基础研究
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世界华人消化杂志. 2019-02-08; 27(3): 146-153
Published online 2019-02-08. doi: 10.11569/wcjd.v27.i3.146
七氟醚通过上调miR-34a抑制结直肠癌细胞的迁移和侵袭的机制研究
单晓山, 刘宇, 楼群兵, 周振峰
单晓山, 刘宇, 楼群兵, 义乌市中心医院麻醉科 浙江省义乌市 322000
单晓山, 住院医师, 主要从事麻醉方面的研究方向.
周振峰, 浙江省人民医院麻醉科 浙江省杭州市 310014
作者贡献分布: 此课题由单晓山与楼群兵设计; 研究过程由单晓山与刘宇操作完成; 研究所用新试剂及分析工具由周振峰提供; 数据分析由刘宇与周振峰完成; 本论文写作由单晓山、刘宇及楼群兵完成.
通讯作者: 单晓山, 住院医师, 322000, 浙江省义乌市江东中路699号, 义乌市中心医院麻醉科. sygm163@163.com
电话: 0579-85209661
收稿日期: 2018-11-08
修回日期: 2018-12-24
接受日期: 2019-01-10
在线出版日期: 2019-02-08
文章亮点
实验背景

结直肠癌是常见的消化系统恶性肿瘤, 其发病率和致死率均处较高水平. 结直肠癌发生转移是导致预后不良的主要原因. 七氟醚是肿瘤切除手术中常用麻醉药, 多项研究发现, 七氟醚能够抑制肿瘤的生长和转移. 然而其具体作用机制目前尚不十分明确.

实验动机

本实验探究七氟醚对结直肠癌细胞侵袭和迁移能力的影响, 并初步探讨其作用机制, 以期为临床上使用七氟醚治疗结直肠提供一定的实验基础.

实验目标

本实验探讨七氟醚对结直肠癌HCT116细胞侵袭和迁移能力的影响主要通过调控miR-34a的表达实现的, 且该过程与MMP-2和MMP-9的表达水平的变化有关. 本研究为进一步探究七氟醚对肿瘤侵袭和迁移的机制研究奠定一定的理论基础.

实验方法

本实验主要通过qRT-PCR实验检测七氟醚对HCT116细胞中miR-34a表达的影响, CCK-8法检测七氟醚对细胞增殖能力的影响; 通过脂质体转染实验抑制细胞中miR-34a的表达; 通过Transwell实验检测对细胞侵袭和迁移能力的影响; Western blot检测对细胞中MMP-2和MMP-9蛋白表达的影响.

实验结果

本实验结果显示, 七氟醚能够抑制结直肠癌HCT116细胞的增殖、侵袭和迁移, 且上调miR-34a的表达. 在此基础上转染miR-34a inhibitor抑制miR-34a的表达后, 七氟醚对细胞侵袭和迁移能力的抑制作用部分被逆转, 此外发现MMP-2和MMP-9蛋白表达水平发生变化.

实验结论

七氟醚能够抑制结直肠癌HCT116细胞侵袭和迁移, 其作用机制与上调miR-34a的表达, 抑制MMP-2和MMP-9蛋白表达有关, 为七氟醚对肿瘤侵袭和迁移的影响的分子机制探究奠定实验基础.

展望前景

本实验以不同浓度的七氟醚干预人结直肠癌HCT116细胞不同时间, 观察其对HCT116细胞增殖的影响, 筛选出其作用浓度为4%, 用于后续探究对HCT116细胞迁移和侵袭能力的影响.