病毒性肝炎 Open Access
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世界华人消化杂志. 2004-02-15; 12(2): 298-301
在线出版日期: 2004-02-15. doi: 10.11569/wcjd.v12.i2.298
新生儿HBeAg在HBV宫内感染中的作用
邵中军, 门可, 徐剑秋, 徐德忠, 闫永平, 张景霞
邵中军, 门可, 徐德忠, 闫永平, 张景霞, 中国人民解放军第四军医大学流行病学教研室 陕西省西安市 710032
徐剑秋, 陕西省妇幼保健院 陕西省西安市 710003
邵中军, 男, 1973-11-29生, 医学博士, 发表论文6篇.
基金项目: 国家自然科学基金课题, No. 3203023.
通讯作者: 徐德忠, 710032, 陕西省西安市, 中国人民解放军第四军医大学流行病学教研室. xudezh@fmmu.edu.cn
电话: 0293374871
收稿日期: 2003-11-05
修回日期: 2003-12-10
接受日期: 2003-12-19
在线出版日期: 2004-02-15

目的: 探讨新生儿HBeAg在HBV宫内感染中的作用.

方法: 收集HBsAg阳性住院待产孕妇, 采用ELISA方法和abbott试剂对产妇和新生儿HBeAg、HBsAg进行检测.

结果: 57例孕妇血清经实验室复查, HBsAg均阳性, 其中HBeAg阳性孕妇15例. 15例HBeAg阳性孕妇所产的16例新生儿有11例HBeAg阳性(68.75%). 新生儿HBsAg阳性3例, 全部产自于HBeAg阳性母亲, 且其外周血HBeAg均阳性. 统计分析显示新生儿HBeAg是HBV宫内感染的危险因素(P<0.05).

结论: 新生儿HBeAg在HBV宫内感染过程中起重要作用.

关键词: N/A
引文著录: 邵中军, 门可, 徐剑秋, 徐德忠, 闫永平, 张景霞. 新生儿HBeAg在HBV宫内感染中的作用. 世界华人消化杂志 2004; 12(2): 298-301
Effect of HBeAg on the hepatitis B virus vertical transmission in neonates
Zhong-Jun Shao, Ke Men, Jian-Qiu Xu, De-Zhong Xu, Yong-Ping Yan, Jing-Xia Zhang
Zhong-Jun Shao, Ke Men, De-Zhong Xu, Yong-Ping Yan, Jing-Xia Zhang, Department of Epidemiology, Fourth Military Medical University, Xi'an 710032, Shaanxi Province, China
Jian-Qiu Xu, Shaanxi Maternity and Children Healthy Hospital, Xi'an 710003, Shaanxi Province, China
Supported by: National Natural Science Foundation of China, No. 3203023.
Correspondence to: De-Zhong Xu, Department of Epidemiology, Forth Military Medical University, Xi'an 710032, Shaanxi Province, China. xudezh@fmmu.edu.cn
Received: November 5, 2003
Revised: December 10, 2003
Accepted: December 19, 2003
Published online: February 15, 2004

AIM: To investigate the effect of HBeAg on the hepatitis B virus vertical transmission in neonates.

METHODS: HBsAg positive pregnant women were enrolled,and ELISA or Abbott was employed to detect the HBeAg and HBsAg in the peripheral blood of neonates and their mothers.

RESULTS: Fifty-seven HBsAg positive pregnant women were reconfirmed as HBsAg positive. Fifteen of them were detected as HBeAg positive. Eleven of 16 neonates born to 15 HBeAg positive mother were detected as HBeAg positive. Three neonates diagnosed as HBsAg positive by ELISA or Abbott reagents were detected as HBeAg positive. Statistic analysis indicated that HBeAg in newborns was an important risk factor.

CONCLUSION: HBeAg in neonates played an important role during HBV vertical transmission.

Key Words: N/A
0 引言

HBeAg属于HBV核壳蛋白的分泌型, 他不参与病毒复制和病毒颗粒的装配[1-4]. 但由于HBeAg与HBc Ag在一级结构上具有相似性, 在T细胞水平存在交叉识别, 容易引起免疫耐受[5-8]. 同时HBeAg是病毒传染性的重要标志, 也是HBV宫内传播的重要危险因素[9-11], 与新生儿乙型肝炎宫内感染的预后有重要关系[12-14]. 有研究显示HBsAg、HBeAg双阳性孕妇所产婴儿一旦发生感染极易发展成HBV慢性携带状态, 其中约有50%将最终发展成肝硬化、肝癌[15-19]. 目前关于HBeAg能否通过胎盘尚存在争议. 为此, 我们对HBV感染的母亲所产婴儿外周血HBeAg进行检测, 探讨HBeAg能否透过胎盘屏障, 从而为进一步探讨HBeAg与HBV宫内传播的关系提供线索.

