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硝普钠诱导肝星状细胞HSC-T6凋亡及其机制
张明明, 崔东来, 张振科, 河北医科大学第二医院消化内科 河北省石家庄市 050000
杨帅, 承德医学院附属医院肿瘤外科 河北省承德市 067000
高福禄, 河北师范大学 河北省石家庄市 050017
马洪骏, 邳克江, 河北医科大学 河北省石家庄市 050017
张明明, 河北医科大学硕士, 主要从事消化系统疾病的研究.
作者贡献分布: 本课题由崔东来与张明明设计; 数据分析由张明明与杨帅共同完成; 研究过程操作由张明明完成; 论文撰写由张明明完成; 修改由崔东来与张振科完成; 研究所用新试剂, 新设备及分析工具由高福禄、马洪骏及邳克江提供; 研究过程由高福禄、马洪骏、邳克江及张振科指导.
通讯作者: 崔东来, 主任医师, 050000, 河北省石家庄市和平西路215号, 河北医科大学第二医院消化内科. liver369@126.com
电话: 0314-66002951
收稿日期: 2009-12-13
修回日期: 2010-01-26
接受日期: 2010-02-01
在线出版日期: 2010-03-18
修回日期: 2010-01-26
接受日期: 2010-02-01
在线出版日期: 2010-03-18
Abstract
目的: 探讨一氧化氮(nitric oxide, NO)供体硝普钠(sodium nitroprusside, SNP)在诱导肝星状细胞(hepatic stellate cell, HSC-T6)凋亡中的作用及其机制.
方法: 应用流式细胞仪和Hoechst 33258染色法检测HSC凋亡; 激光扫描共聚焦显微镜检测荧光标记NF-κB p65的核转位; Real -time PCR方法检测基质金属蛋白酶抑制因子-1(tissue inhibitors of matrix metalloproteinase-1, TIMP-1)、Ⅰ型前胶原(ProcollagenⅠ)、抗凋亡蛋白基因(growth arrest and DNA damage-inducible protein, GADD45β) mRNA表达.
结果: SNP组HSC凋亡率较对照组显著增加(20.78%±5.91% vs 3.25%±1.26%, P = 0.031), Hoechst 33258染色法显示SNP组HSC细胞核呈致密浓染块状或颗粒状的荧光, 提示细胞出现凋亡; SNP抑制TNF介导活化的HSC NF-κB p65核转位; 随着其剂量不断增加, TIMP-1, ProcollagenⅠ, GADD45β mRNA表达随之减少(P<0.05).
结论: SNP能诱导HSC凋亡, 减少TIMP-1, ProcollagenⅠ mRNA表达, 其机制可能与通过抑制NF-κB活性, 减少抗凋亡蛋白基因GADD45β mRNA表达有关.
Keywords: 硝普钠; 核因子-κB; 肝纤维化