基础研究
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世界华人消化杂志. 2010-10-08; 18(28): 2956-2965
Published online 2010-10-08. doi: 10.11569/wcjd.v18.i28.2956
启膈散、沙参麦冬汤、通幽汤和补气运脾汤对hEGF刺激的人食管癌EC9706细胞生长信号转导的调节
司富春
司富春, 河南中医学院中医药分子生物学实验室 河南省郑州市 450008
司富春, 博士后, 教授, 主要从事肿瘤中医方证方面的研究.
基金项目: 国家自然科学基金资助项目, No. 30371716; No. 30873220; No. 30973698;国家留学回国人员基金优秀项目, No. 国人厅发(2007)170号;国家中医药管理局留学回国人员科技活动择优基金资助项目, No. 2003LHR12.
通讯作者: 司富春, 教授, 450008, 河南省郑州市, 河南中医学院中医药分子生物学实验室. sifc2000@hotmail.com
电话: 0371-65680049
收稿日期: 2010-05-15
修回日期: 2010-07-05
接受日期: 2010-07-21
在线出版日期: 2010-10-08
Abstract

目的: 探讨食管癌中医证方启膈散、沙参麦冬汤、通幽汤和补气运脾汤对hEGF刺激的人食管癌EC9706细胞生长的影响, 进而研究该证方抑制食管癌细胞生长信号转导的机制.

方法: 体外正常条件培养食管鳞癌细胞株EC9706细胞, 无血清饥饿细胞24 h, 用200 ng/mL hEGF刺激细胞45 min后, 加入启膈散、沙参麦冬汤、通幽汤和补气运脾汤, 通过镜下形态观察、MTT染色、流式细胞技术观察细胞增殖变化情况. 取抑制EGF刺激EC9706细胞增殖IC50所用的各方药物浓度处理细胞, 用Western blot方法检测细胞内PLC-γ1和PI3K介导的生长信号通路的蛋白表达和酪氨酸磷酸水平.

结果: 启膈散、沙参麦冬汤、通幽汤抑制细胞增殖的IC50值分别为849、1 004和1 615 mg/L, 以此浓度干预细胞, 可明显抑制细胞生长, 阻止细胞进入S期, 补气运脾汤对此细胞株无明显抑制作用. 在两个生长信号通路中, 3方可不同程度地抑制EGFR和PLC-γ1蛋白表达和酪氨酸磷酸化, 以及PKCα、MARCKS、PI3K、AKT-1和NF-κB p50蛋白的表达, 其中, 在PLC-γ1通路中, 抑制作用强弱依次是: 通幽汤>启膈散>沙参麦冬汤; 在PI3K通路中, 作用强弱依次是: 通幽汤>沙参麦冬汤>启膈散.

结论: 启膈散、沙参麦冬汤和通幽汤可不同程度地抑制hEGF刺激的EC9706细胞生长. 抑制PLC-γ1和PI3K介导的生长信号转导是其抑制EC9706细胞生长的重要机制.

Keywords: 食管癌; EC9706细胞; 人表皮生长因子; 启膈散; 沙参麦冬汤; 通幽汤; 补气运脾汤; 生长信号转导