研究快报
Copyright ©The Author(s) 2012. Published by Baishideng Publishing Group Inc. All rights reserved.
世界华人消化杂志. 2012-08-08; 20(22): 2086-2091
Published online 2012-08-08. doi: 10.11569/wcjd.v20.i22.2086
siRNA沉默Cyclin E基因对肝癌HepG2、SMMC-7721和BEL-7402细胞增殖和侵袭能力的影响
刘慧涛, 王娜, 李敏, 臧文巧, 吴睿, 赵国强
刘慧涛, 河南省南阳油田总医院消化科 河南省南阳市 473132
王娜, 李敏, 臧文巧, 赵国强, 郑州大学基础医学院 河南省郑州市 450001
吴睿, 郑州大学第二附属医院神经康复科 河南省郑州市 450014
刘慧涛, 主治医师, 主要从事消化系统肿瘤的治疗和研究.
作者贡献分布: 此课题由赵国强设计; 刘慧涛、王娜、李敏、臧文巧及吴睿操作完成; 数据分析由刘慧涛与王娜完成; 论文写作由刘慧涛、王娜及赵国强完成.
通讯作者: 赵国强, 教授, 450001, 河南省郑州市, 郑州大学基础医学院. zhaogq@zzu.edu.cn
收稿日期: 2012-05-10
修回日期: 2012-06-30
接受日期: 2012-07-20
在线出版日期: 2012-08-08
Abstract

目的: 观察siRNA沉默Cyclin E基因表达对肝癌HepG2、SMMC-7721和BEL-7402细胞增殖和侵袭能力的影响.

方法: 构建2个靶向Cyclin E基因siRNA载体, 转染人肝癌HepG2、SMMC-7721和BEL-7402细胞. RT-PCR、Western blot检测转染后HepG2、SMMC-7721和BEL-7402细胞Cyclin E基因mRNA和蛋白表达水平. CCK-8试验、软琼脂克隆形成实验检测HepG2、SMMC-7721和BEL-7402细胞增殖、克隆形成能力. 流式细胞术、transwell试验分别检测HepG2、SMMC-7721和BEL-7402细胞周期和侵袭能力.

结果: 构建的2个Cyclin E基因siRNA载体插入序列与所设计序列均一致; 转染HepG2、SMMC-7721和BEL-7402细胞后, 干扰1组、干扰2组与空白对照组和阴性对照组比较, Cyclin E mRNA和蛋白表达量均显著降低(P<0.05), 细胞生长速度延缓, 软琼脂细胞集落形成数、穿透细胞数均显著降低(P<0.05), S和G2/M期细胞比例减少, G0/G1期细胞比例增加.

结论: 沉默肝癌细胞Cyclin E表达水平, 可有效抑制细胞生长、增殖和侵袭能力.

Keywords: Cyclin E; siRNA; 肝癌细胞株; 细胞增殖; 细胞侵袭