基础研究
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世界华人消化杂志. 2012-03-28; 20(9): 721-728
Published online 2012-03-28. doi: 10.11569/wcjd.v20.i9.721
肝细胞中HBV X基因的表达及其共培养的肝星状细胞的增殖和迁移
陈红英, 王小众, 陈治新
陈红英, 王小众, 陈治新, 福建医科大学附属协和医院消化内科 福建省福州市 350001
陈红英, 博士, 主要从事消化系统疾病的研究.
基金项目: 福建省科技人才基金资助项目, No. 2008F3043; 福建省卫生厅青年基金立项医院基金资助项目, No. XH200801.
作者贡献分布: 此课题由陈红英设计; 研究过程由陈红英操作完成; 研究所用新试剂及分析工具部分由王小众提供, 陈治新协助购买和筹备; 数据分析由陈红英完成; 本论文写作由陈红英完成.
通讯作者: 陈红英, 副主任医师, 350001, 福建省福州市, 福建医科大学附属协和医院消化内科. zxl16@sina.com
电话: 0591-83357896-8482
收稿日期: 2011-12-23
修回日期: 2012-01-19
接受日期: 2012-02-27
在线出版日期: 2012-03-28
Abstract

目的: 研究乙型肝炎病毒X(hepatitis B virus X, HBV X)基因在乙型肝炎病毒致肝纤维化中的作用.

方法: 构建HBV X基因真核表达载体pHBV-X-IRES2-EGFP, 将其转染人肝细胞HL-7702后分成2组, 一组经G418筛选出稳定表达HBV X基因的肝细胞株(L02/x), 另一组予瞬时转染48 h(L02/48x). Real-time PCR、Western blot鉴定2组细胞HBV X基因的表达. 与转染空质粒和未转染的肝细胞组对照, 将L02/x和L02/48x细胞分别与肝星状细胞(hepatic stellate cells, HSCs)共培养36 h, 并检测各组HSCs增殖和迁移情况.

结果: Real-time PCR和Western blot实验显示, 转染pHBV-X-IRES2-EGFP载体的L02/x和L02/48x细胞均有HBV X基因的表达. 与转染空质粒和未转染的肝细胞组对照, 与L02/x和L02/48x细胞共培养的HSCs的增殖和迁移均显著增多.

结论: HBV X基因在肝细胞中的表达可以促进HSCs发生增殖和迁移, 从而在乙型肝炎病毒致肝纤维化过程中起重要作用.

Keywords: 乙型肝炎病毒X基因; 肝星状细胞; 共培养; 增殖; 迁移