述评 Open Access
Copyright ©The Author(s) 2003. Published by Baishideng Publishing Group Inc. All rights reserved.
世界华人消化杂志. 2003-11-15; 11(11): 1670-1673
在线出版日期: 2003-11-15. doi: 10.11569/wcjd.v11.i11.1670
轮状病毒致病机制研究进展
王大燕, 王健伟, 于修平, 洪涛
王大燕, 王健伟, 洪涛, 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所 北京市 100052
王大燕, 于修平, 山东大学医学院 山东省济南市 250012
基金项目: 国家自然科学基金资助项目, No. 30000145; 国家"八六三"计划生物和现代农业技术领域资助项目, No. 2001AA; 215011, No. 2002AA206641.
通讯作者: 王健伟, 100052, 北京市, 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所. wangjw28@vip.sina.com
电话: 010-63578244
收稿日期: 2003-03-06
修回日期: 2003-04-30
接受日期: 2003-05-21
在线出版日期: 2003-11-15

轮状病毒是婴幼儿腹泻的主要病原, 主要感染位于小肠绒毛中部和上部的成熟肠上皮细胞, 导致腹泻. 轮状病毒腹泻不是单一机制引起的, 腹泻可以看作是病毒扩散和生存的方式, 病毒通过引发腹泻而得以复制和扩散, 同时腹泻也是宿主的黏膜防御机制, 激活机体内源性机制以从肠道清除病毒感染. 近年来研究发现轮状病毒的非结构蛋白NSP4在病毒的致病性中发挥着重要作用, 被认为是病毒的肠毒素, 能够从内质网转运Ca2+来增加细胞内Ca2+浓度, 促进氯离子分泌及增加胞质膜的通透性. 宿主的肠道神经系统受到刺激后也能够促进肠液的分泌, 引发腹泻. 本文从病毒和宿主两个方面对轮状病毒的致病机制加以综述.轮状病毒腹泻的防治及疫苗研制均有赖于病毒致病机制的阐明.

关键词: N/A
引文著录: 王大燕, 王健伟, 于修平, 洪涛. 轮状病毒致病机制研究进展. 世界华人消化杂志 2003; 11(11): 1670-1673
N/A
N/A
Corresponding author: N/A
Received: March 6, 2003
Revised: April 30, 2003
Accepted: May 21, 2003
Published online: November 15, 2003

N/A

Key Words: N/A
0 引言

轮状病毒(Rotavirus, RV)1973年由澳大利亚科学家Bishop首次发现, 根据抗原性的不同分为7个组(A-G), 并进一步可分为不同的G、P血清型[1-4]. A、B、C组RV同时感染人和动物, 而D-G组只感染动物. 在感染人类的三组轮状病毒中, B组主要感染青壮年, 呈大规模暴发流行, 因此又被称为成人腹泻轮状病毒(ADRV), 由我国洪涛et al [5-7]于1983年首次发现, 因为已弄清其水源暴发流行规律, 无需疫苗. C组只在青少年中偶有流行, 不构成威胁. A组RV是全世界婴幼儿严重腹泻的最主要病因, 在发展中国家引起的儿童严重腹泻约占腹泻住院病例的1/3, 每年引起2岁以下儿童死亡的人数达87.3万, 占儿童总死亡率的6% [8]. 对轮状病毒的致病机制研究近年来取得了较大进展, 但是也仍然存在很多尚未解决的环节.

1 RV侵入肠上皮细胞的机制

RV感染位于小肠绒毛中部和上部的成熟肠上皮细胞, 最终导致腹泻. 最近的研究显示RV最先与唾液酸受体相互作用, 继而与一不依赖于唾液酸的受体相互作用[9-11]. 有人曾推测受体可能是脂质微区(lipid microdomains)的一部分, 能识别整合素[12-16], 综合这一点及其他的研究资料, 提出了两种关于RV进入靶细胞的机制: (1)通过直接或融合进入[17]; (2)通过Ca2+依赖的内吞作用[18]. 后者似乎更有说服力, 因为感染性的RV内吞进入时导致了从内吞小体(vesicles)向胞质的Ca2+流, 而胞质原来的Ca2+浓度是极低的. 一旦内吞小体中Ca2+浓度与胞质Ca2+浓度相同而达到平衡, 则低于使病毒外壳蛋白稳定所需要的Ca2+浓度, 病毒失去其外壳蛋白, 随着内吞小泡膜的溶解而进入胞质[19,20].

