研究快报
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世界华人消化杂志. 2008-12-18; 16(35): 3988-3992
Published online 2008-12-18. doi: 10.11569/wcjd.v16.i35.3988
内毒素休克小鼠肝脏细胞质膜差异蛋白质组的二维液相色谱分析
李红梅, 陈丽, 夏高晓, 赵明哲, 胡水旺, 姜勇
李红梅, 陈丽, 夏高晓, 赵明哲, 胡水旺, 姜勇, 南方医科大学病理生理学教研室 广东省蛋白质组学重点实验室 广东省广州市 510515
基金项目: 国家自然科学基金委-广东省人民政府自然科学联合基金重点资助项目, No. U0632004; 国家自然科学基金资助项目, No. 30572151; No. 30670828; 教育部长江学者和创新团队发展计划基金资助项目, No. IRT0731.
作者贡献分布: 此课题由李红梅和姜勇设计; 研究过程由李红梅、陈丽、夏高晓、赵明哲及胡水旺操作完成; 数据分析由李红梅和陈丽完成; 本论文写作由李红梅和姜勇完成.
通讯作者: 姜勇, 510515, 广东省广州市, 南方医科大学病理生理学教研室. yjiang@fimmu.com
电话: 020-61648172 传真: 020-87705671
收稿日期: 2008-09-24
修回日期: 2008-11-22
接受日期: 2008-11-24
在线出版日期: 2008-12-18
Abstract

目的: 建立和优化肝脏细胞质膜蛋白质研究的方法系统, 并对正常组小鼠和内毒素休克小鼠组肝脏细胞质膜蛋白质进行二维液相色谱分离, 分析两者之间的差异表达谱.

方法: BALB/c小鼠20只随机分为正常组和内毒素休克小鼠组(10只, LPS刺激3 h, LPS剂量为35 mg/kg), n = 10. 采用差速离心结合蔗糖密度梯度离心法分离和富集两组肝脏细胞质膜蛋白, 分别将两组样品按蛋白质PI进行一维的色谱聚焦分离, 然后每个PI组分再按蛋白质的疏水性经二维HPLC分离, 利用ProteoVue软件将UV光吸收图谱转换成PI对疏水性的胶样图谱, 再利用DeltaVue软件分析两组肝脏质膜蛋白质组的表达差异.

结果: 图像分析显示两组比值在≥2.0及≤0.5的差异蛋白点共有24个, 与正常组比较, 在内毒素休克小鼠的肝脏质膜蛋白中有16个蛋白点表达上调, 8个蛋白点表达下调.

结论: 正常组和内毒素休克小鼠组的肝脏质膜蛋白质组有明显差异.

Keywords: 内毒素休克; 质膜蛋白质组; 二维液相色谱分离