基础研究
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世界华人消化杂志. 2009-05-18; 17(14): 1384-1389
Published online 2009-05-18. doi: 10.11569/wcjd.v17.i14.1384
p21WAF1基因对人食管鳞癌细胞增殖的抑制作用
张学彦, 景德怀, 刘志强, 关景明, 刘伟
张学彦, 景德怀, 刘志强, 关景明, 哈尔滨医科大学附属二院消化科 黑龙江省哈尔滨市 150086
刘伟, 哈尔滨医科大学附属二院分子实验中心 黑龙江省哈尔滨市 150086
张学彦, 副主任医师, 医学博士, 主要从事消化系统肿瘤的防治研究.
基金项目: 黑龙江省科技计划攻关重点基金资助项目, No. GB05C401-09.
作者贡献分布: 此课题由张学彦与关景明设计; 研究过程由张学彦、景德怀、刘志强及刘伟操作完成; 研究所用新试剂及分析工具部分由刘伟提供; 数据分析与论文写作由张学彦完成.
通讯作者: 张学彦, 副主任医师, 150086, 黑龙江省哈尔滨市学府路246号, 哈尔滨医科大学附属二院消化科. zxycxw@sina.com
电话: 0451-86605143
收稿日期: 2009-02-09
修回日期: 2009-03-20
接受日期: 2009-03-23
在线出版日期: 2009-05-18
Abstract

目的: 探讨p21WAF1(p21)基因转染对食管鳞癌细胞系EC109细胞增殖的影响. 

方法: 根据转染质粒的不同和是否进行质粒转染分为3组. p21转染组: 用脂质体Lipofectamine2000介导将pCDNA3.1(+)-p21质粒转染入EC109细胞; 空载体转染组: 同样方法将pCDNA3.1(+)-neo质粒转染入EC109细胞; 未转染组: 未转染的EC109细胞. 应用RT-PCR、Western blot分别检测p21基因mRNA、P21蛋白变化; 流式细胞仪分析细胞周期变化, 应用MTT、流式细胞仪和透射电镜检测转染外源p21基因对EC109细胞增殖和凋亡的影响. 

结果: p21转染细胞中p21 mRNA和P21蛋白高表达; p21转染组EC109细胞生长速度低于空载体组和未转染组; 流式细胞仪观察到P21蛋白高表达使EC109细胞发生G1/S阻滞, G1期细胞比例显著高于空载体组和未转染组(63.120%±2.893% vs 41.380%±6.536%, 42.173%±5.301%, 均P<0.01), S期比例显著低于空载体组和未转染组(18.923%±3.084% vs 22.573%±5.463%, 26.867%±2.922%, 均P<0.01), 并出现亚G1峰(凋亡峰). 透射电镜亦发现p21转染组发生细胞凋亡.

结论: p21基因转染可以抑制人食管鳞癌细胞系EC109细胞增殖并能诱导其发生细胞凋亡.

Keywords: p21WAF1; 基因转染; 食管鳞癌