2 RV致腹泻的机制

RV腹泻的机制可以从两个方面理解: (1)RV腹泻可以看作是病毒扩散和生存的方式, 病毒通过与宿主相互作用引发腹泻; (2)RV腹泻是宿主的黏膜防御机制, 激活内源性机制以从肠道清除其感染.

2.1病毒直接介导的腹泻-RV肠毒素与腹泻

Ball et al [21]发现新生小鼠腹腔注射猴RV SA11株非结构蛋白NSP4可致腹泻, 这导致了对NSP4是否是肠毒素的研究[22-24]. NSP4是内质网特异性跨膜糖蛋白[25], 是目前已知惟一能引起Ca2+转运的RV蛋白. NSP4主要通过从内质网转运Ca2+来增加细胞内Ca2+浓度[19,26,27], 而进一步的研究发现NSP4可增加胞质膜的通透性, 导致诸如乳酸脱氢酶泄漏[28,29]. SA11株NSP4 C端的22个氨基酸的肽(NSP4114-135)也能引发腹泻, 但是96-135氨基酸之外的区域则不能引发腹泻. NSP4引起的腹泻类似于毒力株RV, 但是持续时间较短. 在小鼠, 通过检测细胞内Ca2+浓度及观察腹泻发生, 发现aa131-140的突变似乎对毒力改变特别重要[30].

最近从猴轮状病毒SA11株和猪OSU株感染细胞早期培养液中可以检测到C末端活性区的一7 KD的肽(aa112-175), 他经过非经典的不依赖于高尔基体的途径释放[31]. 细胞外NSP4可以与胞膜相互作用而发挥作用[32]. 重组NSP4蛋白的研究表明这一细胞内生成释放到细胞外的肽与目前未知的膜受体结合, 通过PLC信号途径促进Ca2+转运, 并且选择性的刺激Ca2+浓度敏感的卤化物进入新生小鼠的小肠和结肠细胞. Ca2+的转运与年龄无关, 但腹泻的发生又是年龄依赖的, 因而认为腹泻的发生是通过引发年龄依赖的Ca2+敏感的鲁米那阴离子通道导致的.

NSP4作为第一个病毒肠毒素, 其介导的Ca2+信号传导还只是其功能的冰山一角. 原位杂交发现NSP4在RV感染24 h后在细胞内表达最多, 在这期间持续Ca2+转运的病理生理影响可以解释许多RV感染后的细胞反应.伴随着病毒导致的内源性宿主蛋白合成的减少, Ca2+转运将影响宿主的一系列[Ca2+]i敏感的酶和转运蛋白等. 现在认为在RV感染期间顶端水解酶的极化指数降低[33]及糖吸收的改变[34,35]是由于[Ca2+]i 和G蛋白敏感的细胞内囊泡转运及蛋白折叠的抑制[36,37]造成的. 最近的证据进一步证明NSP4可以直接抑制细胞Na+依赖的葡萄糖转运蛋白SGLT-4[34]. 细胞外和/或细胞内的NSP4可以进一步通过改变细胞内肌动蛋白的分布及影响细胞间通透性改变来发挥致病作用[38-41].

另一个最新的主要发现是基于对NSP495-137晶体结构的研究结果[42], 这一区域包含内毒素活性区(aa114-135). 研究发现这一区段NSP4可以形成一个同源四聚体孔道, 从而推测可以扩大细胞内质网膜并可作为Ca2+通道. 当然, 还没有关于这一推测的直接证据. 不过, 这一孔道的亲水性内表面含有一个金属(Ca2+)结合区域[42]; 内源性表达的NSP4尽管没有改变胞质膜二价阳离子的通透性, 但可以导致非PLC依赖的ER膜Ca2+释放, 细胞内NSP4可以增强细胞外NSP4的肠毒素作用或者其本身在感染的较晚期促进腹泻发生.

