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胰岛素对结肠平滑肌细胞增殖及其表达干细胞因子的影响
余盈娟, 袁玉丰, 林琳, 南京医科大学第一附属医院消化科 江苏省南京市 210029
余盈娟, 在读硕士, 主要从事胃肠动力性疾病方面的研究.
作者贡献分布: 该课题由余盈娟与林琳共同设计; 研究过程由余盈娟与袁玉丰合作完成; 研究所用试剂及分析工具由余盈娟提供; 数据分析及论文撰写由余盈娟完成; 林琳修改论文.
通讯作者: 林琳, 教授, 210029, 江苏省南京市广州路300号, 南京医科大学第一附属医院消化科. lin9100@yahoo.com.cn
收稿日期: 2010-11-23
修回日期: 2011-01-20
接受日期: 2011-01-26
在线出版日期: 2011-03-08
修回日期: 2011-01-20
接受日期: 2011-01-26
在线出版日期: 2011-03-08
Abstract
目的: 探讨胰岛素(Ins)对大鼠结肠平滑肌细胞(SMCs)增殖及其表达干细胞因子(SCF)的影响.
方法: 酶解法结合机械刮除法分离培养SD大鼠结肠SMCs, α-actin免疫荧光鉴定. 将SMC随机分为Ins剂量组(0、2.5、5、20、40、80 mg/L)与时间组(0、8、16、24 h), 观察Ins作用下SMCs的增殖及其合成SCF的情况. MTT法检测SMCs的增殖, Western blot及RT-PCR法检测SCF的表达.
结果: (1)5 mg/L时Ins即有显著的促SMCs增殖效应(0.052±0.006 vs 0.018±0.006, P<0.05); (2)低、中剂量Ins(2.5、5、20 mg/L)能促进结肠SMCs表达SCF(蛋白: 0.735±0.035, 0.754±0.057, 0.741±0.051 vs 0.658±0.024; mRNA: 0.688±0.077, 0.690±0.080, 0.698±0.074 vs 0.528±0.053, 均P<0.05); 高剂量Ins(40 mg/L)使SCF的表达达到最高峰(蛋白: 0.899±0.048 vs 0.658±0.024; mRNA: 0.938±0.117 vs 0.528±0.053; 均P<0.05); (3)SMC表达SCF在Ins作用16 h后达到峰值(蛋白: 0.899±0.011 vs 0.628±0.015; mRNA: 1.038±0.053 vs 0.709±0.042; 均P<0.05).
结论: Ins能促进结肠SMCs增殖, 并在一定范围内呈剂量与时间依赖性促进结肠SMCs表达SCF.
Keywords: 胰岛素; 平滑肌细胞; 干细胞因子; 大鼠