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世界华人消化杂志. 2009-05-08; 17(13): 1286-1291
Published online 2009-05-08. doi: 10.11569/wcjd.v17.i13.1286
Published online 2009-05-08. doi: 10.11569/wcjd.v17.i13.1286
沉默肝癌衍生生长因子对大肠癌细胞增殖的抑制
廖斐, 董卫国, 罗和生, 刘蒙, 武汉大学人民医院消化内科 湖北省武汉市 430060
廖斐, 武汉大学医学院博士在读, 主要从事胃肠道肿瘤的研究.
作者贡献分布: 此课题由董卫国、廖斐及罗和生共同设计; 研究过程由廖斐与刘蒙完成; 数据分析由廖斐完成; 本论文写作由廖斐完成.
通讯作者: 董卫国, 教授, 430060, 湖北省武汉市紫阳路99号, 武汉大学人民医院消化内科. dwgwuhan@163.com
电话: 027-88041911-6948 传真: 027-88042292
收稿日期: 2009-02-28
修回日期: 2009-03-26
接受日期: 2009-03-30
在线出版日期: 2009-05-08
修回日期: 2009-03-26
接受日期: 2009-03-30
在线出版日期: 2009-05-08
Abstract
目的: 研究沉默肝癌衍生生长因子(hepatoma-derived growth factor, HDGF)对人大肠癌lovo细胞增殖的影响.
方法: 将3条HDGF的特异性小干扰RNA(HDGF-siRNA)通过脂质体介导瞬时转染入大肠癌lovo细胞, RT-PCR及Western blot法分别检测HDGF mRNA和蛋白质表达受抑程度, 并筛选出1条沉默效率最高的siRNA用于后续试验; MTT法观察HDGF-siRNA对大肠癌细胞增殖生长的影响; Western blot法检测增殖细胞核抗原(PCNA)及ERK通路蛋白在转染前后大肠癌lovo细胞中表达含量的变化.
结果: HDGF-siRNA转染能有效抑制大肠癌lovo细胞中HDGF的表达; 与空白及阴性对照组相比, RNA干扰组大肠癌lovo细胞增殖率明显降低(t = 4.432, 4.263, 均P<0.01)、PCNA和p-ERK1/2蛋白均明显下调(t = 14.89, 11.92, 均P<0.01).
结论: HDGF-siRNA不仅有效阻断HDGF在大肠癌lovo细胞的表达, 而且明显抑制大肠癌lovo细胞的增殖, 其作用机制可能与下调PCNA, 抑制ERK1/2蛋白活化有关.
Keywords: 肝癌衍生生长因子; 增殖细胞核抗原; ERK通路; 细胞增殖