基础研究
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世界华人消化杂志. 2020-03-28; 28(6): 217-225
Published online 2020-03-28. doi: 10.11569/wcjd.v28.i6.217
FTY720通过miR-494/MST1抑制结肠癌细胞并增加吉西他滨敏感性的分子机制
薛珊, 邢颖, 宋华伟
薛珊, 邢颖, 陆军第七十二集团军医院消化内科 浙江省湖州市 313000
薛珊, 主治医师, 研究方向为消化系统常见病或肿瘤.
宋华伟, 陆军第七十二集团军医院特诊科 浙江省湖州市 313000
基金项目: 湖州市科学技术局资助项目, No. 2016YZB01.
作者贡献分布: 薛珊、邢颖和宋华伟对此文所作贡献两均等; 此课题由薛珊、邢颖及宋华伟设计; 研究过程由薛珊、邢颖和宋华伟操作完成; 研究所用新试剂及分析工具由邢颖提供; 数据分析由薛珊、邢颖和宋华伟完成; 本论文写作由薛珊、邢颖和宋华伟完成.
通讯作者: 邢颖, 博士, 主治医师, 313000, 浙江省湖州市吴兴区车站路9号, 陆军第七十二集团军医院消化内科. qhfzg57@163.com
收稿日期: 2020-02-06
修回日期: 2020-03-19
接受日期: 2020-03-23
在线出版日期: 2020-03-28
Abstract
背景

结肠癌在我国恶性肿瘤中发病率和死亡率均居第5位, 化疗是其主要治疗方式, 有研究表明免疫抑制剂FTY720对癌症细胞增殖起一定的抑制作用, 抑制剂联合化疗药物可提高癌症治疗效果. 本研究使用免疫抑制剂FTY720与吉西他滨联合处理结肠癌细胞, 并探索miR-494/哺乳动物Ste20样激酶1(mammalian Ste20-like kinase 1, MST1)对在此过程中对结肠癌细胞增殖和凋亡的影响, 以期为结肠癌的治疗提供新的思路.

目的

研究FTY720和吉西他滨对结肠癌细胞存活率和凋亡的影响和潜在的分子机制.

方法

用0.0001 μg/mL、0.001 μg/mL、0.01 μg/mL、0.1 μg/mL、1 μg/mL的吉西他滨和2.5 μmol/L、5 μmol/L、7.5 μmol/L、10 μmol/L、12.5 μmol/L的FTY720处理结肠癌SW1116细胞, CCK8法和流式细胞术检测SW1116细胞存活率和凋亡率, 实时定量聚合酶链式反应检测miR-494和MST1 mRNA的含量, Western blot检测MST1、p21和Caspase-3蛋白表达水平, 双荧光素酶报告系统验证miR-494与MST1的调控关系.

结果

吉西他滨(0.0001 μg/mL、0.001 μg/mL、0.01 μg/mL、0.1 μg/mL、1 μg/mL)和FTY720 (2.5 μmol/L、5 μmol/L、7.5 μmol/L、10 μmol/L、12.5 μmol/L)均可降低结肠癌SW1116细胞的存活率, 且具有浓度依赖性, 根据结果选取抑制率约为50%的0.1 μg/mL吉西他滨和10 μmol/L的FTY720进行后续实验, 吉西他滨和FTY720均可抑制细胞存活并促进细胞凋亡, 且联合使用比单独使用效果更好; 过表达miR-494可逆转FTY720、吉西他滨对SW1116细胞存活率和凋亡的作用; miR-494靶向调控MST1; 抑制MST1可逆转FTY720和吉西他滨对SW1116细胞存活率和凋亡的影响.

结论

FTY720和吉西他滨通过miR-494/MST1抑制SW1116细胞存活, 促进细胞凋亡. FTY720和吉西他滨对结肠癌SW1116具有抑制作用, 且联合使用效果更佳.

Keywords: 结肠癌; FTY720; 吉西他滨; miR-494; MST1; 存活率; 凋亡率

核心提要: 化疗是结肠癌的主要治疗方式, 免疫抑制剂对癌症患者起一定的作用. 本研究中使用免疫抑制剂FTY720与吉西他滨联合处理结肠癌细胞, 对结肠癌的治疗可能起到一定的积极作用.