基础研究
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世界华人消化杂志. 2016-05-18; 24(14): 2161-2169
Published online 2016-05-18. doi: 10.11569/wcjd.v24.i14.2161
Th17细胞因子在CD大鼠结肠不同炎性时期的差异表达
吴璐一, 翁志军, 吴焕淦, 陆颖, 季光
吴璐一, 陆颖, 上海市气功研究所 上海市 200030
翁志军, 吴焕淦, 上海市针灸经络研究所 上海市 200030
季光, 上海中医药大学脾胃病研究所 上海市 201203
吴璐一, 助理研究员, 主要从事中医药防治炎症性肠病的基础与临床研究.
基金项目: 国家自然科学基金资助项目, No. 81303033; 上海市教委优秀青年教师科研基金资助项目, No. zzszy12011; 上海市重点学科基金资助项目, No. JZ2012019; 上海市科技启明星计划基金资助项目, No. 16QA1403400.
作者贡献分布: 季光与吴焕淦负责课题的设计; 翁志军与陆颖负责动物实验过程; 吴璐一负责实验指标检测、数据分析及论文写作.
通讯作者: 季光, 教授, 主任医师, 博士生导师, 201203, 上海市宛平南路725号, 上海中医药大学脾胃病研究所. jiliver@vip.sina.com
收稿日期: 2016-02-18
修回日期: 2016-04-13
接受日期: 2016-04-20
在线出版日期: 2016-05-18
Abstract

目的: 观察不同次数三硝基苯磺酸(trinitro-benzene-sulfonic acid, TNBS)灌肠刺激对大鼠肠道炎症程度及结肠组织Th17细胞因子白介素(interleukin, IL)-6、IL-17A、IL-21、维甲酸相关孤核受体γt(retinoid-related orphan nuclear receptorγt, RORγt)表达的影响.

方法: 30只清洁级♂SD大鼠, 160 g±10 g, 随机分为正常对照组(NG)、1 wk造模组、2 wk造模组、3 wk造模组、4 wk造模组. 按照Morris等方法制备克罗恩病(Crohn's disease, CD)大鼠模型, TNBS灌肠液由5%TNBS与500 mL/L的乙醇按2∶1比例混合而成, 1次/wk. 采用结肠一般形态和HE病理观察TNBS对结肠黏膜的病理损伤程度, 荧光定量PCR、免疫组织化学等技术观察各组大鼠结肠黏膜中RORγt、IL-17A的表达, ELISA法观察血清中IL-6、IL-21含量的变化.

结果: 大鼠结肠IL-17A mRNA水平在第1次TNBS诱导后表达为下降, 在3 wk时, IL-17A mRNA与蛋白水平明显升高(P<0.05), 第4次诱导后达到最高. 大鼠结肠RORγt蛋白随着刺激次数的增加而表达量逐渐增高(P<0.05), 第4次诱导后达到最高(P<0.05); 血清中IL-6、IL-21含量也均在1 wk时间点即开始显著上升(P<0.01), 在第4周达到最高值. 模型大鼠结肠组织大体形态评分和组织损伤评分显著增加(P<0.01).

结论: TNBS诱导CD模型过程中, Th17细胞因子IL-6、IL-17A、IL-21、RORγt的含量随着刺激次数的增加而逐渐增加, 并伴随结肠炎症程度的加重而逐渐加重.

Keywords: 克罗恩病; Th17; 白介素-6; 白介素-17A; 白介素-21; 维甲酸相关孤核受体γt

核心提示: Th17细胞是一群介导炎症反应的重要细胞, 维甲酸相关孤核受体γt(retinoid-related orphan nuclear receptor γt, RORγt)是Thl7细胞特异性转录因子. 在三硝基苯磺酸诱导克罗恩病模型过程中, Th17细胞因子白介素(interleukin, IL)-6、IL-17A、IL-21、RORγt的含量随着刺激次数的增加而逐渐增加.