基础研究
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世界华人消化杂志. 2016-07-28; 24(21): 3262-3269
Published online 2016-07-28. doi: 10.11569/wcjd.v24.i21.3262
LKB1对胃癌细胞增殖、凋亡的影响及相关分子实验
陶海云, 屈中玉, 魏光敏, 盛晶, 王文廉, 万里新
陶海云, 屈中玉, 魏光敏, 盛晶, 王文廉, 万里新, 南阳市中心医院肿瘤科 河南省南阳市 473009
陶海云, 主治医师, 主要从事肿瘤方面的研究.
作者贡献分布: 陶海云进行实验设计与实施; 屈中玉、魏光敏及王文廉进行资料收集整理; 陶海云撰写论文、成文并对文章负责; 万里新进行质量控制及审校; 试验试剂由盛晶、万里新提供.
基金项目: 河南省医学科技攻关计划基金资助项目, No. 201403228.
通讯作者: 万里新, 主任医师, 473009, 河南省南阳市宛城区工农路312号, 南阳市中心医院肿瘤科. wanlixin319@126.com
电话: 0377-63200088
收稿日期: 2016-06-07
修回日期: 2016-07-04
接受日期: 2016-07-11
在线出版日期: 2016-07-28
Abstract

目的: 探讨LKB1在胃癌发生中的作用及相关分子机制研究, 为胃癌化疗药物的研发提供一定的理论基础.

方法: 利用LKB1过表达质粒以及LKB1 siRNA转染人胃癌细胞株SGC7901, 实时荧光定量PCR及Western blot检测质粒以及siRNA转染效果, 流式细胞术检测LKB1过表达以及干扰后的SGC7901细胞(血清饥饿处理2 h)凋亡数量. 活性氧检测试剂盒检测LKB1对SGC7901细胞内ROS产生的影响. MTT法检测NAC抑制细胞内ROS产生后LKB1过表达以及干扰后SGC7901细胞数量的改变. Western blot检测LKB1过表达以及干扰后SGC7901细胞中凋亡相关蛋白的表达水平.

结果: LKB1过表达质粒转染后的人胃癌细胞株SGC7901细胞凋亡增加, 胞内ROS产生增加, LKB1过表达后的SGC7901细胞凋亡则明显增多(3.54% vs 1.29%), 转染LKB1 siRNA的人胃癌细胞株SGC7901早期凋亡和晚期凋亡的细胞数量占总数较转染scramble siRNA组明显减少(0.54% vs 1.39%). 同时Western blot检测发现LKB1过表达后的SGC7901细胞中剪切型Caspase3表达明显升高上升3.12倍, 较对照组差异有统计学意义, 而siRNA干扰后剪切型Caspase3表达则表现为相反的趋势.

结论: LKB1通过促进ROS的产生, 上调剪切型Caspase3介导的凋亡通路促进胃癌细胞凋亡, 因此LKB1在胃癌发生发展过程中具有重要抑制作用, 其可能作为胃癌化疗药物研发的重要目标分子.

Keywords: LKB1; 胃癌; SGC7901胃癌细胞系; 细胞凋亡

核心提示: LKB1不仅可以抑制胃癌细胞的增殖, 而且可抑制胃癌组织的血管化, 抑制癌细胞的生长和转移, 在抑制肿瘤发生和发展方面具有重要作用.