基础研究
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世界华人消化杂志. 2011-06-28; 19(18): 1874-1879
Published online 2011-06-28. doi: 10.11569/wcjd.v19.i18.1874
乙型肝炎病毒X蛋白对人肝L-02细胞中COX-2表达的影响
靳梦杰, 刘慧涛, 赵国强
靳梦杰, 赵国强, 郑州大学基础医学院 河南省郑州市 450001
靳梦杰, 武警河南总队郑州市支队卫生队 河南省郑州市 450006
刘慧涛, 南阳市油田总医院 河南省南阳市 473132
靳梦杰, 医师, 主要从事消化系统疾病方面的研究.
作者贡献分布: 靳梦杰、刘慧涛及赵国强对此文所作贡献均等; 此课题由赵国强、靳梦杰及刘慧涛设计; 研究过程由靳梦杰与刘慧涛操作完成; 研究所用试剂及分析工具由赵国强提供; 数据分析由靳梦杰与刘慧涛完成; 本论文写作由靳梦杰与赵国强完成.
通讯作者: 赵国强, 教授, 450001, 河南省郑州市, 郑州大学基础医学院. zhaogq@zzu.edu.cn
电话: 0371-67781959
收稿日期: 2011-03-22
修回日期: 2011-06-18
接受日期: 2011-06-21
在线出版日期: 2011-06-28
Abstract

目的: 研究在人肝细胞L-02中乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)对环氧化酶2(COX-2)表达的影响.

方法: 构建HBx基因表达载体pIRES2-AcGFP-HBx, 转染入人肝细胞L-02中, RT-PCR和Western blot检测HBx对COX-2表达的影响; 通过细胞生长曲线和细胞周期变化, 检测HBx蛋白对细胞分裂增殖的作用. 同时将含有COX-2启动子核心片段的荧光素酶报告载体pGL3-COX-2转染入上述转染细胞, 检测细胞荧光素酶荧光值以观察HBx蛋白对COX-2启动子活性的影响.

结果: RT-PCR结果显示仅在HBx基因转染组细胞中有HBx mRNA的表达, 且该组细胞中COX-2 mRNA相对表达量显著高于空载体对照组和空白对照组(0.76±0.12 vs 0.28±0.04, 0.25±0.03, 均P<0.01); Western blot结果显示, 仅HBx基因转染组可见HBx蛋白有明显印迹条带, 且该组细胞中COX-2蛋白免疫印迹较两对照组深; 细胞生长曲线测定表明HBx基因转染组细胞在第3、4、5天的生长较两对照组显著加快(P<0.05); 细胞周期测定显示与两对照组相比, HBx基因转染组G0-G1期比例显著降低, S期和G2-M期比例显著增加(P<0.05). HBx基因转染组COX-2启动子荧光素酶荧光值显著高于空载体对照组和空白对照组(1 675.2± 84.9 vs 657.7± 34.7, 739.3± 45.3, 均P<0.05).

结论: HBx蛋白可增强人肝L-02细胞中COX-2的表达水平, 对L-02细胞分裂增殖、生长有明显促进作用; HBx蛋白可通过提高COX-2启动子的活性以增强COX-2的表达.

Keywords: 乙型肝炎病毒; 乙型肝炎病毒X蛋白; 环氧化酶2; 肝癌