基础研究
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世界华人消化杂志. 2011-04-28; 19(12): 1225-1230
Published online 2011-04-28. doi: 10.11569/wcjd.v19.i12.1225
表达HBVX基因的小鼠模型的建立及对肝细胞凋亡因子的影响
郭晨, 李丹, 林纳, 黄月红, 陈治新, 王小众
郭晨, 李丹, 林纳, 黄月红, 陈治新, 王小众, 福建医科大学附属协和医院消化内科 福建省福州市 350001
郭晨, 主要从事消化系统疾病及肝病方向的研究.
作者贡献分布: 此课题由郭晨、李丹及林纳设计; 研究过程由郭晨操作完成; 研究所用试剂仪器由黄月红与陈治新提供; 数据分析由郭晨完成; 本论文写作由郭晨完成; 王小众进行批评性审阅.
通讯作者: 王小众, 教授, 主任医师, 350001, 福建省福州市鼓楼区新权路29号, 福建医科大学附属协和医院消化内科. drwangxz@public6.fz.fj.cn
电话: 0591-83357896
收稿日期: 2011-02-25
修回日期: 2011-03-29
接受日期: 2011-04-11
在线出版日期: 2011-04-28
Abstract

目的: 探讨乙型肝炎病毒X(HBVX)基因及其产物对肝细胞凋亡相关基因表达的影响.

方法: 将实验用SPF级成年♂KM小鼠分为实验组、空质粒对照组、生理盐水对照组. 实验组以构建好的PCDNA3.1-HBVX质粒, 空质粒对照组以PCDNA3.1质粒, 生理盐水对照组以生理盐水, 通过尾静脉高压注入动物体内, 在第48小时处死小鼠后, 取肝组织, 以RT-PCR, 凝胶回收测序及Western blot检测HBVX表达, 以RT-PCR半定量检测小鼠肝组织内bax、c-myc及bcl-2的表达.

结果: 实验组RT-PCR显示465 bp处有清楚条带, 肝组织内有HBVX mRNA的存在, 两对照组无HBVX mRNA存在, Western blot检测实验组有HBVX蛋白的表达; 两对照组则无HBVX蛋白表达. 通过对小鼠肝组织凋亡相关因子的半定量RT-PCR, 相对于空质粒对照组和生理盐水对照组, 转染HBVX基因的小鼠肝组织bax、c-myc及bcl-2的mRNA相对表达量明显增高, 差异有显著性意义(bax: 1.3127±0.0900 vs 1.0023±0.1670, 0.9094±0.1081; c-myc: 1.6294±0.0672 vs 1.2869±0.0880, 0.9757±0.0397; bcl-2: 1.5567±0.1257 vs 0.6856±0.1554, 0.5488±0.1278, 均P<0.05).

结论: 成功建立了表达HBVX的小鼠动物模型, 并证明转染HBVX基因后小鼠肝脏组织内bax、bcl-2及c-myc的mRNA表达同时上调.

Keywords: 乙型肝炎病毒X基因; 肝细胞; 凋亡; 小鼠模型