研究快报
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世界华人消化杂志. 2012-12-08; 20(34): 3361-3365
Published online 2012-12-08. doi: 10.11569/wcjd.v20.i34.3361
miR495、miR551a靶向干扰SGC7901细胞PRL-3基因的表达
蒋蒙蒙, 曹毅, 李正荣, 揭志刚
蒋蒙蒙, 南昌大学研究生院医学部, 南昌大学第一附属医院胃肠外科 江西省南昌市 330006
曹毅, 李正荣, 揭志刚, 南昌大学第一附属医院胃肠外科 江西省南昌市 330006
蒋蒙蒙, 硕士, 主要从事胃肠肿瘤基础及临床研究.
基金项目: 国家自然科学基金资助项目, No. 30901429.
作者贡献分布: 本课题由蒋蒙蒙与曹毅设计; 研究过程由李正荣与揭志刚指导; 蒋蒙蒙与曹毅共同操作完成; 论文写作、数据分析由蒋蒙蒙与曹毅完成.
通讯作者: 李正荣, 副教授, 330006, 江西省南昌市永外正街17号, 南昌大学第一附属医院胃肠外科. lizhengrong08@yahoo.com.cn
电话: 0791-88692522
收稿日期: 2012-10-04
修回日期: 2012-11-11
接受日期: 2012-11-23
在线出版日期: 2012-12-08
Abstract

目的: 构建靶向PRL-3基因的miRNA495和miRNA551a真核表达载体, 观察其转染胃癌SGC7901细胞后对胃癌细胞PRL-3基因表达的影响.

方法: 设计并合成两条针对PRL-3基因的特异性miRNA495和miRNA551a干扰序列, 分别与pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR载体连接, 转化大肠杆菌, 纯化并鉴定后利用LipofectamineTM2000转染胃癌SGC7901细胞, 实时定量PCR及Western blot技术鉴定重组体对PRL-3基因表达的干扰效果.

结果: 针对PRL-3基因的miRNA495和miRNA551a干扰质粒构建成功, 胃癌SGC7901细胞分别转染两种质粒后miRNA495及miRNA551a的表达明显升高, 并且明显抑制了PRL-3基因 mRNA及蛋白的表达.

结论: 靶向PRL-3基因的miRNA495和miRNA551a真核表达载体构建成功, 其可有效提高胃癌SGC7901细胞miRNA495和miRNA551a的表达, 并抑制PRL-3 mRNA及PRL-3蛋白的表达.

Keywords: PRL-3; miRNA495; miRNA551a; RNA干扰; 胃癌