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世界华人消化杂志. 2004-04-15; 12(4): 1002-1004
在线出版日期: 2004-04-15. doi: 10.11569/wcjd.v12.i4.1002
乙肝肝硬化患者血清IFN-及相关因子水平与肝脏炎症活动的关系
唐洁婷, 房静远, 顾伟齐
唐洁婷, 房静远, 顾伟齐, 上海第二医科大学附属仁济医院, 上海市消化疾病研究所 上海市 200001
通讯作者: 房静远, 200001, 上海市山东中路145号, 上海第二医科大学附属仁济医院,上海市消化疾病研究所. jingyuanfang@yahoo.com
电话: 021-63200874 传真: 021-63266027
收稿日期: 2003-09-15
修回日期: 2003-10-01
接受日期: 2003-10-27
在线出版日期: 2004-04-15

目的: 探讨乙肝肝硬化患者血清中IFN-、IL-2及sIL-2R的水平与肝脏炎症活动的关系.

方法: 应用双抗体夹心ELISA方法测定43例乙肝肝硬化患者(其中静止性肝硬化23例; 活动性肝硬化20例)及19例正常人血清IFN-、IL-2及sIL-2R水平; 并分析其与肝脏炎症情况的关系.

结果: 活动性肝硬化患者血清IFN-、IL-2及sIL-2R浓度均明显高于静止性肝硬化组及正常对照组(35.881±9.032 vs 23.619±8.183 and 21.213±5.876, 11.989±7.232 vs 6.003±2.174 and 5.404±2.161, 848.656±368.105 vs 380.571±290.107 and 94.917±83.672; P<0.01), 肝硬化患者血清IFN-与ALT、IL-2与SB、sIL-2R与ALT、SB有相关性, 且IFN-与IL-2呈正相关.结论: IFN-及相关因子在肝硬化免疫病理中起重要作用, 且与肝脏炎症活动密切相关, 肝组织损伤可能是IFN-及相关因子活性增加的原因.

关键词: N/A
引文著录: 唐洁婷, 房静远, 顾伟齐. 乙肝肝硬化患者血清IFN-及相关因子水平与肝脏炎症活动的关系. 世界华人消化杂志 2004; 12(4): 1002-1004
N/A
N/A
Correspondence to: N/A
Received: September 15, 2003
Revised: October 1, 2003
Accepted: October 27, 2003
Published online: April 15, 2004

N/A

Key Words: N/A
0 引言

以往的研究已证明, 乙型肝炎的发生并不是由乙肝病毒直接侵袭肝脏细胞所引起, 而是与病毒抗原和机体免疫系统相互作用有关, 而CD4+TH细胞在细胞免疫和体液免疫应答过程中有着重要的辅助作用.根据产生的细胞因子不同, CD4+T细胞又可分为TH1、TH2亚群, 其中TH1细胞以产生IFN-、IL-2及TNF-为特征.研究表明, TH1型免疫反应与感染的免疫性和防御性有关.乙肝病情演变后期进入肝硬化阶段后, 其免疫功能的紊乱、肝相关细胞因子表达与肝损伤的关系目前资料尚少, 我们对43例乙肝肝硬化患者及19例正常人血清IFN-、IL-2及sIL-2R进行检测, 并探讨其与肝硬化患者肝脏炎症活动的关系.

1 材料和方法
1.1 材料

肝硬化组(LC): 乙肝肝硬化住院患者43例, 符合临床诊断标准, 其中女18例, 男25例, 年龄为33-81岁, 平均58.4岁, 部分病例为HBeAg阳性. 并按2000年西安会议制定的病毒性肝炎诊断标准, 将43例患者分为静止性肝硬化组(SLC)23例, 活动性肝硬化组(ALC) 20例; 正常人群组(NC): 19例, 其中女9例, 男10例, 年龄为25-65岁, 平均40.9岁(HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb及抗HCV均阴性, 肝功能指标均正常). 主要试剂: IFN-和IL-2试剂盒分别购自美国R&D公司和法国Diaclone公司, sIL-2R试剂盒购自深圳晶美生物制品有限公司.

1.2 方法

所有受检者均在清晨空腹抽取外周静脉血5 mL, 静置30 min, 待血块回缩后分离血清, 2 000 rpm离心10 min, 预留取部分血清作肝功能及HBV标志物的检测, 其余血清-70 ℃保存待测. IFN-、IL-2及sIL-2R的检测均用双抗体夹心ELISA方法, 具体操作严格按试剂盒说明书进行.

统计学处理 采用SPSS统计系统, 实验数据以mean±SD表示, 两组间均数比较采用t检验、相关性研究采用Spearman等级相关分析, P<0.05有统计学意义.

