研究快报
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世界华人消化杂志. 2013-09-28; 21(27): 2820-2825
Published online 2013-09-28. doi: 10.11569/wcjd.v21.i27.2820
转录因子ETS1 RNA干扰质粒的构建及其稳定转染胰腺癌细胞株的建立
王钟晗, 王彩莲, 陈蓉, 周旻, 陈岩
王钟晗, 王彩莲, 陈蓉, 周旻, 陈岩, 东南大学附属中大医院肿瘤中心 江苏省南京市 210009
王钟晗, 在读硕士, 主要从事消化系肿瘤的研究.
基金项目: 江苏省自然科学基金资助项目, No. BK2011604.
作者贡献分布: 王钟晗与王彩莲对此文所作贡献均等; 本课题由王钟晗、王彩莲、陈蓉、周旻及陈岩设计; 研究过程由王钟晗与王彩莲操作完成; 本论文写作由王钟晗与王彩莲完成.
通讯作者: 王彩莲, 主任医师, 博士生导师, 210009, 江苏省南京市鼓楼区丁家桥87号, 东南大学附属中大医院肿瘤中心. wangcailian65@hotmail.com
电话: 025-83272338
收稿日期: 2013-05-25
修回日期: 2013-08-05
接受日期: 2013-08-29
在线出版日期: 2013-09-28
Abstract

目的: 构建针对人转录因子ETS1的RNA干扰质粒, 鉴定并建立干扰质粒稳定转染的人胰腺癌PANC-1细胞株.

方法: 分别构建3条针对ETS1基因的shRNA干扰质粒(shRNA-1, shRNA-2, shRNA-3), 并将其转染至人胰腺癌PANC-1细胞株, 用药物G418筛选出稳定细胞株, Western blot鉴定稳转细胞株中ETS1表达量.

结果: 3条针对ETS1基因的shRNA干扰质粒转染胰腺癌PANC-1细胞株后, Western blot检测结果显示干扰质粒1(shRNA-1)具有最佳干扰效果. 将具有最佳干扰效果的质粒稳定转染人胰腺癌PANC-1细胞株后, 经Western blot鉴定相较于对照组稳定细胞株其ETS1表达量明显降低.

结论: 成功构建了针对人转录因子ETS1的RNA干扰质粒, 并建立其稳定转染的人胰腺癌PANC-1细胞株.

Keywords: 胰腺癌; ETS1转录因子; RNA干扰; 稳定转染; PANC-1

核心提示: 近年来, 国内外针对ETS1和胰腺癌之间的相关性研究逐渐引起关注, 因此我们设计构建了针对人转录因子ETS1的RNA干扰质粒, 并将其转染至胰腺癌PANC-1细胞株, 因为稳定转染的细胞株相较于瞬时转染的细胞株具有生物学特性稳定等一系列优点.