缺血型胆道纤维化狭窄大鼠模型的建立

Abstract

目的: 探索建立大鼠缺血型胆道纤维化狭窄动物模型的方法.

方法: 选取48只成年SD大鼠, 随机分为假手术组、胆总管夹闭60、120和180 min组共4组, 每组12只. 假手术组只游离暴露胆总管, 其他各组分别用两枚微血管夹夹闭游离的胆总管两端60、120和180 min后取出微血管夹, 恢复夹闭处胆管的血供. 4个实验组分别于术后4 wk随机选取8只大鼠行下腔静脉取血, 分离血清进行肝功能测定. 取胆总管及肝组织石蜡包埋, HE染色, 观察组织病理变化并观察各组动物的存活率、体质量改变情况. 剩余大鼠于术后8 wk处死, 行肝功能的测定及组织病理学检查.

结果: 假手术组、60 min组和120 min大鼠的存活率为100%, 180 min组大鼠的存活率为75%(9/12). 术后4 wk, 60、120和180 min组大鼠体质量明显低于较假手术组(240.4 g±11.5 g, 212.7 g±13.6 g, 200.6 g±11.8 g vs 260.6 g±15.7 g, 均P<0.05). 各组大鼠肝功能指标存在明显差异, 60、120、180min组与假手术组相比显著增高(ALT: 55.3 IU/L±5.3 IU/L, 215.6 IU/L±26.8 IU/L, 245.5 IU/L±38.5 IU/L vs 45.5 IU/L±3.9 IU/L, 均P<0.05; AST: 161.3 IU/L±15.9 IU/L, 645.3 IU/L±50.5 IU/L, 698.8 IU/L±46.7 IU/L vs 140.3 IU/L±6.1 IU/L, 均P<0.05; TILB: 8.5 μmol/L±1.2 μmol/L, 72.6 μmol/L±11.0 μmol/L, 78.7 μmol/L±12.2 μmol/L vs 6.1 μmol/L±1.2 μmol/L, 均P<0.05; ALP: 202.4 IU/L±20.7 IU/L, 815.4 IU/L±68.1 IU/L, 902.9 IU/L±96.6 IU/L vs 158.5 IU/L±23.6 IU/L, 均P<0.05; GGT: 10.6 IU/L±2.7 IU/L, 52.3 IU/L±8.6 IU/L, 57.4 IU/L±11.3 IU/L vs 7.6 IU/L±1.4 IU/L, 均P<0.05); 120与60 min组相比显著增高; 180 min与120 min相比升高不明显. 组织病理检查显示: 假手术组、60 min组缺血处胆管组织管腔狭窄不明显, 管壁纤维化程度较轻. 120和180 min组缺血处胆管管腔变小, 管壁纤维增厚明显, 管壁上皮细胞出现坏死脱落, 夹闭处以上胆管扩张明显, 管壁变薄. 术后8 wk上述病变不能自行恢复.

结论: 采用微血管夹钳夹的方法可以建立稳定的大鼠缺血型胆道纤维化狭窄动物模型, 为研究肝移植术后胆道的缺血型病变形成的机制及病因学研究提供可靠的研究方法.

Keywords: 胆道并发症; 缺血型胆道狭窄病变; 动物模型; 大鼠