2 结果

2.1 IFN-、IL-2浓度ALC组明显高于NC组、SLC组, 而SLC组与NC组差别无统计学意义; sIL-2R浓度在NC组、SLC组、ALC组中逐渐升高, 且各组差异皆显著(表1).

表1 各组IFN-、IL-2及sIL-2R浓度(mean±SD, pg/mL).
组别IFN-IL-2SIL-2R
NC组21.213±5.8765.404±2.16194.917±83.672
SLC组23.619±8.183d6.003±2.174d380.571±290.107bd
ALC组35.881±9.032b11.989±7.232b848.656±368.105b
aP<0.05,
bP<0.01 vs NC组;
dP<0.01 vs ALC组.

2.2 HBeAg(+)患者的IFN-、IL-2浓度低于HBeAg(-)患者, sIL-2R浓度高于HBeAg(-)患者. 但只有IFN-的差异具有统计学意义(表2).

表2 IFN-、IL-2及sIL-2R浓度与乙肝病毒标志物HBeAg(mean±SD, pg/mL).
nIFN-IL-2SIL-2R
HBeAg(+)621.635±2.007a4.754±1.836663.021±278.722
HBeAg(-)3730.569±10.8009.441±6.125587.787±420.064
aP<0.05 vs HBeAg(-)组.

2.3 IFN-与ALT呈正相关, 与SB无相关; IL-2与SB呈正相关, 与ALT无相关; sIL-2R与ALT及SB皆呈正相关. IFN-与IL-2正相关, sIL-2R与IFN-、IL-2皆无相关(表3).

表3 IFN-、IL-2及sIL-2R浓度与ALT及SB的相关性.
IFN-IL-2sIL2-R
ALTr = 0.339ar = 0.119r = 0.324a
SBr = 0.287r = 0.517ar = 0.455a
IFN-r = 0.324ar = 0.177
IL-2r = 0.263
aP<0.05.
3 讨论

在病毒感染时机体的IFN, 尤其是IFN-, 不仅可直接限制病毒的复制和扩散, 近年来发现他可对许多免疫细胞发挥强大免疫调节作用[1]. 本实验结果显示IFN-水平在活动性肝硬化组中显著升高, 且与ALT正相关(r = 0.339, P<0.05), 这与国外一些文献报道是一致的[2-3]. 亦发现静止性肝硬化组的IFN-水平与正常对照组无统计学差异, 说明炎症减轻, IFN-明显减少. IFN-主要由CD4+的TH1细胞分泌. 近年来, 慢性HBV感染中TH1/TH2细胞平衡失调的作用日益受到人们的关注. Anastassakos et al[4]报道, 慢性HBV感染者, 其T细胞被激活. 国内相关研究[5]也表明, 慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞(PBMC)中, TH0占大多数, 少部分为TH2细胞, 但是随着肝组织炎症活动的加剧, TH1类细胞比例明显增加, 提示TH1细胞与肝组织损伤密切关联.

TH1细胞受病毒感染等刺激后亦产生IL-2, 因为IFN-与IL-2在免疫过程中有协同作用, 所以我们也研究了IL-2在肝硬化中的表达情况. 结果提示, 与IFN-一致, IL-2浓度ALC组明显高于NC组、SLC组, 而SLC组与NC组差别无统计学意义, IL-2与IFN-成正相关. 我们还发现, 在肝功能指标中IFN-与ALT显著相关; 而IL-2与SB显著相关. 我们分析肝硬化患者IFN-、IL-2水平明显高于正常人, 可能与肝硬化患者肝组织受损严重, 功能性肝细胞的数量明显减少, 肝脏清除这些细胞因子的能力下降有关. 乙肝病毒侵入体内, 激活T、B细胞和巨噬细胞表达高亲和性的IL-2R, 未结合的膜白介素II受体(MIL-2R)脱落入血浆, 即为sIL-2R. sIL-2R是机体免疫系统被激活的敏感指标[6]. 一方面sIL-2R可中和活化T淋巴细胞周围的IL-2, 减弱淋巴细胞的自分泌效应, 有助于机体清除病毒; 而另一方面, sIL-2R与MIL-2R竞争性结合IL-2, 加重了免疫功能低下和免疫功能紊乱, 使肝炎病毒感染持续存在[7]. 本组结果显示, 肝硬化患者血清IL-2和sIL-2R水平较正常人升高, 反映患者体内部分抗乙肝病毒免疫力. Sawayama et al[8]报道, 慢性HBV感染的肝硬化患者, 其血清sIL-2R水平与ALT水平呈正相关, 与本组实验结果一致. sIL-2R增高的机制目前尚不完全清楚, 可能因为HBV感染通过激活T细胞杀伤HBV的同时, 引起肝细胞损伤, 使肝脏对sIL-2R的清除能力降低; 另一方面, 又可通过激活T细胞使sIL-2R释放增加, 从而引起血sIL-2R水平增高.

