研究快报
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世界华人消化杂志. 2009-07-08; 17(19): 1986-1989
Published online 2009-07-08. doi: 10.11569/wcjd.v17.i19.1986
HepG2细胞在不同琼脂糖浓度下克隆形成能力的比较
丁洁, 魏德全, 蒋吉英, 王宝松, 姜栋栋, 于树娜, 王晓萃
丁洁, 魏德全, 蒋吉英, 王宝松, 姜栋栋, 于树娜, 王晓萃, 潍坊医学院人体解剖教研室 山东省潍坊市 261042
基金项目: 山东省"泰山学者"建设工程专项基金资助项目; 山东省科技攻关计划基金资助项目, No. 2006GG3202016.
作者贡献分布: 丁洁与蒋吉英对此文所作贡献均等; 此课题由丁洁、魏德全、蒋吉英及于树娜共同设计; 研究所用试剂及分析工具由丁洁、魏德全、蒋吉英及王晓萃提供; 数据分析由丁洁、魏德全、王宝松及姜栋栋完成; 本论文写作由丁洁、魏德全及蒋吉英完成.
通讯作者: 蒋吉英, 教授, 261042, 山东省潍坊市, 潍坊医学院人体解剖教研室. jiangjiying2002@163.com
电话: 0536-2602504
收稿日期: 2009-04-07
修回日期: 2009-06-12
接受日期: 2009-06-23
在线出版日期: 2009-07-08
Abstract

目的: 探讨分离细胞克隆的最佳细胞密度和最适琼脂浓度, 为肿瘤干细胞的筛选提供更广阔的思路.

方法: 将HepG2单细胞悬液与10 g/L的琼脂糖相混合, 在2 g/L(A组)和3 g/L(B组)琼脂中接种不同密度的HepG2细胞, 14 d后观察克隆形成.

结果: 100-1000个/孔的各个实验组中, A组细胞的克隆数高于B组, 差异有统计学意义(t = 4.36, P<0.05); 在细胞密度为100-500个/孔时, A、B组细胞克隆形成率随着细胞密度的增加逐渐增加; 600-1000个/孔, A、B组均随着细胞密度的逐渐加大, 克隆形成率呈现下降趋势.

结论: 在进行软琼脂克隆形成实验时, 可以采用2 g/L的上层琼脂浓度, 并采用10 g/L的琼脂糖凝胶作为储备胶, HepG2细胞在500个/孔时的克隆形成率最高.

Keywords: 软琼脂克隆; HepG2细胞; 克隆形成率