研究快报
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世界华人消化杂志. 2008-03-08; 16(7): 767-770
Published online 2008-03-08. doi: 10.11569/wcjd.v16.i7.767
RNAi沉默PRL-3基因对大肠癌细胞侵袭的抑制
钱立平, 范钰, 陈坚, 林庚金
钱立平, 陈坚, 林庚金, 复旦大学附属华山医院消化科 上海市 200040
范钰, 江苏大学附属人民医院肿瘤研究所, 化疗科 江苏省镇江市 212002
基金项目: 镇江市科技计划基金资助项目, No. SH2006019.
作者贡献分布: 钱立平与范钰对此文所作贡献均等; 此课题由范钰设计; 研究过程由钱立平, 陈坚操作完成; 研究所用试剂及分析工具均由范钰, 钱立平提供; 数据分析由陈坚, 林庚金完成; 本论文写作由钱立平, 范钰完成.
通讯作者: 范钰, 212002, 江苏省镇江市电力路8号, 江苏大学附属人民医院肿瘤研究所, 化疗科. yufanzh99@sina.com
电话: 0511-85797359
收稿日期: 2007-10-07
修回日期: 2008-01-03
接受日期: 2008-01-15
在线出版日期: 2008-03-08
Abstract

目的: 探讨RNA干扰(RNA interference, RNAi)沉默促肝细胞再生磷酸酶3(proteins in regenerating liver cell-3, PRL-3)基因对大肠癌细胞侵袭的影响. 

方法:  应用PRL-3基因小干扰RNA(small interfering RNA, siRNA)转染处理大肠癌细胞系HCT116后, 采用荧光实时定量PCR方法检测PRL-3基因mRNA水平, 分别采用软琼脂集落培养实验和Boyden小室模型实验检测癌细胞的锚着不依赖性增殖和侵袭能力. 其次将转染48 h的细胞接种裸鼠, 观察对癌细胞体内侵袭的影响. 

结果: 与两对照组比较, siRNA组PRL-3 mRNA水平明显降低, 且呈浓度和时间依赖性(P<0.05). 体外实验发现: 与对照组比较, PRL-3 siRNA转染组软琼脂集落形成数和穿过滤膜的癌细胞均呈剂量依赖性减少(P<0.05, P<0.05). 体内实验发现: 空白对照组和空载对照组有较多癌细胞侵袭癌肿组织周围的横纹肌, 并侵犯血管, 而siRNA转染组未见这些现象.

结论:  PRL-3在大肠癌细胞侵袭中起着重要的作用, 采用PRL-3 siRNA转染可抑制大肠癌细胞侵袭.

Keywords: 大肠肿瘤; 促肝细胞再生磷酸酶3; 侵袭; RNA干扰; 小干扰RNA; 荧光实时定量聚合酶链式反应