也有报道表明NSP4并不是RV腹泻的关键性致病因素, Angel et al [43]指出NSP4 的131-140位氨基酸高度变异, 并且发现在小鼠, NSP4的氨基酸序列与毒力无相关性, 有人在HRV的研究中也观察到相似的现象[44-48]. 目前对NSP4的基因特征已进行了比较深入的研究[49,50], 但对NSP4的变异与致病性改变的关系还有待进一步阐明.

2.2 宿主介导的继发性腹泻-肠道神经系统与腹泻

胃肠道受肠神经系统(enteric nervous system, ENS)控制. 对霍乱毒素(cholera toxin, CT)的研究表明, 至少60%的肠液分泌反应是由于刺激了ENS引起的[51]. CT的实验促使人们联想RV产生的肠液分泌是否也是由于激活了ENS 而导致的？为了验证这一点, 人们进行了一系列实验[52,53], 表明: (1)河豚毒素(神经阳离子通道抑制剂), 利多卡因(局麻剂) 和美加明 (尼古丁受体阻断剂)可阻断由RV引起的肠电位差增加. (2)河豚毒素, 利多卡因和六甲双胺可使体外培养的肠段的肠腔面电位差降低, 并可以使感染病毒的肠腔面由分泌转为吸收, 数据分析显示分泌的液体至少2/3是由ENS促分泌神经反射弧引起的. (3)给RV感染的小鼠反复腹腔注射利多卡因可以阻止腹泻发生, 提示在动物整体水平与器官水平的一致性. 总之, 对新生小鼠RV肠炎的研究表明, 部分分泌反应是由于ENS激活引起的. ENS的参与可以解释为什么只有少数绒毛顶端细胞被病毒感染就可以引起肠隐窝细胞水电解质分泌的大量增加.

关于ENS在RV腹泻中作用的许多方面的细节还有待阐明. 一个重要问题是病毒如何激活ENS. 细菌肠毒素可通过影响细胞内第二信使导致肠上皮的内分泌细胞释放胺/肽, 进而激活位于肠上皮下的神经树突, RV的肠毒素NSP4可能通过引起细胞内Ca2+浓度升高而发挥类似的功能. 当然其他的机制也可能解释RV如何激活ENS: 现在认为正常的上皮细胞是微生物感染的传感器, 当接触到细菌或病毒时, 细胞释放大量的生物活性物质, 如细胞因子, 前列腺素及NO[54-61]. 在神经元上有这些物质的受体, 从而可能导致树突膜去极化引发动作电位[62-64]. 实际上, 由化学因子激活肠神经元还可以解释为什么RV仅引起15 d以下的小鼠腹泻, 因为已经证明只有出生2 wk内的小鼠的肠上皮细胞释放这些化学因子[58].

总之, ENS的参与可能增强了NSP4引起的初期腹泻, 可以看作是宿主清除病毒的自我保护防御机制.

总之, RV引发的腹泻不是单一机制引起的. 从病毒方面而言, NSP4是一个因素, 不过NSP4如何作用于肠隐窝细胞还有待证明, 在体内从肠腔到达似乎不可能, 因为NSP4扩散需要对抗隐窝细胞的分泌流; 从宿主方面而言, 刺激ENS 是引起分泌增加的方式, 但ENS的激活机制还不是很清楚, NSP4可能间接参与了这一过程, 可能通过影响细胞内Ca2+水平导致绒毛内分泌细胞释放胺/肽, 从而刺激了ENS, 同时必然还有其他许多由上皮细胞或免疫细胞释放的生物活性分子参与了ENS的激活. RV致泻机制的许多未知环节有待进一步研究.

