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世界华人消化杂志. 2014-04-18; 22(11): 1495-1503
Published online 2014-04-18. doi: 10.11569/wcjd.v22.i11.1495
Published online 2014-04-18. doi: 10.11569/wcjd.v22.i11.1495
Sp3表达下调后肝癌细胞株HepG2基因表达谱的变化
黄兰姗, 李海荣, 陈罡, 陆会平, 李佳, 冯振博, 广西医科大学第一附属医院病理科 广西壮族自治区南宁市 530021
黄兰姗, 在读硕士, 主要从事肝癌发病机制的研究.
基金项目: 广西科技攻关基金资助项目, Nos. 1298003-2-5, 10124001A-1.
作者贡献分布: 本课题由黄兰姗与冯振博设计; 研究过程由黄兰姗完成, 李海荣、陈罡及陆会平协助完成; 数据分析与文章撰写由黄兰姗完成; 文章修改与审阅由陈罡、李佳及冯振博完成.
通讯作者: 冯振博, 教授, 530021, 广西壮族自治区南宁市双拥路22号, 广西医科大学第一附属医院病理科. guanghu1963@126.com
电话: 0771-5356534
收稿日期: 2014-01-11
修回日期: 2014-02-23
接受日期: 2014-02-28
在线出版日期: 2014-04-18
修回日期: 2014-02-23
接受日期: 2014-02-28
在线出版日期: 2014-04-18
Abstract
目的: 分析转录因子Sp3表达下调后人肝癌细胞株HepG2基因表达谱的变化.
方法: 使用siRNA干扰技术下调人肝癌细胞株HepG2中Sp3表达, 人全基因组表达谱芯片筛查Sp3沉默后的差异表达基因, qRT-PCR验证部分差异表达基因, 流式细胞术检测细胞周期.
结果: Sp3表达下调后, 筛查出差异表达基因1789个, 其中上调基因1007个, 下调基因782个, 涉及细胞增殖、分化、凋亡、黏附、代谢等多方面功能, qRT-PCR结果表明周期相关基因CCND1、CCNE2、转化生长因子B1(transforming growth factor B1, TGFB1)、CDKN2A的表达变化与芯片结果一致, 流式细胞术结果显示Sp3表达下调后细胞主要分布在G1期.
结论: Sp3表达下调后人肝癌细胞株HepG2的基因表达谱发生明显变化, 并出现G0/G1期阻滞, Sp3可能通过细胞周期因子参与肝癌的发生发展过程.
Keywords: Sp3; 肝癌; 细胞周期; RNA干扰; 基因芯片
核心提示: 通过基因芯片与qRT-PCR发现Sp3表达下调后Cyclin D1、Cyclin E2、转化生长因子-β(transforming growth factor-β, TGF-β)mRNA表达亦下调, 而细胞周期蛋白依赖激酶抑制因子(cyclin-dependent inhibitor)2A mRNA表达上调, 流式细胞术分析提示G0/G1期阻滞, Sp3可能通过细胞周期参与肝癌的发生发展.