Milich et al[9]用HBeAg和HBcAg分别接种纯种小鼠, 发现HBeAg免疫后表现为TH2反应类型, 用HBcAg免疫则为TH1反应类型. 还有研究[10]认为, HBeAg与慢性乙肝患者PMBC增生和产生IFN-和IL-10有关.Schlaak et al[11]研究发现, 在体外HBeAg诱导PMBC产生TH2反应类型. 本研究中HBeAg(+)组IFN-浓度与HBeAg(-)相比显著降低, 提示HBeAg在这部分患者体内诱导了一个TH2型反应. 而本结果中, 两组IL-2浓度、sIL-2R浓度差异不具统计学意义, 可能与HBeAg(+)组病例样本较小有关.

目前研究认为, 肝硬化患者存在TH1/TH2细胞平衡失调、抑制性T细胞活性下降等免疫功能紊乱情况, 这些似能解释病情活动的肝硬化患者IFN-、IL-2及sIL-2R活性增加的现象, 肝组织损伤可能是IFN-及相关因子活性增加的原因. 检测肝硬化患者血清中的各细胞因子水平, 或在肝组织中的表达程度, 可了解患者体内免疫功能紊乱情况, 预测肝脏炎症反应程度和预后.

编辑: N/A

1.  周 光炎. 免疫学原理. 第1版. 上海: 上海科技技术文献出版社 2000; 83-88.  [PubMed]  [DOI]
2.  Fukuda R, Ishimura N, Nguyen TX, Chowdhury A, Ishihara S, Kohge N, Akagi S, Watanabe M, Fukumoto S. The expression of IL-2, IL-4 and interferon-gamma (IFN-gamma) mRNA using liver biopsies at different phases of acute exacerbation of chronic hepatitis B. Clin Exp Immunol. 1995;100:446-451.  [PubMed]  [DOI]
3.  Lee M, Lee M, Lee SK, Son M, Cho SW, Park S, Kim HI. Expression of Th1 and Th2 type cytokines responding to HBsAg and HBxAg in chronic hepatitis B patients. J Korean Med Sci. 1999;14:175-181.  [PubMed]  [DOI]
4.  Anastassakos C, Alexander GJ, Wolstencroft RA, Avery JA, Portmann BC, Panayi GS, Dumonde DC, Eddleston AL, Williams R. Interleukin-1 and interleukin-2 activity in chronic hepatitis B virus infection. Gastroenterology. 1988;94:999-1005.  [PubMed]  [DOI]
5.  姜 荣龙, 卢 桥生, 侯 金林, 骆 抗先, 章 廉, 富 宁. 辅助性T细胞极化群体在慢性乙型肝炎病毒感染中的作用. 中华医学杂志. 2000;80:741-744.  [PubMed]  [DOI]
6.  Rubin LA, Nelson DL. The soluble interleukin-2 receptor: biology, function, and clinical application. Ann Intern Med. 1990;113:619-627.  [PubMed]  [DOI]
7.  Simsek H, Kadayifci A. Serum interleukin 2 and soluble interleukin 2 receptor in chronic active hepatitis C: effect of interferon therapy. J Int Med Res. 1996;24:239-245.  [PubMed]  [DOI]
8.  Sawayama Y, Hayashi J, Kawakami Y, Furusyo N, Ariyama I, Kishihara Y, Ueno K, Kashiwagi S. Serum soluble interleukin-2 receptor levels before and during interferon treatment in patients with chronic hepatitis B virus infection. Dig Dis Sci. 1999;44:163-169.  [PubMed]  [DOI]
9.  Milich DR, Peterson DL, Schödel F, Jones JE, Hughes JL. Preferential recognition of hepatitis B nucleocapsid antigens by Th1 or Th2 cells is epitope and major histocompatibility complex dependent. J Virol. 1995;69:2776-2785.  [PubMed]  [DOI]
10.  Vingerhoets J, Michielsen P, Vanham G, Bosmans E, Paulij W, Ramon A, Pelckmans P, Kestens L, Leroux-Roels G. HBV-specific lymphoproliferative and cytokine responses in patients with chronic hepatitis B. J Hepatol. 1998;28:8-16.  [PubMed]  [DOI]
11.  Schlaak JF, Tully G, Löhr HF, Gerken G, Meyer zum Büschenfelde KH. HBV-specific immune defect in chronic hepatitis B (CHB) is correlated with a dysregulation of pro- and anti-inflammatory cytokines. Clin Exp Immunol. 1999;115:508-514.  [PubMed]  [DOI]