1 材料和方法
1.1 材料

2002-10/2003-10连续收集的陕西省某医院HBsAg阳性孕妇及其所产新生儿为研究对象, 采集孕妇肘静脉血、新生儿24 h内股静脉血. 采血后常规注射乙肝免疫球蛋白和乙肝疫苗. 1 500 r/min离心分离血清, -20 ℃保存备用. HBsAg、HBeAg检测试剂盒购于上海科华生物技术公司. Abbott检测试剂由西京医院检验科提供.

1.2 方法

宫内感染定义: 新生儿出生24 h内、未接受主被动联合免疫前的静脉血HBsAg阳性. HBsAg、HBeAg检测均采用酶联免疫黏附试验(ELISA, 上海科华), 结果检测全自动酶联检测仪(Multiskan MK3)上进行. 检测步骤: 吸取血清原液50 μL加入酶联反应板中, 同时滴加辣根过氧化物酶标记的抗体, 37 ℃孵育反应30 min后, 洗液清洗5便; 后加入显色剂A和B, 37 ℃孵育10 min, 加终止液终止反应. 分别于450 nm和630 nm处进行双波长检测, 读吸光度(A)值, P/N大于或等于2.1为阳性. 数日后采用单盲法和同一厂家ELISA试剂进行复测. 如果两次结果一致, 即予采用; 如不一致, 采用Abbott检测方法进行复测, 并以Abbott检测结果为最终结果. Abbott检测及结果报告在Abbott Systems上自动完成.

统计学处理 采用SPSS10.0软件进行统计分析: 计量资料采用t检验对检测结果进行分析, 记数资料采用χ2检验或Fishe's test精确检验, 以P<0.05确定差异是否具有统计意义.

2 结果
2.1 一般情况

共收集临床检验HBsAg阳性孕妇66例及其所产新生儿67例. 经过实验室复测, 剔除HBsAg阴性孕妇2例, 孕妇血清或新生儿血清两不足或已不适于ELISA检测7例, 故实际纳入研究病例数为57例母亲和58例新生儿, 双胎1例. 孕妇平均年龄为27.8±3.1岁. 新生儿体质量为2 978±940 g, 其中男婴27例, 女婴30例, 无畸形儿.

2.2 母亲及新生儿血清HBsAg、HBeAg检测结果

经实验室复查57例孕妇血清HBsAg均阳性, 其中HBeAg阳性孕妇15例. 15例HBeAg阳性孕妇所产的16例新生儿有11例HBeAg阳性(68.75%). 新生儿HBsAg阳性3例, 全部产自于HBeAg阳性母亲, 且其外周血HBeAg均阳性. 其中, 部分新生儿HBeAg的吸光度值要高于其母(表1), 配对差值t -test检验无差异(P = 0.40). 41例HBeAg阴性孕妇所产的新生儿HBsAg、HBeAg均阴性.

表1 11例HBsAg-HBeAg阳性新生儿母亲-新生儿ELISA方法吸光度值比较.
编号母亲HBsAg新生儿HBsAg母亲HBeAg新生儿HBeAg
122.4870.0970.4691.353
162.6940.0101.4441.645
252.8080.1560.6931.698
302.6620.0430.6360.927
392.4761.2020.4311.282
402.4710.0410.4130.603
442.4270.0341.3360.120
492.8250.0261.1181.169
512.3420.2000.4412.093
532.6010.0650.5520.161
642.9290.0212.7480.655
其中39、40号为双胎, 阳性界值为0.11.
2.2母亲及新生儿HBeAg阳性对乙肝病毒宫内感染的危险度分析

本次调查的57名孕妇中, HBeAg阳性孕妇15例(26.31%),发生宫内感染3例. Fishe's test精确检验显示母亲、新生儿HBeAg都是乙肝病毒宫内感染的危险因素(表2).

表2 HBeAg阳性对乙肝病毒宫内感染的危险度分析.
暴露新生儿HBsAg
合计P
阳性阴性
母亲HBeAg阳性313160.02
阴性04242
新生儿HBe阳性38110.01
阴性04747
3 讨论

本研究对新生儿股静脉血血清HBeAg和母亲血清HBeAg进行检测, 共检出16例阳性母亲, 其所产新生儿有11例HBeAg阳性. Wang et al[20]在7例HBeAg阳性母亲的新生儿静脉血检测到HBeAg, 且新生儿HBeAg滴度都低于他们的母亲, 而本次研究部分新生儿血清HBeAg吸光度值高于母亲. 本次研究发现所有发生宫内感染的新生儿其HBeAg均阳性, 且吸光度值均高于母亲. 新生儿HBeAg阳性率明显高于HBsAg阳性率, 提示HBeAg和HBsAg跨越胎盘的机制可能不同, HBeAg可能存在主动转运过程. 而已经证实发生宫内感染的3例新生儿其外周血HBeAg均阳性, 且新生儿血清HBeAg吸光度值高于母亲.

