-8测定, 严格按说明书操作. 质控批内、批间控制在5% .

统计学处理 数据以χ2±ug/L表示浓度, 检验两样本间显著性差异用t检验. 以H. pylori阴性组IL-8 ≥χ2+2 s 观察灵敏度、特异性和诊断效率.

2 结果

H. pylori阳性与H. pylori阴性患者血IL-8含量为3.93±1.21 vs 0.45±0.11 mg/L(P <0.01); 而胃黏膜中为0.68±0.11 vs 0.30±0.05mg/g(P <0.01). IL-8对H. pylori阳性的诊断效率(见表1).

表1 IL-8对H. pylori阳性的诊断效率.
血清(IL-8≥0.67 mg/L)胃窦黏膜(IL-8≥0.4 mg/g)
灵敏度72.7% (8/11)81.8% (9/11)
特异性60.0% (6/10)80.0% (8/10)
诊断效率66.7% (14/21)81.0% (17/21)
3 讨论

H. pylori感染引起的相关胃肠疾病是目前广泛关注的课题, H. pylori感染引起胃黏膜强烈的中性粒细胞反应造成组织损伤被认为是相关性胃肠疾病的机制之一. 其中IL-8对特异性和非特异性的免疫反应细胞具有强烈的趋化作用, 尤其是对中性粒细胞的趋化和激活作用, 并参与中性粒细胞与内皮细胞黏附过程的调节, 诱导细胞发生变形、脱颗粒、释放氧自由基、白三烯和各种蛋白酶, 从而导致细胞膜变性坏死, 溶酶体破裂, 进一步导致局部细胞、组织损伤. IL-8以一种剂量和时间依赖的方式诱导中性粒细胞迁移并穿过单层培养的胃上皮细胞, 中性粒细胞在穿膜移行过程中明显增加了钠离子的逆向扩散, 损伤胃黏膜屏障[3], 造成以中性粒细胞为主的炎症细胞在局部聚集. IL-8在H. pylori感染的胃黏膜中强烈表达, 使中性粒细胞持续激活和进入胃黏膜[4]. IL-8会在H. pylori感染的胃窦标本表层上皮的细胞及该活检标本的上清液中表达明显增加[2], Holck et al[5]研究表明在H. pylori感染者胃黏膜中IL-8水平明显升高, 而IL-8水平升高与胃黏膜的炎性反应程度明显相关. Kranzer et al[6]在探讨研究H. pylori和树突细胞IL-8水平之间的关系时也发现, 应用不同浓度的H. pylori刺激树突细胞, 经过不同时间的反应后, IL-8水平呈现出剂量依赖性并随着时间的增加不断升高. 我们的研究也表明IL-8在活检标本培养的上清液中表达亦显著增加. IL-8转录增高的量与胃炎活动程度的粒细胞浸润的等级明显相关[3]. 另外H. pylori在从慢性浅表性胃炎-慢性萎缩性胃炎-肠上皮化生-非典型增生-胃癌的演变过程中起重要作用, 他既是慢性胃炎的重要致病因素又是胃癌的起动因子之一. H. pylori能引起局部的细胞免疫和体液免疫反应增强, 激活T淋巴细胞、巨噬细胞和补体通路, 引起胃上皮细胞释放多种细胞因子如IL-1β、IL-8和CD44 等, IL-8对免疫反应有强烈的趋化作用, 又介导胃上皮的炎症反应. 慢性过程越长, 形成肠化生及非典型增生越严重, 最终诱导原癌基因和抑癌基因突变激活, 引起凋亡与增生的失衡促细胞恶变[7-8]. 因此, 局部黏膜产生的IL-8是在H. pylori感染中起重要作用的细胞因子.

Wang et al[9]研究发现H. pylori左旋结构通常出现在慢性胃炎患者感染中, 而且这些患者大多为男性并与年龄有密切关系, 同时他也是引起H. pylori诱发的慢性胃炎患者细胞免疫功能紊乱的一个重要因子. 而Shimoyama et al[10]发现H. pylori水浸液能刺激IL-8的产生, 在中性粒细胞的分化、迁移中起着重要作用, 也从而导致胃黏膜损害的出现.

人类H. pylori感染不仅在成人中出现, 通常在其一生中的早期就已开始出现了. Guiraldes et al[11]应用RT-PCR方法, 测定5-18岁儿童胃黏膜活检标本中IL-8水平时, 发现在H. pylori阳性小儿胃黏膜中的IL-8水平明显高于H. pylori阴性患者的水平. 同样, 有慢性胃炎患者的IL-8水平明显高于那些胃黏膜正常者. 而在消化溃疡患者中的IL-8水平与正常者相比亦明显升高. 这说明IL-8也与儿童H. pylori感染相关的胃黏膜损害有关, 而且也可能是决定临床转归的重要因素. Shimizu et al[12]也发现与未感染H. pylori儿童相比, 感染H. pylori儿童的胃窦、胃体部黏膜中的IL-8水平明显升高, 特别是胃窦处升高尤为明显, 而且该部分儿童的炎性细胞浸润也明显升高, 这些结果表明在感染H. pylori儿童就象成人一样, 其黏膜中IL-8水平升高也可导致胃炎的发生.

长期制酸治疗可能会加速萎缩性胃炎的发展, 因此, Sanduleanu et al[13]发现在H. pylori和非H. pylori双重感染患者周围循环血中的IL-8水平比单纯H. pylori感染以及没有任何细菌感染者的IL-8水平明显升高. 而且, 在H. pylori阳性患者长期制酸治疗中, 可能会导致IL-8水平升高以及萎缩性胃炎的发展, 因而, 他们认为H. pylori和非H. pylori双重感染可能是制酸治疗过程中导致萎缩性胃炎发生的一个主要因素.

Hamaguchi et al[14]在研究根治性H. pylori治疗与早期胃癌行大部分胃切除术后残胃癌的发生关系时发现, 与治疗前相关, 在经过根治性消灭H. pylori后, 残胃黏膜中的黏膜水肿和红斑等均消失. 而在组织学测定上, 出现单核细胞浸润降低, 也基本上没有中性粒细胞浸润, 其IL-8水平亦明显下降. 因此, 他们认为治疗前H. pylori诱发的黏膜损伤及活动性胃炎使残胃黏膜处于高度癌变风险之中, 杀灭H. pylori不仅能使残胃黏膜损害等恢复, 而且可以降低H. pylori相关感染残胃癌发生的危险性.

本研究表明, H. pylori感染时, 不管是原位胃黏膜和血循环中IL-8含量均明显高于H. pylori阴性者. 说明H. pylori感染者胃黏膜损伤以及中性粒细胞浸润与IL-8的过量产生有关.

总之, H. pylori感染患者容易出现胃黏膜损伤及IL-8水平升高, 从而导致一系列的临床反应, 并在H. pylori相关性胃炎、萎缩性胃炎以及胃癌的发生发展中起着生要作用. 通过H. pylori及IL-8细胞因子等的研究, 可能会为临床上H. pylori阳性感染者的治疗以及胃癌等的预防和治疗上提供新的途径和方法, 也可能会更好的指导临床治疗.

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