研究快报 Open Access
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世界华人消化杂志. 2004-08-15; 12(8): 1964-1966
在线出版日期: 2004-08-15. doi: 10.11569/wcjd.v12.i8.1964
FHIT基因蛋白表达与结直肠癌及癌前期病变的临床关系
任建林, 施华秀, 王琳, 洪东旭, 陈建民, 刘明, 叶震世, 董菁, 卢雅丕, 林辉, 潘金水, 林逊汀
任建林, 施华秀, 王琳, 洪东旭, 陈建民, 刘明, 叶震世, 董菁, 卢雅丕, 潘金水, 林逊汀, 林 辉, 厦门大学中山医院消化内科 福建省厦门市 361004
通讯作者: 任建林, 361004, 福建省厦门市, 厦门大学中山医院消化内科.jianlinr@msn.com
电话: 0592-2292017 传真: 0592-2292017
收稿日期: 2004-04-22
修回日期: 2004-05-01
接受日期: 2004-05-09
在线出版日期: 2004-08-15

目的: 探讨脆性组氨酸三联体(fragile histidine trail, FHIT)蛋白在45例结直肠癌、36例结直肠腺瘤和23例正常对照组中的表达情况.

方法: 标本经40 g/L甲醛固定, 常规石蜡包埋, 采用免疫组化SP法检测FHIT在结直肠癌、结直肠腺瘤和正常对照组中的表达.

结果: 在45例结直肠癌中28例FHIT蛋白表达显著减少或缺失, 5例表达减弱, 12例表达阳性; 其中结直肠癌Dukes A, B和C期FHIT蛋白表达阴性比例分别为6/11, 5/12和17/22. 在36例结直肠腺瘤中7例FHIT蛋白表达显著减少或缺失, 4例表达减弱, 25例表达阳性; 其中结直肠腺瘤伴轻、中和重度不典型增生FHIT蛋白表达阴性比例分别为2/16, 1/7和4/13.FHIT蛋白阴性表达在结直肠癌和正常对照组(62.2% vs 4.4%, x2 = 25.33, P<0.01)、结直肠癌和结直肠腺瘤(62.2% vs 19.4%, x2 = 14.19, P<0.01)、结直肠癌未伴淋巴转移的Dukes A+B期和已伴淋巴转移的C期(47.8% vs 77.3%, x2 = 4.28, P<0.05)间均有显著性差异, 而在结直肠腺瘤伴轻度不典型增生和中、重度不典型增生(12.5% vs 25.0%, x2 = 0.84, P>0.25), 结直肠腺瘤和正常对照组(19.4% vs 4.4%, x2 = 3.51, P>0.05)中无显著性差异.

结论: FHIT蛋白在结直肠癌中呈低表达或缺失, 且FHIT低表达与转移状况有相关关系, 提示该基因可能与结直肠癌的发生发展有关.

关键词: N/A
引文著录: 任建林, 施华秀, 王琳, 洪东旭, 陈建民, 刘明, 叶震世, 董菁, 卢雅丕, 林辉, 潘金水, 林逊汀. FHIT基因蛋白表达与结直肠癌及癌前期病变的临床关系. 世界华人消化杂志 2004; 12(8): 1964-1966
N/A
N/A
Correspondence to: N/A
Received: April 22, 2004
Revised: May 1, 2004
Accepted: May 9, 2004
Published online: August 15, 2004

N/A

Key Words: N/A
0 引言

FHIT基因最近在国外成功分离并定位于染色体3p14.2, 该基因具有不稳定性[1-2], 在多种肿瘤中, 包括食管癌[3]、胃癌[4]、结肠癌[5-7]、肺癌[8-9]、肝癌[10]、头颈癌[11]、乳腺癌[12]、胰腺癌[13]和肾癌[14]中, 均有改变, 以缺失为主, 包括外显子和/或内含子的缺失, 还有外源序列的插入[15]. 国外已有少量有关结直肠癌中FHIT基因或表达异常的报道, 对其在结直肠癌发生和发展中的作用尚有争议. 我们采用免疫组化SP法检测结直肠癌和结直肠腺瘤中FHIT蛋白表达情况, 探讨FHIT基因与结直肠癌和结直肠腺瘤的关系.

1 材料和方法
1.1 材料

厦门大学医学院第一临床学院病理科2003-01/ 2003-10存档石蜡块, 男43例, 女61例, 年龄16-80(平均59.5岁). 其中结直肠癌45例, 结直肠腺瘤36例和正常对照组23例. 结直肠癌Dukes A期11例, B期12例和C期22例. FHIT抗体为Santacruz公司产品, 购自北京中山生物工程公司.

1.2 方法

所有标本均经40 g/L甲醛固定, 常规石蜡包埋, 4 μm切片, 切片脱蜡至水, 在30 mL/L过氧化氢-甲醇中浸泡10 min以灭活内源性过氧化氢酶, 采用枸橼酸-微波-SP法在10 mmoL/L枸橼酸(pH 6.0)中煮沸5 min, 保温10 min, 100 mL/L羊血清封闭. 加入兔抗人多克隆FHIT抗体, 4 ℃过夜; 免疫组化染色按SP试剂盒推荐方法进行. 观察FHIT蛋白的分布、阳性强度和阳性率. 参照文献标准[16], 先按染色强度评分: 无色 0分; 浅黄色 1分; 黄色2分; 棕黄色 3分.再按阳性细胞所占百分比评分: 阴性 0分; 阳性细胞≤10% 1分; 阳性细胞11%-50% 2分; 阳性细胞51%-75% 3分; 阳性细胞>75% 4分.染色强度与阳性细胞相乘, 乘积9-12分为表达阳性; 6-8分为表达减弱; 0-4分表达显著减少或缺失, 表达阴性.

