基础研究
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世界华人消化杂志. 2022-05-08; 30(9): 393-401
Published online 2022-05-08. doi: 10.11569/wcjd.v30.i9.393
Circ_0044516靶向调控miR-516a-5p对胃癌细胞增殖、迁移和凋亡的影响
方惠, 李莹, 桑怡
方惠, 李莹, 浙江中医药大学附属杭州市中医院特检科 浙江省杭州市 310000
方惠, 本科, 研究方向为内科学.
桑怡, 浙江中医药大学附属杭州市中医院消化科 浙江省杭州市 311700
作者贡献分布: 此课题由方惠、李莹共同设计; 研究过程由方惠、李莹操作完成;研究所用试剂及分析工具由方惠、李莹提供; 数据分析由桑怡完成; 论文写作由方惠、李莹、桑怡完成.
通讯作者: 方惠, 特检科医师, 310000, 浙江省杭州市西湖区体育场路453号,浙江中医药大学附属杭州市中医院. fh15068756396@163.com
收稿日期: 2022-01-21
修回日期: 2022-03-02
接受日期: 2022-04-19
在线出版日期: 2022-05-08
Abstract
背景

Circ_0044516在胃癌中高表达, 抑制circ_0044516能促进胃癌细胞增殖和诱导凋亡. 生物学软件预测miR-516a-5p与circ_0044516相互结合, miR-516a-5p在非小细胞肺癌低表达,但是在胃癌细胞研究暂不清楚. 本研究主要探究circ_0044516靶向调控miR-516a-5p对胃癌细胞增殖、迁移和凋亡的影响.

目的

探究circ_0044516是否靶向调控miR-516a-5p及对胃癌细胞增殖、迁移和凋亡的影响.

方法

qRT-PCR实验检测胃上皮细胞GES-1和胃癌细胞SNU-16、HGC-27中circ_0044516、miR-516a-5p表达水平. 将HGC-27细胞分为si-NC组(转染si-NC)、si-circ_0044516组(转染si-circ_0044516)、miR-NC组(转染miR-NC)、miR-516a-5p组(转染miR-516a-5p)、si-circ_0044516+anti-miR-NC组(共转染si-circ_0044516和anti-miR-NC)、si-circ_0044516+anti-miR-516a-5p组(共转染si-circ_0044516+anti-miR-516a-5p). 定量即时聚合酶链锁反应(quantitative real time polymerase chain reaction, qRT-PCR)实验检测circ_0044516和miR-516a-5p表达水平; 噻唑蓝(methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide, MTT)实验检测细胞增殖; 流式细胞术实验检测细胞凋亡; Transwell实验检测细胞迁移; 蛋白免疫印迹(Western blot)实验检测p21、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein, Bax)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(B cell lymphoma/lewkmia-2, Bcl-2)、基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase 2, MMP2)蛋白表达; 双荧光素酶报告实验检测circ_0044516和miR-516a-5p靶向关系.

结果

与胃上皮细胞GES-1相比, circ_0044516在胃癌细胞SNU-16、HGC-27中表达水平增加, miR-516a-5p表达水平降低. 沉默circ_0044516或过表达miR-516a-5p降低胃癌细胞存活率、迁移细胞数, 增加细胞凋亡率, 增加p21、Bax蛋白表达, 降低Bcl-2、MMP2蛋白表达. circ_0044516靶向负调控miR-516a-5p的表达, 抑制miR-516a-5p可以部分回复沉默circ_0044516对胃癌细胞增殖、迁移和凋亡的影响.

结论

Circ_0044516可通过靶向负调控miR-516a-5p抑制胃癌细胞增殖和迁移, 并诱导细胞凋亡.

Keywords: Circ_0044516; miR-516a-5p; 胃癌细胞; 增殖; 迁移; 凋亡

核心提要: 在胃癌细胞中circ_0044516高表达, miR-516a-5p地表达, circ_0044516可通过靶向负调控miR-516a-5p抑制胃癌细胞增殖和迁移, 并诱导细胞凋亡.