1.  Hoshino Y, Kapikian AZ. Rotavirus serotypes: classification and importance in epidemiology, immunity, and vaccine development. J Health Popul Nutr. 2000;18:5-14.  [PubMed]  [DOI]
2.  Jain V, Das BK, Bhan MK, Glass RI, Gentsch JR. Great diversity of group A rotavirus strains and high prevalence of mixed rotavirus infections in India. J Clin Microbiol. 2001;39:3524-3529.  [PubMed]  [DOI]
3.  Sen A, Kobayashi N, Das S, Krishnan T, Bhattacharya SK, Urasawa S, Naik TN. Amplification of various genes of human roup B rotavirus from stool specimens by RT-PCR. J Clin Virol. 2000;17:177-181.  [PubMed]  [DOI]
4.  Jiang B, Saif LJ, Gentsch JR, Glass RI. Completion of the four large gene sequences of porcine group C Cowden rotavirus. Virus Genes. 2000;20:193-194.  [PubMed]  [DOI]
5.  Hung T, Chen GM, Wang CG, Yao HL, Fang ZY, Chao TX, Chou ZY, Ye W, Chang XJ, Den SS. Waterborne outbreak of rotavirus diarrhoea in adults in China caused by a novel rotavirus. Lancet. 1984;1:1139-1142.  [PubMed]  [DOI]
6.  Chen GM, Hung T, Mackow ER. cDNA cloning of each genomic segment of the group B rotavirus ADRV: molecular haracterization of the 11th RNA segment. Virology. 1990;175:605-609.  [PubMed]  [DOI]
7.  Mackow ER, Fay ME, Werner-Eckert R, Hung T, Wang ZJ, Chen G. Baculovirus expression of the ADRV gene 5 encoded rotein produces an oligomerized, antigenic, and immunogenic VP6 protein. Virology. 1993;193:537-542.  [PubMed]  [DOI]
8.  Glass RI, Kilgore PE, Holman RC, Jin S, Smith JC, Woods PA, Clarke MJ, Ho MS, Gentsch JR. The epidemiology of rotavirus diarrhea in the United States: surveillance and estimates of disease burden. J Infect Dis. 1996;174:S5-S11.  [PubMed]  [DOI]
9.  Jolly CL, Beisner BM, Ozser E, Holmes IH. Non-lytic extraction and characterisation of receptors for multiple strains of rotavirus. Virology. 2000;275:89-97.  [PubMed]  [DOI]
10.  Jolly CL, Huang JA, Holmes IH. Selection of rotavirus VP4 cell receptor binding domains for MA104 cells using a phage isplay library. J Virol Methods. 2001;98:41-51.  [PubMed]  [DOI]
11.  Jolly CL, Beisner BM, Holmes IH. Rotavirus infection of MA104 cells is inhibited by Ricinus lectin and separately expressed single binding domains. Virology. 2000;275:89-97.  [PubMed]  [DOI]
12.  Zarate S, Espinosa R, Romero P, Guerrero CA, Arias CF, Lopez S. Integrin alpha2beta1 mediates the cell attachment of the rotavirus neuraminidase-resistant variant nar3. Virology. 2000;278:50-54.  [PubMed]  [DOI]
13.  Guerrero CA, Mendez E, Zarate S, Isa P, Lopez S, Arias CF. Integrin alpha(v)beta(3) mediates rotavirus cell entry. Proc Natl Acad Sci USA. 2000;97:14644-14649.  [PubMed]  [DOI]
14.  Arias CF, Guerrero CA, Mendez E, Zarate S, Isa P, Espinosa R, Romero P, Lopez S. Early events of rotavirus infection: the search for the receptor(s). Novartis Found Symp. 2001;238:47-60.  [PubMed]  [DOI]
15.  Arias CF, Isa P, Guerrero CA, Mendez E, Zarate S, Lopez T, Espinosa R, Romero P, Lopez S. Molecular biology of rotavirus cell entry. Arch Med Res. 2002;33:356-361.  [PubMed]  [DOI]
16.  Guerrero CA, Zarate S, Corkidi G, Lopez S, Arias CF. Biochemical characterization of rotavirus receptors in MA104 cells. J Virol. 2000;74:9362-9371.  [PubMed]  [DOI]