HBeAg作为病毒复制的指标同时又是高传染性的标志[21-28]. 实验室证据显示外周血HBeAg阳性与HBV DNA高度相关. 有文献对HBeAg和HBV DNA水平对新生儿宫内感染的贡献进行分析, OR值分别为17.6 (8.1-38.5, 95%CI)和41.7(21.7-80.4, 95%CI), 说明母体HBV DNA水平是新生儿持续感染更强的预测指标[29]. 但Chen et al[30]认为新生儿体内的HBeAg干扰了细胞毒性病毒清除机制. 他们用HBeAg决定多肽表位p120-131刺激HBeAg转基因雌性小鼠的子代(F1)和正常小鼠, 发现HBeAg转基因小鼠的子代小鼠抗原刺激后增生能力明显低于和正常小鼠, 提示宫内暴露于HBeAg可引起免疫耐受.

细胞毒性病毒清除机制是体内清除HBV的重要方式. HBV感染机体后会在感染的肝细胞表面表达HBc Ag. 在缺乏免疫耐受的情况下, HBc Ag特异的CTL能够对这些肝细胞进行识别、杀伤, 从而清除病毒. HBc Ag与HBeAg在一级结构上具有相似性, 在T细胞水平存在交叉识别, 宫内暴露HBeAg后, 通过活化诱导的细胞凋亡剔除HBeAg、HBc Ag特异的Th1细胞, 从而降低了HBc Ag特异性细胞毒性T细胞对HBV感染细胞的清除能力[31-33]. 这就可以从理论上来解释为什么HBeAg阳性母亲所产新生儿感染HBV慢性化程度高而所产新生儿爆发型肝炎发病率低[21-23]. 通过免疫耐受影响细胞毒性机制, 能缓解急性肝炎的肝细胞损伤, 同时也降低了病毒清除的效率. 许多研究已证实, 胎儿发育过程中如果宫内暴露于一些免疫源性物质则更容易引起免疫耐受. 因此, 可以推测, HBeAg不仅仅是高传染性的标志, 其本身也可能通过影响人类胎儿免疫系统, 从而增加感染的风险.

母亲HBeAg阳性是HBV宫内感染的重要危险因素. Xu et al[9]报告的15例宫内HBV感染的新生儿中有13例新生儿的母亲HBeAg阳性(OR = 17.07, 95%CI 1.15-25.67). 本次调查发现的3例新生儿感染个案均来自于HBeAg阳性母亲, 且这些新生儿外周血HBeAg均阳性, 说明新生儿HBeAg阳性也是HBV宫内感染的重要危险因素. 这对于今后深入研究HBeAg在HBV宫内感染过程中的作用提供必要线索[34-38].

