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世界华人消化杂志. 2011-05-08; 19(13): 1331-1335
Published online 2011-05-08. doi: 10.11569/wcjd.v19.i13.1331
Published online 2011-05-08. doi: 10.11569/wcjd.v19.i13.1331
肝癌细胞蛋白质组在DTT诱导内质网应激条件下的表达
严冬梅, 刘友平, 代荣阳, 段春燕, 泸州医学院生物化学教研室 四川省泸州市 646000
陈绍坤, 泸州医学院细胞生物学和遗传学教研室 四川省泸州市 646000
严冬梅, 讲师, 主要从事肝病分子机制方面的研究.
基金项目: 国家自然科学基金资助项目, No. 81000886;四川省卫生厅基金资助项目, No. 100220;泸州医学院青年基金资助项目, No. 72.
作者贡献分布: 严冬梅与陈绍坤对此论文作贡献均等; 此课题设计由严冬梅、代荣阳及陈绍坤完成; 研究过程由严冬梅、刘友平及段春燕操作完成; 本论文写作由严冬梅与陈绍坤共同完成.
通讯作者: 陈绍坤, 讲师, 646000, 四川省泸州市, 泸州医学院细胞生物学和遗传学教研室. luyicsk@163.com
收稿日期: 2011-02-22
修回日期: 2011-03-30
接受日期: 2011-04-11
在线出版日期: 2011-05-08
修回日期: 2011-03-30
接受日期: 2011-04-11
在线出版日期: 2011-05-08
Abstract
目的: 研究内质网应激条件下肝癌细胞SMMC-7721蛋白质组的表达, 为人类肝细胞癌的诊治提供新的靶点.
方法: 培养肝癌细胞株SMMC-7721, 随机分为两组, 即实验组和对照组. 实验组加入二硫苏糖醇(DTT, 2.5 mmol/L), 对照组加入等量的培养基, 裂解细胞, 提取全细胞蛋白. 双向电泳(2-DE)分离, Image Master 2D Platinum软件进行差异表达蛋白质组分析, 基质辅助激光解吸附离子化飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)鉴定蛋白质.
结果: 实验组肝癌细胞SMMC-7721的2-DE图谱上共检出蛋白质斑点(844±46)个, 对照组共检出蛋白质斑点(1 015±63)个, 对照组与实验组自动匹配配对(593±23)对, 匹配率约71%左右, 绝大多数蛋白集中于pH5.2-6.5, 相对分子质量15 000-80 000 Da; 获得组间标准化总灰度值(%Vol)相差2倍及以上的蛋白斑点3个, 通过MALDI-TOF-MS分析鉴定了3个差异蛋白质点, 分别是: fem-1同源蛋白B、细胞周期素A1、增殖诱导蛋白44.
结论: 鉴定的3个肝癌细胞株SMMC-7721在内质网应激下表达改变的蛋白质, 其功能涉及细胞增殖、细胞凋亡以及细胞周期等, 具有潜在的作为肝癌诊断、预后标记物或治疗靶点的意义.
Keywords: 内质网应激; 肝癌细胞SMMC-7721; 蛋白质组; 二硫苏糖醇