基础研究
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世界华人消化杂志. 2009-07-28; 17(21): 2137-2141
Published online 2009-07-28. doi: 10.11569/wcjd.v17.i21.2137
靶向干预N-WASP功能区对大肠癌细胞侵袭转移能力的影响
黄宝玉, 赵任, 秦婧, 贾晓斌, 朱建伟
黄宝玉, 贾晓斌, 朱建伟, 南通大学附属医院普外科 江苏省南通市 226001
赵任, 上海交通大学医学院附属瑞金医院普外科 上海市 200025
秦婧, 南通大学医学院病理教研室 江苏省南通市 226001
黄宝玉, 住院医师, 硕士研究生, 主要从事消化系肿瘤的基础与临床研究.
基金项目: 国家自然科学基金资助项目, No. 30771126; No. 30772106; 教育部回国留学人员基金资助项目, No. 2008-890; 江苏省自然科学基金资助项目, No. BK2006058.
作者贡献分布: 此项课题由朱建伟设计; 研究工作由黄宝玉、赵任、秦婧及贾晓斌共同完成; 研究所用试剂和分析工具由朱建伟提供; 论文由黄宝玉与朱建伟撰写.
通讯作者: 朱建伟, 226001, 江苏省南通市, 江苏南通大学附属医院普外科. usazhujianwei@yahoo.com.cn
电话: 0513-81161221
收稿日期: 2009-05-26
修回日期: 2009-07-12
接受日期: 2009-07-13
在线出版日期: 2009-07-28
Abstract

目的: 探讨干扰N-WASP功能区对大肠癌细胞侵袭转移能力的影响.

方法: 采用基因克隆方法构建包含N-WASP功能区V片段的重组质粒, 转染大肠癌株LoVo. 采用Transwell穿膜实验观察大肠癌细胞侵袭能力的变化; 应用Capture-ELISA方法检测大肠癌细胞内吞生物素标记的转铁蛋白(Tfn)的能力改变. 脾内注射制备大肠癌肝转移裸鼠模型, 在体内进一步观察大肠癌细胞转移能力改变.

结果: 成功构建了含有N-WASP的V结构区域的重组质粒, 并转染大肠癌株LoVo获得稳定表达. 实验组表达V片段的大肠癌细胞穿膜的细胞数为42.15±7.35, 而对照表达空载体的大肠癌细胞穿膜细胞数为85.25±6.16, 未转染的大肠癌细胞穿膜细胞数为84.35±7.99, 与实验组相比具有显著差异(P<0.05). 表达V片段的大肠癌细胞内吞转铁蛋白的数量较对照组明显减少, 内吞作用能力减弱. 动物实验显示表达V片段的大肠癌细胞肝转移发生数为2/12, 较对照组(10/12)和未转染组(10/12)明显减少.

结论: 靶向干预N-WASP与微丝蛋白结合的功能区域的新方法能够抑制人大肠癌细胞的侵袭和转移能力.

Keywords: N-WASP; 大肠癌; 转移; 肌动蛋白单体; Transwell穿膜实验