华支睾吸虫卵的形态变化、存活状况与胆囊结石形成的关系

图1 光学显微镜下, 胆囊胆汁、胆囊胆泥和胆囊结石中的正常及变形的华支睾吸虫虫卵(Mag×400). A, B: 胆汁中的正常形态虫卵; C: 胆汁中的椭圆形虫卵; D: 胆汁中的表面吸附颗粒物质的虫卵; E: 胆汁中长度变短、表面及一端吸附胆红素和颗粒物的虫卵; F: 胆泥中形态较正常的虫卵, 但卵内毛蚴已看不清; G-I: 胆泥中的虫卵, 表面及四周黏附黏液和胆红素; J: 胆泥中虫卵, 卵盖丢失并黏附胆红素和黏液; K: 结石中的虫卵, 表面和周边吸附胆红素和黏液; L: 结石中卵盖即将分离的虫卵; M: 结石中固化的虫卵, 成半透明状; N: 结石中被胆红素和黏液完全包裹的虫卵; O: 结石中的虫卵, 卵盖丢失、卵内毛蚴吸附胆红素呈棕褐色.

图2 电子扫描显微镜下, 胆囊胆汁、胆泥和结石中的华支睾吸虫卵形态(Mag×3000). A: 胆汁中的虫卵, 表面呈凹凸不平的纹理状结构; B: 胆泥中的虫卵, 表面被胆红素颗粒和黏液包裹; C: 结石中的虫卵, 表面及四周黏附黏液和碳酸钙结晶; D: 胆汁中的虫卵, 卵盖端黏附有黏液; E: 胆泥中的虫卵, 未被黏液完全包裹, 可见部分纹理状结构; F: 镶嵌于结石中的虫卵, 卵盖丢失、表面纹理状结构消失而变得光滑.

图3 胆囊胆汁、胆泥和结石中, 华支睾吸虫卵及周围物质的Von Kossa(钙盐)染色结果(Mag×400), 黑色或黑褐色为染色阳性即黑色或黑褐色染色区域为含有钙盐区域, 提示此区域存在钙化. A: 胆汁中的虫卵和黏液染色为阴性; B, E: 胆泥中虫卵表面和周围大部分区域呈阳性, 棕黄色区域为胆红素和黏液混合物; C, F: 结石中虫卵表面和周围全部区域染色呈强阳性; D: 胆汁中个别虫卵表面染色成弱阳性.

图4 扫描电镜和X-射线能谱仪联合分析胆囊胆汁、胆泥和结石中的华支睾吸虫卵及周围物质的钙元素分布情况, 红点代表钙元素, 红点越多越密集, 代表钙含量越高(Mag×3000). A, D: 同一例胆汁中的两个虫卵, 表面钙含量差别较大; B, E: 同一例胆泥中, 虫卵和周围物质的钙含量不同; C, F: 同一例结石中, 被黏液样物质包裹的虫卵表面钙含量较高.

图5 胆囊胆汁、胆泥和结石中, 华支睾吸虫卵的台盼蓝(Trypan blue)染色结果, 存活的虫卵表现为其内部的毛蚴不着蓝色, 而变性或死亡的虫卵则内部毛蚴着色(Mag×400). A-D: 胆汁中存活的虫卵; E: 胆汁中变性或死亡的虫卵; F: 胆泥中钙化的虫卵; G, H: 胆泥中死亡的虫卵, 卵盖丢失, 毛蚴被胆红素染色; I, J: 胆泥中变性或死亡的虫卵; K-O: 结石中变性或死亡的虫卵, 内部毛蚴不同程度地蓝染.