17.  Kaljot KT, Shaw RD, Rubin DH, Greenberg HB. Infectious rotavirus enters cells by direct cell membrane penetration, not by endocytosis. J Virol. 1988;62:1136-1144.  [PubMed]  [DOI]
18.  Chemello ME, Aristimuno OC, Michelangeli F, Ruiz MC. Requirement for vacuolar H+ -ATPase activity and Ca2+ gradient uring entry of rotavirus into MA104 cells. J Virol. 2002;76:13083-13087.  [PubMed]  [DOI]
19.  Ruiz MC, Cohen J, Michelangeli F. Role of Ca2+in the replication and pathogenesis of rotavirus and other viral infections. Cell Calcium. 2000;28:137-149.  [PubMed]  [DOI]
20.  Estes MK, Kang G, Zeng CQ, Crawford SE, Ciarlet M. Pathogenesis of rotavirus gastroenteritis. Novartis Found Symp. 2001;238:82-96.  [PubMed]  [DOI]
21.  Ball JM, Tian P, Zeng CQ, Morris AP, Estes MK. Age-dependent diarrhea induced by a rotaviral nonstructural glycoprotein. Science. 1996;272:101-104.  [PubMed]  [DOI]
22.  Sasaki S, Horie Y, Nakagomi T, Oseto M, Nakagomi O. Group C rotavirus NSP4 induces diarrhea in neonatal mice. Arch Virol. 2001;146:801-806.  [PubMed]  [DOI]
23.  Mori Y, Borgan MA, Ito N, Sugiyama M, Minamoto N. Diarrhea-inducing activity of avian rotavirus NSP4 glycoproteins, which differ greatly from mammalian rotavirus NSP4 glycoproteins in deduced amino acid sequence in suckling mice. J Virol. 2002;76:5829-5834.  [PubMed]  [DOI]
24.  Horie Y, Nakagomi O, Koshimura Y, Nakagomi T, Suzuki Y, Oka T, Sasaki S, Matsuda Y, Watanabe S. Diarrhea induction by rotavirus NSP4 in the homologous mouse model system. Virology. 1999;262:398-407.  [PubMed]  [DOI]
25.  Mirazimi A, Magnusson KE, Svensson L. A cytoplasmic region of the NSP4 enterotoxin of rotavirus is involved in retention in the endoplasmic reticulum. J Gen Virol. 2003;84:875-883.  [PubMed]  [DOI]
26.  Tian P, Estes MK, Hu Y, Ball JM, Zeng CQ, Schilling WP. The rotavirus nonstructural glycoprotein NSP4 mobilizes Ca2+ from the endoplasmic reticulum. J Virol. 1995;69:5763-5772.  [PubMed]  [DOI]
27.  Dong Y, Zeng CQ, Ball JM, Estes MK, Morris AP. The rotavirus enterotoxin NSP4 mobilizes intracellular calcium in human intestinal cells by stimulating phospholipase C-mediated inositol 1, 4, 5-trisphosphate production. Proc Natl Acad Sci USA. 1997;94:3960-3965.  [PubMed]  [DOI]
28.  Tian P, Ball JM, Zeng CQ, Estes MK. The rotavirus nonstructural glycoprotein NSP4 possesses membrane destabilization activity. J Virol. 1996;70:6973-6981.  [PubMed]  [DOI]
29.  Browne EP, Bellamy AR, Taylor JA. Membrane-destabilizing activity of rotavirus NSP4 is mediated by a membrane-proximal amphipathic domain. J Gen Virol. 2000;81:1955-1959.  [PubMed]  [DOI]
30.  Zhang M, Zeng CQ, Dong Y, Ball JM, Saif LJ, Morris AP, Estes MK. Mutations in rotavirus nonstructural glycoprotein NSP4 are associated with altered virus virulence. J Virol. 1998;72:3666-3672.  [PubMed]  [DOI]
31.  Zhang M, Zeng CQ, Morris AP, Estes MK. A functional NSP4 enterotoxin peptide secreted from rotavirus-infected cells. J Virol. 2000;74:11663-11670.  [PubMed]  [DOI]
32.  Huang H, Schroeder F, Zeng C, Estes MK, Schoer JK, Ball JM. Membrane interactions of a novel viral enterotoxin: rotavirus nonstructural glycoprotein NSP4. Biochemistry. 2001;40:4169-4180.  [PubMed]  [DOI]