统计学处理 在SAS6.12软件包中进行检验, 趋势性检验采用x2检验.

2 结果

在正常组织中FHIT基因蛋白主要表达于正常或非癌结直肠黏膜和癌组织上皮细胞的胞质以及一些间质细胞如淋巴细胞、浆细胞和组织细胞的胞核和胞质中, 呈棕黄色颗粒状. 在23例正常对照组中有22例FHIT蛋白表达阳性, 1例表达阴性, 阴性表达率为4.4%(1/23, 表1).

表1 FHIT蛋白在不同肠黏膜组织中的表达.
组织类型FHIT表达(染色强度与阳性细胞乘积)
合计
0-4分(阴性)6-8分9-12分(阳性)
结直肠癌2851245
Dukes A期62311
Dukes B期52512
Dukes C期171422
结直肠腺瘤742536
轻度不典型增生221216
中度不典型增生1157
重度不典型增生41813
正常黏膜12223
2.1 FHIT蛋白在结直肠癌中的表达

在45例结直肠癌中有28例FHIT蛋白表达显著减少或缺失, 即阴性表达率为62.2%, 5例表达减弱, 12例表达阳性, 且阳性表达者染色强度较正常黏膜高; 其中结直肠癌Dukes A, B和C期FHIT蛋白表达阴性比例分别为6/11, 5/12和17/22. 结直肠癌FHIT蛋白阴性表达率显著高于正常对照组(62.2% vs 4.4%, x2 = 25.33, P<0.01), 具有显著性差异. FHIT蛋白在未伴淋巴转移的Dukes A+B期和已伴淋巴转移的C期中表达有显著性差异(47.8% vs 77.3%, x2 = 4.28, P<0.05).

2.2 FHIT蛋白在结直肠腺瘤中的表达

在36例结直肠腺瘤中有7例FHIT蛋白表达显著减少或缺失, 即阴性表达率为19.4%, 4例表达减弱, 25例表达阳性; 其中结直肠腺瘤伴轻度、中度和重度不典型增生FHIT蛋白表达阴性比例分别为2/16, 1/7和4/13. FHIT蛋白阴性表达率在结直肠腺瘤与结直肠癌间存在显著性差异(19.4% vs 62.2%, x2 = 14.19, P<0.01).FHIT蛋白阴性表达在结直肠腺瘤伴轻度不典型增生和中+重度不典型增生中表达无显著差异(12.5% vs 25.0%, x2 = 0.84, P>0.25), 与正常对照组比较亦无显著性差异(19.4% vs 4.4%, x2 = 3.51, P>0.05).

3 讨论

FHIT基因定位于染色体3p14.2, 其cDNA全长为1 095 bp, 共有10个外显子, 其中5-9为编码外显子, 跨越t (3; 8)易位断裂点和极脆性区域FRA3B. FHIT存在于大多数正常组织中, 国外发现多种肿瘤组织中FHIT蛋白表达频繁降低或丢失, 并发现与FHIT基因转录和缺失有关, 提示该基因为肿瘤候选抑制基因, 该蛋白有肿瘤抑制性和很强的诱导细胞凋亡能力. Capuzzi et al[17]对55例胃腺癌的研究表明, 49%的病例FHIT蛋白完全丢失, FHIT蛋白缺失与Lauren分类、肿瘤浸润、核分级无关, 而与分期、分级、生存期相关, 分期越晚、分级越高, FHIT丢失率越大, FHIT表达阴性患者存活时间明显低于FHIT表达阳性患者. Ho et al[18]对48例早期肺非小细胞癌(NSCLC)的研究显示, 58.3%存在FHIT表达缺失, 说明FHIT变化在支气管上皮细胞生长中起重要作用.

我们研究证实结直肠癌中存在FHIT蛋白表达显著减少或缺失, 其阴性表达率为62.2%, 略高于国外研究结果, Hao et al[16]采用免疫组化检测结肠癌和中重度不典型增生腺瘤中FHIT蛋白表达, 发现FHIT蛋白阴性表达率分别为44%和17%. 赵坡 et al[19]采用类似方法检测60例结肠癌中FHIT蛋白表达, 发现55%结肠癌FHIT蛋白表达显著减少或缺失, 说明FHIT低表达在结肠癌发生、发展中具有重要作用.我们研究中癌组织FHIT蛋白低表达在Dukes分期组中的分布差异具有显著性, 提示FHIT蛋白表达减少与转移状况具有一定的相关关系, 与Kuwai et al[20]的研究结果相一致. Mori et al[21]采用RT-PCR方法对62例结肠癌研究中, 发现结肠癌异常FHIT转录本的检出率为50%. Luceri et al[22]在56例结直肠癌中发现29例(55.18%)存在FHIT基因高频率的缺失、异常转录, 提示FHIT基因主要通过缺失和/或异常转录参与肿瘤的发病机制.

目前有关FHIT与结直肠腺瘤的关系尚有争议, 我们研究发现结直肠腺瘤FHIT阴性表达率为19.4%, 与Hao et al[16]的研究结果一致, 但低于Morikawa et al[23]的研究结果, 在他的研究中, 47%结直肠腺瘤存在FHIT异常表达, 且与不典型增生程度有关. Saitoh et al[24]检测211例腺瘤(其中22.7%为扁平凹陷型腺瘤)FHIT蛋白表达情况, 发现扁平凹陷型腺瘤FHIT蛋白表达明显强于同样大小的隆起型腺瘤, FHIT在腺瘤中的表达异常, 有待于进一步探讨.

编辑: N/A

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