基于NLRP3炎症小体探讨黄连厚朴汤治疗溃疡性结肠炎的作用机制

文章亮点

实验背景

黄连厚朴汤(Huanglian Houpo Decoction, HHD)为治疗伤寒所致大便自利不止的经典方剂. 现代药理研究证实HHD中的组成药物黄连、厚朴及其有效成分均能改善溃疡性结肠炎(ulcerative colitis, UC)模型动物炎症损伤. 当前研究发现, 核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(nucleotide binding oligomerization domain-like receptor protein 3, NLRP3)炎症小体是治疗UC的潜在靶点, 但HHD治疗UC的作用机制是否与其调控NLRP3炎症小体信号通路相关, 还有待进一步研究.

实验动机

本实验从NLRP3炎症小体角度出发, 探讨HHD的作用机制, 以期为临床更好地应用该方提供科学依据.

实验目标

本实验通过观察HHD对葡聚糖硫酸钠(dextran sodium sulfate, DSS)诱导形成的UC模型小鼠中NLRP3炎症小体信号通路的影响, 探究HHD治疗UC的作用机制.

实验方法

本实验构建了DSS诱导的UC小鼠模型, 并给予不同剂量的HHD治疗, 收集血清和结肠组织, 通过组织学、生化以及Western blot检测评估HHD对UC小鼠疾病活动指数(disease activity index, DAI)、结肠长度、结肠黏膜损伤指数(colon mucosa damage index, CMDI)、结肠组织病理变化、血清中炎症因子水平以及结肠组织NLRP3信号通路相关蛋白表达水平的影响.

实验结果

HHD能降低UC模型小鼠的DAI和CMDI评分、恢复结肠长度、改善结肠组织病理变化、降低血清中促炎细胞因子白细胞介素1β(interleukin-1β, IL-1β)、白细胞介素6(interleukin-6, IL-6)及肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor, TNF-α)的表达以及下调结肠组织中NLRP3与半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶1的蛋白表达.

实验结论

HHD可能通过抑制NLRP3炎性小体活化, 降低血清中促炎细胞因子IL-1β、IL-6及TNF-α的分泌水平, 从而改善DSS诱导的UC小鼠症状, 发挥治疗作用.

展望前景

本研究为HHD的临床应用提供了实验依据. 但本研究仅从整体实验观察了HHD对UC小鼠NLRP3炎症小体信号通路相关蛋白的影响, 今后应进一步开展细胞实验对其作用机制进行深入探讨.