33.  Jourdan N, Brunet JP, Sapin C, Blais A, Cotte-Laffitte J, Forestier F, Quero AM, Trugnan G, Servin AL. Rotavirus infection reduces sucrase-isomaltase expression in human intestinal epithelial cells by perturbing protein targeting and organization of microvillar cytoskeleton. J Virol. 1998;72:7228-7236.  [PubMed]  [DOI]
34.  Halaihel N, Lievin V, Ball JM, Estes MK, Alvarado F, Vasseur M. Direct inhibitory effect of rotavirus NSP4(114-135) peptide on the Na(+)-D-glucose symporter of rabbit intestinal brush border membrane. J Virol. 2000;74:9464-9470.  [PubMed]  [DOI]
35.  Halaihel N, Lievin V, Alvarado F, Vasseur M. Rotavirus infection impairs intestinal brush-border membrane Na(+)-solute cotransport activities in young rabbits. Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol. 2000;279:G587-G596.  [PubMed]  [DOI]
36.  Ashby MC, Tepikin AV. ER calcium and the functions of intracellular organelles. Semin Cell Dev Biol. 2001;12:11-17.  [PubMed]  [DOI]
37.  Corbett EF, Michalak M. Calcium, a signaling molecule in the endoplasmic reticulum? Trends Biochem Sci. 2000;25:307-311.  [PubMed]  [DOI]
38.  Brunet JP, Cotte-Laffitte J, Linxe C, Quero AM, Geniteau-Legendre M, Servin A. Rotavirus infection induces an increase in intracellular calcium concentration in human intestinal epithelial cells: role in microvillar actin alteration. J Virol. 2000;74:2323-2332.  [PubMed]  [DOI]
39.  Ma TY, Tran D, Hoa N, Nguyen D, Merryfield M, Tarnawski A. Mechanism of extracellular calcium regulation of intestinal epithelial tight junction permeability: role of cytoskeletal involvement. Microsc Res Tech. 2000;51:156-168.  [PubMed]  [DOI]
40.  Obert G, Peiffer I, Servin AL. Rotavirus-induced structural and functional alterations in tight junctions of polarized intestinal Caco-2 cell monolayers. J Virol. 2000;74:4645-4651.  [PubMed]  [DOI]
41.  Dickman KG, Hempson SJ, Anderson J, Lippe S, Zhao L, Burakoff R, Shaw RD. Rotavirus alters paracellular permeability and energy metabolism in Caco-2 cells. Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol. 2000;279:G757-G766.  [PubMed]  [DOI]
42.  Bowman GD, Nodelman IM, Levy O, Lin SL, Tian P, Zamb TJ, Udem SA, Venkataraghavan B, Schutt CE. Crystal structure of the oligomerization domain of NSP4 from rotavirus reveals a core metal-binding site. J Mol Biol. 2000;304:861-871.  [PubMed]  [DOI]
43.  Angel J, Tang B, Feng N, Greenberg HB, Bass D. Studies of the role for NSP4 in the pathogenesis of homologous murine rotavirus diarrhea. J Infect Dis. 1998;177:455-458.  [PubMed]  [DOI]
44.  Horie Y, Masamune O, Nakagomi O. Three major alleles of rotavirus NSP4 proteins identified by sequence analysis. J Gen Virol. 1997;78:2341-2346.  [PubMed]  [DOI]
45.  Mori Y, Borgan MA, Ito N, Sugiyama M, Minamoto N. Sequential analysis of nonstructural protein NSP4s derived from Group A avian rotaviruses. Virus Res. 2002;89:145-151.  [PubMed]  [DOI]
46.  Mohan KV, Kulkarni S, Glass RI, Zhisheng B, Atreya CD. A human vaccine strain of lamb rotavirus (Chinese) NSP4 gene: complete nucleotide sequence and phylogenetic analyses. Virus Genes. 2003;26:185-192.  [PubMed]  [DOI]
47.  Ciarlet M, Liprandi F, Conner ME, Estes MK. Species specificity and interspecies relatedness of NSP4 genetic groups by comparative NSP4 sequence analyses of animal rotaviruses. Arch Virol. 2000;145:371-383.  [PubMed]  [DOI]
