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Mφ1和Mφ2对γδT细胞体外抗胃癌细胞SGC-7901作用的影响
武侠, 吴萍, 徐州市中心医院消化科 江苏省徐州市 221009
费素娟, 徐州医学院附属医院消化科 江苏省徐州市 221002
刘军权, 陈复兴, 中国人民解放军第九七医院中心实验室 江苏省徐州市 221004
武侠, 医学硕士, 主要从事消化系肿瘤的基础和临床研究.
作者贡献分布: 此课题由武侠、费素娟、刘军权、陈复兴及吴萍共同设计; 研究过程由武侠、刘军权与陈复兴操作完成; 研究所用新试剂由费素娟提供; 研究所用分析工具由刘军权与陈复兴提供; 数据分析由武侠完成; 本论文写作由武侠完成.
通讯作者: 武侠, 主治医师, 221009, 江苏省徐州市, 徐州市中心医院消化内科. wuxiafang1974@163.com
电话: 0516-83956340
收稿日期: 2009-11-05
修回日期: 2009-11-20
接受日期: 2009-11-30
在线出版日期: 2010-01-08
修回日期: 2009-11-20
接受日期: 2009-11-30
在线出版日期: 2010-01-08
Abstract
目的: 探讨经典激活的巨噬细胞(Mφ1)和选择性激活的巨噬细胞(Mφ2)培养上清液对人γδT细胞增殖、表面标志、杀瘤活性的影响及其作用机制.
方法: 在体外用GM-CSF和IFN-γ诱导培养Mφ1, 用M-CSF培养Mφ2, 已戊烯焦磷酸法扩增外周血γδT细胞. 用流式细胞术(FCM)检测巨噬细胞、γδT细胞表面标志, 用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测IL-10、IL-12含量, 用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测巨噬细胞培养上清对γδT细胞增殖的影响. 用乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测巨噬细胞培养上清对γδT细胞的杀瘤活性的影响.
结果: 体外诱导培养10 d的Mφ1和Mφ2均高表达CD68(73.2% vs 61.8%), Mφ1分泌IL-12的浓度显著高于Mφ2 (35 mg/L vs 9 mg/L, P<0.01), Mφ1分泌IL-10的浓度明显低于Mφ2(15 mg/L vs 87 mg/L, P<0.01). 不同浓度Mφ1上清组对γδT细胞的增值率均高于对照组或Mφ2组(338% vs 11%, 0, P<0.01). Mφ1培养上清作用后的γδT细胞表面标志γδT CR表达率高于Mφ2组和对照组, 有统计学意义(97.3% vs 89.1%, 91.3%, P<0.05). 不同浓度Mφ1上清组对γδT细胞的杀瘤活性均高于对照组或Mφ2组(70.18% vs 51.38%, 47.25%, P<0.01).
结论: Mφ1能够促进γδT细胞生长, 而且能够提高γδT细胞对胃癌SGC-7901细胞的杀伤活性, Mφ2对γδT细胞作用不明显.
Keywords: 经典激活的巨噬细胞; 选择性激活的巨噬细胞; γδT细胞; 白介素-10; 白介素-12