基础研究
Copyright ©The Author(s) 2013. Published by Baishideng Publishing Group Inc. All rights reserved.
世界华人消化杂志. 2013-12-28; 21(36): 4075-4083
Published online 2013-12-28. doi: 10.11569/wcjd.v21.i36.4075
二甲双胍对人食管癌Eca109细胞的增殖与凋亡的影响及其机制
梁凤, 王昌成, 费素娟
梁凤, 徐州医学院 江苏省徐州市 221000
梁凤, 王昌成, 徐州医学院附属淮安医院消化科 江苏省淮安市 223002
费素娟, 徐州医学院附属医院消化科 江苏省徐州市 221000
梁凤, 在读硕士, 主要从事消化系肿瘤的临床与病理研究.
作者贡献分布: 梁凤、王昌成及费素娟对本文所作贡献均等; 此课题由王昌成与费素娟设计; 研究过程由梁凤操作完成; 数据分析由梁凤完成; 本论文写作由梁凤与王昌成完成.
通讯作者: 王昌成, 教授, 主任医师, 223002, 江苏省淮安市淮海南路62号, 徐州医学院附属淮安医院消化科. changchengwang1964@126.com
收稿日期: 2013-09-21
修回日期: 2013-10-28
接受日期: 2013-11-06
在线出版日期: 2013-12-28
Abstract

目的: 研究二甲双胍对人食管鳞状细胞癌Eca109细胞的增殖、凋亡的影响及其机制.

方法: 倒置相差显微镜观察二甲双胍作用于Eca109细胞后细胞形态学的改变; 二甲双胍或二甲双胍联合5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil, 5-FU)干预细胞24、48、72 h后, MTT检测细胞抑制率; Hoechst33258荧光染色法观察凋亡细胞核的形态学变化; 药物干预后, 流式细胞仪检测细胞周期的改变, 抽提mRNA并以RT-PCR(reverse transcription PCR)检测相关基因cyclinD1、p27的转录情况.

结果: 二甲双胍处理后倒置相差显微镜观察其大体形态和荧光显微镜观察其细胞核均呈现凋亡的形态学变化; MTT结果显示,不同浓度二甲双胍作用于食管癌Eca109细胞后, 相关分析结果显示, 食管癌Eca109细胞生长抑制率与二甲双胍浓度呈正相关(r = 0.968, P<0.05), 与作用时间呈正相关(r = 0.914, P<0.05); 与5-FU联合使用时(联合用药组24 h: t = 6.943, P<0.05, 48 h: t = 7.764, P<0.05, 72 h: t = 14.554, P<0.05 vs 单用二甲双胍组), 但根据金正均法判断, 三组的q值0.85-1.15, 表示两药有单纯相加作用, 并无协同作用; 流式测细胞周期结果显示, 二甲双胍阻滞细胞于G0/G1期细胞; RT-PCR结果显示周期相关基因cyclinD1 mRNA显著下调(P<0.05), p27 mRNA显著上调(P<0.05).

结论: 二甲双胍能促进人食管癌细胞系Eca109的凋亡, 与5-FU联合用药时无明显协同作用, 阻滞细胞周期于G0/G1期, 其机制可能与上调或下调某些细胞周期相关基因的表达有关.

Keywords: 二甲双胍; 5-氟尿嘧啶; Eca109细胞; 协同作用; 细胞周期; 抑制率

核心提示: 研究结果表明安全且价廉的口服降糖药二甲双胍能抑制食管癌细胞系Eca109细胞的增殖, 促进肿瘤细胞凋亡, 并使细胞周期阻滞于G0/G1期, 这些可能与下调细胞周期素相关蛋白D1及上调调控细胞周期并抑制细胞分裂的重要抑癌基因p27有关.