48.  Lee CN, Wang YL, Kao CL, Zao CL, Lee CY, Chen HN. NSP4 gene analysis of rotaviruses recovered from infected children with and without diarrhea. J Clin Microbiol. 2000;38:4471-4477.  [PubMed]  [DOI]
49.  Tian P, Ottaiano A, Reilly PA, Udem S, Zamb T. The authentic sequence of rotavirus SA11 nonstructural protein NSP4. Virus Res. 2000;66:117-122.  [PubMed]  [DOI]
50.  Kirkwood CD, Gentsch JR, Glass RI. Sequence analysis of the NSP4 gene from human rotavirus strains isolated in the United States. Virus Genes. 1999;19:113-122.  [PubMed]  [DOI]
51.  Jaup EA, Timar Peregrin A, Jodal M, Lundgren O. Nervous control of alkaline secretion in the duodenum as studied by the use of cholera toxin in the anaesthetized rat. Acta Physiol Scand. 1998;162:165-174.  [PubMed]  [DOI]
52.  Lundgren O, Peregrin AT, Persson K, Kordasti S, Uhnoo I, Svensson L. Role of the enteric nervous system in the fluid and electrolyte secretion of rotavirus diarrhea. Science. 2000;287:491-495.  [PubMed]  [DOI]
53.  Lundgren O, Jodal M. The enteric nervous system and cholera toxin-induced secretion. Comp Biochem Physiol A Physiol. 1997;118:319-327.  [PubMed]  [DOI]
54.  Kagnoff MF, Eckmann L. Epithelial cells as sensors for microbial infection. J Clin Invest. 1997;100:6-10.  [PubMed]  [DOI]
55.  Sansonetti P. Host-pathogen interactions: the seduction of molecular cross talk. Gut. 2002;50:III2-III8.  [PubMed]  [DOI]
56.  Neish AS. The gut microflora and intestinal epithelial cells: a continuing dialogue. Microbes Infect. 2002;4:309-317.  [PubMed]  [DOI]
57.  Philpott DJ, Girardin SE, Sansonetti PJ. Innate immune responses of epithelial cells following infection with bacterial pathogens. Curr Opin Immunol. 2001;13:410-416.  [PubMed]  [DOI]
58.  Rollo EE, Kumar KP, Reich NC, Cohen J, Angel J, Greenberg HB, Sheth R, Anderson J, Oh B, Hempson SJ, Mackow ER, Shaw RD. The epithelial cell response to rotavirus infection. J Immunol. 1999;163:4442-4452.  [PubMed]  [DOI]
59.  Casola A, Garofalo RP, Crawford SE, Estes MK, Mercurio F, Crowe SE, Brasier AR. Interleukin-8 gene regulation in intestinal epithelial cells infected with rotavirus: role of viral-induced IkappaB kinase activation. Virology. 2002;298:8-19.  [PubMed]  [DOI]
60.  Kim J, Sanders SP, Siekierski ES, Casolaro V, Proud D. Role of NF-kappa B in cytokine production induced from human airway epithelial cells by rhinovirus infection. J Immunol. 2000;165:3384-3392.  [PubMed]  [DOI]
61.  Sugawara T, Yamabe H, Osawa H, Kaizuka M, Shirato K, Nakamura M, Tamura M, Okumura K. Tissue factor pathway inhibitor production by human proximal tubular epithelial cells in culture. Thromb Res. 2003;110:141-147.  [PubMed]  [DOI]
62.  Kirkup AJ, Brunsden AM, Grundy D. Receptors and transmission in the brain-gut axis: potential for novel therapies. I. Receptors on visceral afferents. Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol. 2001;280:G787-G794.  [PubMed]  [DOI]
63.  Booth CE, Kirkup AJ, Hicks GA, Humphrey PP, Grundy D. Somatostatin sst(2) receptor-mediated inhibition of mesenteric afferent nerves of the jejunum in the anesthetized rat. Gastroenterology. 2001;121:358-369.  [PubMed]  [DOI]
64.  Kirkup AJ, Booth CE, Chessell IP, Humphrey PP, Grundy D. Excitatory effect of P2X receptor activation on mesenteric afferent nerves in the anaesthetised rat. J Physiol. 1999;520:551-563.  [PubMed]  [DOI]