编辑: N/A

1.  苏 勤. 乙型肝炎病毒慢性感染和肝癌发生. 世界华人消化杂志. 2003;11:791-795.  [PubMed]  [DOI]
2.  Ma CL, Fang DX, Chen HB, Li FQ, Jin HY, Li SQ, Tan WG. A mutation specific polymerase chain reaction for detecting hepatitis B virus genome mutations at nt551. World J Gastroenterol. 2003;9:509-512.  [PubMed]  [DOI]
3.  黄 晶, 高 志良. 乙型肝炎病毒基因型及其临床意义的研究. 世界华人消化杂志. 2002;10:1362-1364.  [PubMed]  [DOI]
4.  Shen LJ, Zhang HX, Zhang ZJ, Li JY, Chen MQ, Yang WB, Huang R. Detection of HBV, PCNA and GST-pi in hepatocellular carcinoma and chronic liver diseases. World J Gastroenterol. 2003;9:459-462.  [PubMed]  [DOI]
5.  Alheim M, Lazdina U, Milich DR, Sällberg M. Flow cytometric determination of cytokine production and proliferation in hepatitis B core antigen specific murine CD4 cells: lack of correlation between number of cytokine producing cells and cytokine levels in supernatant. J Immunol Methods. 2001;258:157-167.  [PubMed]  [DOI]
6.  Hu YP, Hu WJ, Zheng WC, Li JX, Dai DS, Wang XM, Zhang SZ, Yu HY, Sun W, Hao GR. Establishment of transgenic mouse harboring hepatitis B virus (adr subtype) genomes. World J Gastroenterol. 2001;7:111-114.  [PubMed]  [DOI]
7.  Lazdina U, Alheim M, Nyström J, Hultgren C, Borisova G, Sominskaya I, Pumpens P, Peterson DL, Milich DR, Sällberg M. Priming of cytotoxic T cell responses to exogenous hepatitis B virus core antigen is B cell dependent. J Gen Virol. 2003;84:139-146.  [PubMed]  [DOI]
8.  Chen M, Sällberg M, Thung SN, Hughes J, Jones J, Milich DR. Modeling the T-helper cell response in acute and chronic hepatitis B virus infection using T-cell receptor transgenic mice. Antiviral Res. 2001;52:99-111.  [PubMed]  [DOI]
9.  Xu DZ, Yan YP, Choi BC, Xu JQ, Men K, Zhang JX, Liu ZH, Wang FS. Risk factors and mechanism of transplacental transmission of hepatitis B virus: a case-control study. J Med Virol. 2002;67:20-26.  [PubMed]  [DOI]
10.  Xu DZ, Yan YP, Zou S, Choi BC, Wang S, Liu P, Bai G, Wang X, Shi M, Wang X. Role of placental tissues in the intrauterine transmission of hepatitis B virus. Am J Obstet Gynecol. 2001;185:981-987.  [PubMed]  [DOI]
11.  Shao ZJ, Xu DZ, Yan YP, Li JH, Zhang JX, Zhang ZY, Pan BR. Detection of anti-HAV antibody with dot immunogold filtration assay. World J Gastroenterol. 2003;9:1508-1511.  [PubMed]  [DOI]
12.  Ma CH, Sun WS, Tian PK, Gao LF, Liu SX, Wang XY, Zhang LN, Cao YL, Han LH, Liang XH. A novel HBV antisense RNA gene delivery system targeting hepatocellular carcinoma. World J Gastroenterol. 2003;9:463-467.  [PubMed]  [DOI]
13.  张 忠东, 成 军, 钟 彦伟, 张 树林. 乙型和丙型肝炎病毒蛋白对蛋白酪氨酸激酶信号转导的影响. 世界华人消化杂志. 2003;11:1027-1030.  [PubMed]  [DOI]
14.  Wu JS, Hwang LY, Goodman KJ, Beasley RP. Hepatitis B vaccination in high-risk infants: 10-year follow-up. J Infect Dis. 1999;179:1319-1325.  [PubMed]  [DOI]
15.  Wang FS. Current status and prospects of studies on human genetic alleles associated with hepatitis B virus infection. World J Gastroenterol. 2003;9:641-644.  [PubMed]  [DOI]
16.  郝 春秋, 聂 青和. 乙型肝炎的实验检查及其临床意义. 世界华人消化杂志. 2003;11:776-780.  [PubMed]  [DOI]
17.  Hsu CY, Chu CH, Lin SC, Yang FS, Yang TL, Chang KM. Concomitant hepatocellular adenoma and adenomatous hyperplasia in a patient without cirrhosis. World J Gastroenterol. 2003;9:627-630.  [PubMed]  [DOI]
18.  Baptista M, Kramvis A, Jammeh S, Naicker J, Galpin JS, Kew MC. Follow up of infection of chacma baboons with inoculum containing A and non-A genotypes of hepatitis B virus. World J Gastroenterol. 2003;9:731-735.  [PubMed]  [DOI]
19.  Cheng H, Zhang HZ, Shen WA, Liu YF, Ma FC. Expression of RNase H of human hepatitis B virus polymerase in Escherichia coli. World J Gastroenterol. 2003;9:513-515.  [PubMed]  [DOI]
20.  Wang JS, Zhu QR. Infection of the fetus with hepatitis B e antigen via the placenta. Lancet. 2000;355:989.  [PubMed]  [DOI]
