研究快报
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世界华人消化杂志. 2014-03-28; 22(9): 1247-1255
Published online 2014-03-28. doi: 10.11569/wcjd.v22.i9.1247
解毒化瘀健脾方对胃黏膜异型增生模型大鼠p16、PTEN基因的去甲基化和蛋白诱导表达
李志钢, 张伟, 邱作成, 夏宽宏, 纪勇, 李玲, 连军, 安娟
李志钢, 邱作成, 新疆维吾尔自治区中医医院专家门诊 新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市 830000
张伟, 新疆维吾尔自治区中医医院耳鼻喉科 新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市 830000
夏宽宏, 新疆维吾尔自治区中医医院病理科 新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市 830000
纪勇, 李玲, 连军, 安娟, 新疆医科大学动物实验中心 新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市 830000
李志钢, 博士后, 副主任医师, 硕士生导师, 主要从事消化病的基础与临床研究.
基金项目: 国家自然科学基金资助项目, No. 81060288.
作者贡献分布: 本课题由李志钢与张伟共同设计; 研究过程由李志钢、张伟、邱作成、连军及安娟共同完成; 病理分析由夏宽宏完成; 数据分析由纪勇与李玲共同完成; 写作由李志钢完成; 纪勇与李玲进行修改.
通讯作者: 张伟, 主管护理师, 830000, 乌鲁木齐市黄河路116号, 新疆维吾尔自治区中医医院耳鼻喉科. doctorzhangwei@163.com
电话: 0991-5857265
收稿日期: 2013-12-13
修回日期: 2014-01-23
接受日期: 2014-01-24
在线出版日期: 2014-03-28
Abstract

目的: 观察解毒化瘀健脾方对胃黏膜异型增生模型大鼠细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂2A(cyclin-dependent kinase inhibitor 2A, p16)、磷酸酶张力蛋白同源蛋白(phosphatase and tensin homolog, PTEN)基因甲基化状态和蛋白表达的影响, 并探讨解毒化瘀健脾方对胃黏膜异型增生的治疗作用.

方法: 采用低浓度N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍(N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine, MNNG)的综合造模方法, 创建实验性大鼠胃黏膜异型增生病变模型; 分模型对照组、西药维甲酸治疗组、解毒化瘀健脾方治疗组, 并选择正常大鼠作为阳性对照组进行干预; 应用甲基化特异PCR技术检测大鼠胃黏膜p16、PTEN基因甲基化状态; Real-time PCR、Western blot、免疫组织化学技术检测p16, PTEN在mRNA和蛋白表达水平的变化.

结果: 模型组胃黏膜异型增生细胞p16、PTEN基因的甲基化阳性检出率均为33.33%(6/18), 均高于正常对照组20%(2/10), 但差异不显著; 解毒化瘀健脾方治疗组p16基因甲基化检出率均未0%(0/15), 相比模型组20%(2/10)甲基化程度降低, 但差异均无统计学意义; p16在mRNA(P<0.001)和蛋白(P<0.01)水平的表达相比模型组极显著升高; PTEN在mRNA(P<0.05)和蛋白(P<0.01)水平的表达相比模型组极显著升高.

结论: 解毒化瘀健脾方对异型增生胃黏膜细胞p16、PTEN基因具有一定的去甲基化作用, 并显著诱导二者的表达量增加. 解毒化瘀健脾组方的对胃黏膜异型增生具有潜在的治疗作用.

Keywords: 解毒化瘀健脾; 胃黏膜异型增生; p16基因; PTEN基因; 甲基化

核心提示: 解毒化瘀健脾中药可通过对抑癌基因p16、PTEN一定的去甲基化作用及诱导二者mRNA和蛋白水平表达量增加, 实现对胃黏膜异型增生的治疗作用.