研究快报
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世界华人消化杂志. 2013-06-18; 21(17): 1649-1653
Published online 2013-06-18. doi: 10.11569/wcjd.v21.i17.1649
亚砷酸钠对大鼠骨髓间充质干细胞的过氧化损伤
吕海龙, 李思源, 慕晓玲, 姜玉峰
吕海龙, 石河子大学第一附属医院肝胆外科 新疆维吾尔自治区石河子市 832008
李思源, 慕晓玲, 姜玉峰, 石河子大学医学院组织胚胎学教研室 新疆维吾尔自治区石河子市 832008
吕海龙, 副主任医师, 主要从事肝胆外科的相关工作.
基金项目: 国家自然科学基金资助项目, No. 30960338; 兵团博士基金资助项目, No. 2011BB019; 兵团重点领域科技攻关基金资助项目, No. 2011BA058.
作者贡献分布: 本课题由吕海龙与姜玉峰共同设计; 研究过程由吕海龙完成; 本论文写作由姜玉峰、李思源及慕晓玲完成.
通讯作者: 姜玉峰, 副教授, 832008, 新疆维吾尔自治区石河子市北四路, 石河子大学医学院组织胚胎学教研室. yufengjiang03@126.com
电话: 0993-2057152
收稿日期: 2013-01-29
修回日期: 2013-03-15
接受日期: 2013-05-19
在线出版日期: 2013-06-18
Abstract

目的: 探索亚砷酸钠(sodiumarsenite, NaAsO2)对原代培养的大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells, MSCs)的氧化应激作用.

方法: 采集4周龄SD大鼠骨髓, 体外培养获得大鼠骨髓MSCs, 取第3代大鼠骨髓MSCs, 将不同浓度NaAsO2(10、20、30、40和50 μmol/L)作用于大鼠骨髓MSCs, 进行染毒, 染毒时间为24 h, 采用细胞毒性试验法观察NaAsO2对大鼠MSCs的细胞毒性作用, 利用2',7'-二乙酰二氯荧光素(2',7'-dichlorofluorescin diacetate, DCFH-DA)检测细胞内活性氧(reactive oxygen species, ROS)水平, 并测定细胞中丙二醛(malondialdehyde, MDA)含量及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)活力, 同时测定细胞内还原型谷胱甘肽(reduced glutathione, GSH)的含量, Caspase 3试剂盒检测Caspase 3酶活性.

结果: 不同浓度的NaAsO2作用于大鼠骨髓MSCs, 用MTS法进行细胞毒性检测显示, 当NaAsO2浓度≥20 μmol/L时, 大鼠骨髓MSCs吸光度值分别为1.98±0.09、1.45±0.12、1.26±0.11和1.02±0.15, 与对照组比较明显降低(P<0.01); 不同浓度NaAsO2作用于大鼠骨髓MSCs, DCF荧光强度分别为1572±124, 1998±97、2337±210、2878±154和3960±135, 与对照组相比均明显增高(P<0.05); 不同浓度NaAsO2作用于大鼠骨髓MSCs, MDA分别为1.4 EU/mL±0.06 EU/mL、1.9 EU/mL±0.12 EU/mL、2.3 EU/mL±0.08 EU/mL、2.6 EU/mL±0.11 EU/mL和3.3 EU/mL±0.09 EU/mL, 与对照组相比均明显增高(P<0.05); 不同浓度NaAsO2作用于大鼠骨髓MSCs, SOD分别为29 EU/mL±0.19 EU/mL、22 EU/mL±0.12 EU/mL、17 EU/mL±0.06 EU/mL、12 EU/mL±0.11 EU/mL和10 EU/mL±0.06 EU/mL, 与对照组相比均明显降低(P<0.05); 当NaAsO2浓度≥20 μmol/L时, 大鼠骨髓MSCs的GSH分别为75 EU/mL±0.11 EU/mL、71 EU/mL±0.8 EU/mL、62 EU/mL±0.12 EU/mL和54 EU/mL±0.9 EU/mL, 与对照组相比均明显降低(P<0.05).

结论: NaAsO2可以诱导大鼠骨髓MSCs氧化损伤增加, 提示氧化应激可能是NaAsO2致大鼠骨髓MSCs细胞毒作用机制之一.

Keywords: 亚砷酸钠; 间充质干细胞; 氧化损伤

核心提示: 亚砷酸钠(sodiumarsenite)降低细胞活力, 还原型谷胱甘肽(reduced glutathione, GSH)和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase)水平, 增加细胞内活性氧(reactive oxygen species), GSH和丙二醛(malondialdehyde)含量.