21.  Li H, Li RC, Liao SS, Gong J, Zeng XJ, Li YP. Long-term effectiveness of infancy low-dose hepatitis B vaccine immunization in Zhuang minority area in China. World J Gastroenterol. 1999;5:122-124.  [PubMed]  [DOI]
22.  Thakur V, Kazim SN, Guptan RC, Malhotra V, Sarin SK. Molecular epidemiology and transmission of hepatitis B virus in close family contacts of HBV-related chronic liver disease patients. J Med Virol. 2003;70:520-528.  [PubMed]  [DOI]
23.  Wang FS, Xing LH, Liu MX, Zhu CL, Liu HG, Wang HF, Lei ZY. Dysfunction of peripheral blood dendritic cells from patients with chronic hepatitis B virus infection. World J Gastroenterol. 2001;7:537-541.  [PubMed]  [DOI]
24.  Yang X, Tang XP, Lei JH, Luo HY, Zhang YH. A novel stop codon mutation in HBsAg gene identified in a hepatitis B virus strain associated with cryptogenic cirrhosis. World J Gastroenterol. 2003;9:1516-1520.  [PubMed]  [DOI]
25.  Ding CL, Yao K, Zhang TT, Zhou F, Xu L, Xu JY. Generation of cytotoxic T cell against HBcAg using retrovirally transduced dendritic cells. World J Gastroenterol. 2003;9:1512-1515.  [PubMed]  [DOI]
26.  Gong WD, Liu J, Ding J, Zhao Y, Li YH, Xue CF. Inhibition of HBV targeted ribonuclease enhanced by introduction of linker. World J Gastroenterol. 2003;9:1504-1507.  [PubMed]  [DOI]
27.  Ding J, Liu J, Xue CF, Gong WD, Li YH, Zhao Y. Anti-HBV effect of TAT- HBV targeted ribonuclease. World J Gastroenterol. 2003;9:1525-1528.  [PubMed]  [DOI]
28.  Li XM, Yang YB, Hou HY, Shi ZJ, Shen HM, Teng BQ, Li AM, Shi MF, Zou L. Interruption of HBV intrauterine transmission: A clinical study. World J Gastroenterol. 2003;9:1501-1503.  [PubMed]  [DOI]
29.  Roussos A, Goritsas C, Pappas T, Spanaki M, Papadaki P, Ferti A. Prevalence of hepatitis B and C markers among refugees in Athens. World J Gastroenterol. 2003;9:993-995.  [PubMed]  [DOI]
30.  Chen M, S鋖lberg M, Thung SN, Hughes J, Milich DR. Modeling the T-helper cell response in acute and chronic hepatitis B virus infection using T-cell receptor transgenic mice. Antiviral Research. 2001;52:99-111.  [PubMed]  [DOI]
31.  Chen YD, Liu MY, Yu WL, Li JQ, Dai Q, Zhou ZQ, Tisminetzky SG. Mix-infections with different genotypes of HCV and with HCV plus other hepatitis viruses in patients with hepatitis C in China. World J Gastroenterol. 2003;9:984-992.  [PubMed]  [DOI]
32.  Wu CH, Ouyang EC, Walton C, Promrat K, Forouhar F, Wu GY. Hepatitis B virus infection of transplanted human hepatocytes causes a biochemical and histological hepatitis in immunocopetentent rats. World J Gastroenterol. 2003;9:978-983.  [PubMed]  [DOI]
33.  Jeon MJ, Shin JH, Suh SP, Lim YC, Ryang DW. TT virus and hepatitis G virus infections in Korean blood donors and patients with chronic liver disease. World J Gastroenterol. 2003;9:741-744.  [PubMed]  [DOI]
34.  Huang JM, Huang TH, Qiu HY, Fang XW, Zhuang TG, Liu HX, Wang YH, Deng LZ, Qiu JW. Effects of hepatitis B virus infection on human sperm chromosomes. World J Gastroenterol. 2003;9:736-740.  [PubMed]  [DOI]
35.  Jaboli MF, Fabbri C, Liva S, Azzaroli F, Nigro G, Giovanelli S, Ferrara F, Miracolo A, Marchetto S, Montagnani M. Long-term alpha interferon and lamivudine combination therapy in non-responder patients with anti-HBe-positive chronic hepatitis B: Results of an open, controlled trial. World J Gastroenterol. 2003;9:1491-1495.  [PubMed]  [DOI]
36.  Garcia JM, Marugan RB, Garcia GM, Lindeman ML, Abete JF, Terron SD. TT virus infection in patients with chronic hepatitis B and response of TTV to lamivudine. World J Gastroenterol. 2003;9:1261-1264.  [PubMed]  [DOI]
37.  Zheng SJ, Zhong S, Zhang JJ, Chen F, Ren H, Deng CL. Distribution and anti-HBV effects of antisense oligodeoxynu-cleotides conjugated to galactosylated poly-L-lysine. World J Gastroenterol. 2003;9:1251-1255.  [PubMed]  [DOI]
38.  Gao Y, Ma Y, Li M, Cheng T, Li SW, Zhang J, Xia NS. Oral immunization of animals with transgenic cherry tomatillo expressing HBsAg. World J Gastroenterol. 2003;9:996-1002.  [PubMed]  [DOI]