基础研究
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世界华人消化杂志. 2019-07-28; 27(14): 864-871
Published online 2019-07-28. doi: 10.11569/wcjd.v27.i14.864
miR-567靶向TRPM8调控结直肠癌细胞增殖凋亡的分子机制
杨庆华, 陈栋
杨庆华, 义乌市中心医院肛肠科 浙江省义乌市 322000
杨庆华, 主治医师, 研究方向为肛肠肿瘤的分子学机制.
陈栋, 浙江大学医学院附属第一医院肛肠外科 浙江省杭州市 310003
作者贡献分布: 此课题由杨庆华与陈栋设计; 研究过程、数据分析及论文写作由杨庆华与陈栋操作完成; 研究所用新试剂及分析工具由陈栋提供.
通讯作者: 杨庆华, 主治医师, 322000, 浙江省义乌市江东街道699号, 义乌市中心医院肛肠科. eih93578995zhish@163.com
电话: 0579-85209668
收稿日期: 2019-04-03
修回日期: 2019-05-29
接受日期: 2019-07-15
在线出版日期: 2019-07-28
Abstract
背景

miRNA在癌症中的作用日益成为研究的热点, miR-567在癌症中的研究相对较少, 其在结直肠癌(colorectal cancer, CRC)中的功能作用尚缺乏参考.

目的

研究miR-567对CRC细胞增殖、凋亡的影响及其机制.

方法

运用qRT-PCR法检测CRC细胞SW480、SW1116、HT29和正常结直黏膜上皮细胞NCM460中miR-567、瞬时受体电位8(transient receptor potential melastatin 8, TRPM8)的表达; 将miR-NC组(转染miR-NC)、miR-567组(转染miR-567 mimics)、si-NC组(转染si-NC)、si-TRPM8组(转染si-TRPM8)、miR-567+pcDNA组(共转染miR-567和pcDNA)、miR-567+pcDNA-TRPM8组(共转染miR-567和pcDNA-TRPM8), 用脂质体法转染至SW480细胞. MTT法检测细胞的增殖; 流式细胞术检测细胞的凋亡; Western blot检测细胞中TRPM8、CyclinD1、p21、p23、Bcl-2、Bax、Cleaved-capase-3的蛋白表达; 双荧光素酶报告基因检测实验检测细胞的荧光活性.

结果

与正常结直黏膜上皮细胞NCM460相比, CRC细胞中miR-567的表达明显降低, TRPM8的表达明显升高; 过表达miR-567或抑制TRPM8均可抑制SW480细胞的增殖, 促进其凋亡; miR-567可抑制野生型TRPM8细胞的荧光活性, 并负向调控TRPM8的表达; 过表达TRPM8逆转了过表达miR-567对SW480细胞的增殖抑制和凋亡促进作用.

结论

miR-567可抑制CRC细胞的增殖, 促进凋亡, 其机制与靶向TRPM8有关, 将可为CRC的预防和治疗提供新方向.

Keywords: miR-567; TRPM8; 结直肠癌; 增殖; 凋亡

核心提要: miR-567在结直肠癌(colorectal cancer, CRC)中具有抑制癌细胞增殖, 促进癌细胞凋亡的功能, 瞬时受体电位8(transient receptor potential melastatin 8, TRPM8)的敲减具有抑制CRC细胞增殖, 促进凋亡的功能, 二者之间具有miR-567靶向抑制TRPM8表达的关系.