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世界华人消化杂志. 2003-01-15; 11(1): 90-91
在线出版日期: 2003-01-15. doi: 10.11569/wcjd.v11.i1.90
食管癌及其癌前病变组织p16蛋白表达的研究
王立峰, 张丽红, 刘明, 张伟, 王吾如, 王洪平, 刘伯齐, 金玉生, 靳玉兰, 韩志楷, 曲平, 刘义, 丁镇伟, 林培中
王立峰, 王吾如, 哈尔滨医科大学第一临床医学院病理科 黑龙江省哈尔滨市 150001
张丽红, 哈尔滨医科大学第一临床医学院放射科 黑龙江省哈尔滨市 150001
刘明, 哈尔滨医科大学第三临床医学院腹外科 黑龙江省哈尔滨市 150040
张伟, 王洪平, 刘伯齐, 金玉生, 靳玉兰, 韩志楷, 曲平, 刘义, 丁镇伟, 林培中, 中国医学科学院肿瘤研究所 北京市 100021
基金项目: 国家九五攻关项目资助课题, No. 96-906-01-02; 国家自然基金资助课题, No. 39870838.
通讯作者: 张伟, 100021, 北京市朝阳区潘家园, 中国医学科学院肿瘤研究所. zhangwe@public.bta.net.cn
收稿日期: 2002-10-08
修回日期: 2002-10-15
接受日期: 2002-10-21
在线出版日期: 2003-01-15

目的: 探讨p16蛋白表达与食管癌发生发展的关系.

方法: 应用免疫组织化学方法检测了79例食管癌(原位癌30例, 浸润性鳞状细胞癌19例, 腺癌30例)及其116例增生性病变(单纯增生30例, 不典型增生轻31例、中31例、重24例)和28例正常食管黏膜上皮组织中p16蛋白表达情况.

结果: p16蛋白表达的阳性率分别为侵袭性鳞状细胞癌21.1%(4/19)、原位癌50%(15/30)、重度不典型增生83.3%(20/24)、中度不典型增生64.5%(20/31)、轻度不典型增生67.7%(20/31)、单纯增生80%(24/30)、正常组织60.7%(17/28).

结论: p16蛋白表达的缺失可能与食管癌的发生发展有关.

关键词: N/A

引文著录: 王立峰, 张丽红, 刘明, 张伟, 王吾如, 王洪平, 刘伯齐, 金玉生, 靳玉兰, 韩志楷, 曲平, 刘义, 丁镇伟, 林培中. 食管癌及其癌前病变组织p16蛋白表达的研究. 世界华人消化杂志 2003; 11(1): 90-91
N/A
N/A
Correspondence to: N/A
Received: October 8, 2002
Revised: October 15, 2002
Accepted: October 21, 2002
Published online: January 15, 2003

N/A

Key Words: N/A


0 引言

研究表明, 在多种细胞系和实体瘤中存在p16蛋白的缺失, 提示p16可能与多种肿瘤的发生、发展有关[1]. 为探讨p16蛋白在食管癌发生、发展中的作用及其表达的改变, 我们对218例食管内窥镜活检组织和5例食管癌手术后切除的标本, 包括正常食管黏膜、单纯增生、不典型增生食管上皮、原位癌和侵袭癌组织中p16蛋白的表达情况进行了研究.

1 材料和方法
1.1 材料

河北磁县1997年食管癌普查中患者的活检组织203例. 经病理诊断: 侵袭性鳞状细胞癌19例, 腺癌10例, 原位癌30例, 重、中、轻度不典型增生分别为24例、31例、31例, 单纯性增生30例, 正常食管鳞状上皮28例; 哈医大一院1997/1998年食管腺癌20例, 其中活检组织15例, 食管癌术后切除标本5例. 抗p16蛋白的单克隆抗体(鼠)sc-1661为Santa Cruz Biotechnology, Inc. 产品, 工作浓度为1: 50; SP-Streptavidin/Peroxidase kit 由北京中山生物技术有限公司提供.

1.2 方法

辣根过氧化酶标记的SP法. 即: 石蜡切片常规脱蜡至水, 30% ml/L过氧化氢-甲醇封闭5 min, PBS(pH7.2)漂洗后置柠檬酸(pH6.0)中, 微波炉抗原修复10 min, PBS漂洗后依次滴加一抗4 ℃过夜, 二抗37℃ 15 min, 辣根酶标记的链霉卵白素工作液15 min及显色底物, 于显微镜监视下显色, 自来水充分冲洗终止反应, 苏木素复染, 脱水, 透明, 封片. >10%的病变细胞的细胞核出现棕黄色颗粒定为阳性. 设有阳性和阴性对照(以PBS代替一抗为阴性对照)

统计学处理 x2检验.

2 结果

各组病变的食管组织p16蛋白免疫组化染色结果见表1.

表1 各组病变食管组织p16蛋白免疫组化染色结果.
组织学类型n+-阳性率(%)
正常组28171160.7
单纯增生3024680
不典型增生
轻度31211067.7
中度31201164.5
重度2420483.3
原位癌30151550
侵袭癌1941521.1

经x2检验, 正常组与侵袭性鳞状细胞癌组、重度不典型增生与侵袭性鳞状细胞癌组p16蛋白的表达有显著性差别(P<0.01), 其他各二组p16蛋白的表达无显著性差别(P>0.01).

对30例食管腺癌p16蛋白免疫组化染色的结果显示: 12例腺癌细胞胞质呈现棕黄色颗粒.

3 讨论

研究认为, 肿瘤发生的根本原因在于基因组的不稳定性, 细胞周期G1→S和G2→M期这两个"关卡"的失控, 有可能使本来应停止增生或生理性DNA受损或DNA复制发生错误的细胞不停地进入细胞周期, 造成细胞恶性增生, 细胞周期调节失控是癌变的重要原因. p16蛋白能使细胞阻滞于G1期, 对细胞周期进行有序调控, 确保基因组DNA的稳定性. p16的缺失或失活都有可能促使细胞癌变, 导致肿瘤的发生发展和恶化[2-6].

自Kamb et al[3]发现p16基因位于9p21以来, 许多实验和多种人类肿瘤的研究证实存在p16基因的异常表达和缺失[7-10]. 用p16转染有p16缺失的肿瘤细胞株, 肿瘤细胞的生长受到抑制[11].

本研究结果发现: p16蛋白在正常食管黏膜鳞状上皮中表达为散在弱阳性, 在单纯增生和不典型增生中p16蛋白表达多为散在阳性和强阳性, 即表达强度逐渐增加; 但在侵袭性鳞癌中表达强度减弱或呈现阴性. 这说明鳞状上皮发生增生性改变时, p16蛋白的表达也随之发生变化. 由此可见, p16蛋白对细胞增生起着重要的抑制作用, 而这种抑制作用的减弱, 最终导致细胞发生癌变. p16蛋白缺失可能是食管不典型增生向食管鳞状细胞癌过渡的重要环节. 在食管腺癌中, p16的阳性表达出现在细胞质, 且阳性表达的肿瘤细胞多分化不好, 这可能由于p16蛋白在细胞质的积聚和肿瘤的分化程度有关, 而与p16基因的改变无关. 因此开展对p16基因的研究, 对揭示肿瘤的发生发展规律有重要意义.

编辑: N/A

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