基础研究
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世界华人消化杂志. 2016-06-08; 24(16): 2470-2477
Published online 2016-06-08. doi: 10.11569/wcjd.v24.i16.2470
内质网应激凋亡通路中Caspase12激活介导的肝纤维化大鼠肝细胞凋亡
谢汝佳, 韩冰, 杨婷, 杨勤
谢汝佳, 韩冰, 杨婷, 杨勤, 贵州医科大学病理生理教研室 贵州省贵阳市 550004
谢汝佳, 副教授, 主要从事肝纤维化发病机制方面的研究.
基金项目: 国家自然科学基金资助项目, No. 81560105; 贵州省教育厅自然科学基金资助项目, No. 黔教合KY字[2014]269; 贵州省科技厅基金资助项目, No. 黔科合LH字[2014]7074.
作者贡献分布: 本研究设计、试剂提供由杨勤与谢汝佳共同完成; 研究内容由谢汝佳、韩冰及杨婷操作完成; 数据分析由谢汝佳与韩冰完成; 论文写作由谢汝佳完成.
通讯作者: 杨勤, 教授, 550004, 贵州省贵阳市北京路9号, 贵州医科大学病理生理教研室. qinyang@gmc.edu.cn
收稿日期: 2016-04-14
修回日期: 2016-05-06
接受日期: 2016-05-09
在线出版日期: 2016-06-08
Abstract

目的: 观察内质网应激凋亡通路中关键信号分子Caspase12活性变化, 探讨其在肝纤维化大鼠肝细胞凋亡中的可能作用.

方法: 将Wistar大鼠随机分为正常4 wk组、正常8 wk组、肝纤维化4 wk组和肝纤维化8 wk组. 皮下注射40%CCl4花生油溶液诱导肝纤维化形成, 剂量0.3 mL/100 g体质量, 2次/wk. 肝组织中GRP78、GRP94及Caspase12基因水平的表达通过实时荧光定量PCR技术测定; GRP78、GRP94、Procaspase12及活性Caspase12蛋白的表达采用蛋白质免疫印迹法检测; 肝细胞凋亡通过TUNEL法测定.

结果: 肝纤维化4 wk组大鼠肝组织中GRP78、GRP94及Caspase12 mRNA表达显著高于正常4 wk组大鼠; 肝纤维化8 wk时, 肝组织中GRP78、GRP94、Caspase12 mRNA的表达较正常8 wk组显著增加. 通过Western blot对各指标蛋白水平的检测发现, 肝纤维化4 wk时大鼠肝脏中GRP78、GRP94、Procaspase12及活性Caspase12蛋白的表达较正常4 wk组大鼠显著增加; 肝纤维化8 wk时, 肝脏中GRP78、GRP94、Procaspase12、活性Caspase12蛋白的表达仍保持在高水平, 但与肝纤维化4 wk时比较无显著差异. 细胞凋亡检测发现, 与正常组大鼠比较, 肝纤维化4 wk及8 wk组大鼠肝细胞凋亡均明显升高.

结论: 内质网应激凋亡通路中关键信号分子Caspase12活化可能介导了肝纤维化大鼠肝细胞凋亡的发生.

Keywords: 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶12; 内质网应激; 细胞凋亡; 肝纤维化

核心提示: 内质网应激诱导的凋亡是近年来新发现的一种细胞凋亡途径. 本文通过观察内质网应激凋亡通路中关键信号分子Caspase12的活性变化, 证实CCl4诱导的肝纤维化过程中可通过激活Caspase12诱导细胞凋亡的发生, 从而促进肝细胞损伤及肝纤维化的发生.